本文關鍵詞：甜菜堿對孕前灌酒雌鼠早期植入前胚胎H3K9乙�；降挠绊�

  更多相關文章： 酒精攝入 甜菜堿 雌鼠 植入前胚胎 H3K9乙�；�

【摘要】：胚胎發(fā)育受環(huán)境影響表現(xiàn)在妊娠過程中的任何環(huán)節(jié),包括配子形成、胚胎發(fā)育、胎兒成熟等各種時期。女性長期過度飲酒,其后代會出現(xiàn)發(fā)育遲緩,身體畸形及精神行為異常等病癥的幾率大大增加。本實驗采用體內沖胚法及體外胚胎培養(yǎng)技術獲取各組卵母細胞及各期植入前胚胎,并使用亮甲酚藍染色法及免疫熒光技術對各組卵母細胞活性和早期植入前胚胎H3K9乙�；竭M行研究。同時也對各組實驗動物肝臟及血清中的丙二醛(MDA)含量進行測定,以期為研究“胎兒酒精綜合癥"(FASD)的發(fā)病機理及人類優(yōu)生優(yōu)育提供一定的借鑒和參考。實驗分組如下：對照組,攝入等劑量生理鹽水；灌酒組Ⅰ,攝入20%酒精；甜菜堿組Ⅰ,攝入20%酒精+甜菜堿；灌酒組Ⅱ,攝入40%酒精；甜菜堿組Ⅱ,攝入40%酒精+甜菜堿。實驗結果：1.甜菜堿組血清中的MDA含量低于灌酒組,高于對照組,且灌酒組ⅡMDA含量高于灌酒組Ⅰ,均差異顯著(P0.05)；2.用26umol/1的亮甲酚藍對雌鼠未成熟卵母細胞染色后,結果顯示,與對照組相比,實驗組小鼠未成熟卵母細胞G6PD活性降低,同時灌酒組下降幅度略高于甜菜堿組,差異不顯著；3.各組MII期卵母細胞均未檢測到H3K9乙酰化間接免疫熒光：體內灌酒組Ⅰ在桑葚胚期H3K9乙�；礁哂趯φ战M,囊胚期結果則相反；體外灌酒組Ⅰ各期胚胎H3K9乙�；脚c對照組相比無明顯差異,且兩組各胚胎期H3K9乙�；阶兓厔莼鞠嗤�；灌酒組Ⅱ植入前胚胎H3K9乙酰化水平與灌酒組Ⅰ相比,變化較大；甜菜堿對20%灌酒雌鼠早期植入前胚胎H3K9乙酰化水平干預程度較大,其體內、外大多數(shù)胚胎期的H3K9乙酰化水平均降低了。實驗結論：1.丙二醛是脂質過氧化的中間產物,該指標能反映外源因子對機體的氧化損傷程度。灌酒組肝臟及血清中MDA含量上升,說明雌鼠長期過量飲酒可能會導致機體氧化還原系統(tǒng)失衡,肝臟及血清系統(tǒng)均受到了不同程度的氧化損傷；甜菜堿組小鼠肝臟和血清中MDA含量降低,說明甜菜堿緩解了酒精在機體內造成的的氧化應激,具有明顯的抗氧化功能,但血清中甜菜堿組MDA含量均顯著低于對照組；2.孕前雌鼠酒精攝入后其未成熟卵母細胞的G6PD活性降低了,且酒精濃度越大,活性越低,這可能與女性過度飲酒對生殖細胞產生了不利影響有關；甜菜堿可提高孕前酒精攝入雌鼠未成熟卵母細胞G6PD的活性；3.酒精對雌鼠早期植入前胚胎H3K9乙�；降挠绊懹袆┝恳蕾囆�,酒精濃度越高,影響越大。甜菜堿可在一定程度上緩解酒精對雌鼠早期植入前胚胎H3K9乙�；降挠绊懀辉撗芯炕蚩蔀榻沂敬剖缶凭珨z入對胚胎發(fā)育的影響提供一些參考數(shù)據(jù)。
【關鍵詞】：酒精攝入 甜菜堿 雌鼠 植入前胚胎 H3K9乙酰化
【學位授予單位】：安徽大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R714.2
【目錄】：

• 摘要3-5
• Abstract5-9
• 第一章 文獻綜述9-17
• 1 酒精的毒理及其與哺乳動物胚胎發(fā)育的關系9-11
• 1.1 酒精的毒理9-10
• 1.2 酒精代謝與胚胎發(fā)育10-11
• 2 甜菜堿的生物學功能及其與酒精代謝的關系11-13
• 2.1 甜菜堿的生物學功能11-12
• 2.2 甜菜堿與酒精代謝12-13
• 3 表觀遺傳修飾及其作用機制13-14
• 4 組蛋白乙�；c胚胎發(fā)育的關系14-15
• 4.1 組蛋白乙酰化的作用機制14-15
• 4.2 組蛋白乙�；c胚胎發(fā)育15
• 5 本課題組研究現(xiàn)狀15-17
• 第二章 甜菜堿對孕前灌酒雌鼠肝臟及血清MDA含量的影響17-25
• 引言17-18
• 1 實驗材料與方法18-22
• 1.1 實驗材料18-19
• 1.1.1 實驗動物18
• 1.1.2 實驗藥品及耗材18-19
• 1.2 試劑配制19
• 1.2.1 0.01%考馬斯亮藍,4.7%乙醇,8.5%磷酸溶液的配制19
• 1.2.2 1mg/ml BSA溶液的配制19
• 1.3 實驗方法19-22
• 1.3.1 動物分組及模型制作19-20
• 1.3.2 雌鼠10%肝臟組織勻漿和血清的制備20
• 1.3.3 考馬斯亮藍法測定蛋白質含量繪制標準曲線20-21
• 1.3.4 MDA(丙二醛)試劑盒的操作步驟21-22
• 2 結果與結論22-24
• 2.1 甜菜堿對孕前不同濃度酒精攝入雌鼠體重的影響22-23
• 2.2 各處理組雌鼠肝臟組織勻漿及血清中MDA含量的測定結果23-24
• 3 小結24-25
• 第三章 甜菜堿對孕前灌酒雌鼠卵母細胞活性的影響25-34
• 引言25-26
• 1 實驗材料與方法26-30
• 1.1 實驗材料26-28
• 1.1.1 實驗動物26
• 1.1.2 實驗藥品及耗材26-28
• 1.1.3 儀器設備28
• 1.2 試劑配制28-29
• 1.2.1 雌鼠超排激素的配制28
• 1.2.2 體外操作液hCZB的配制28-29
• 1.2.3 26umol/L BCB染色液的配制29
• 1.3 實驗方法29-30
• 1.3.1 動物模型及分組29
• 1.3.2 雌鼠未成熟卵母細胞的收集29-30
• 1.3.3 未成熟卵母細胞的BCB染色步驟30
• 2 數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計分析30
• 3 實驗結果30-32
• 3.1 雌鼠對照組未成熟卵與MII期卵母細胞BCB染色結果30-31
• 3.2 雌鼠各組未成熟卵母細胞BCB染色結果31-32
• 4 小結32-34
• 第四章 甜菜堿對孕前灌酒雌鼠植入前胚胎H3K9乙酰化水平的影響34-51
• 引言34-35
• 1 實驗材料與方法35-41
• 1.1 實驗材料35-37
• 1.1.1 實驗動物35
• 1.1.2 實驗藥品及耗材35-37
• 1.1.3 儀器設備37
• 1.2 試劑配制37-39
• 1.2.1 雌鼠超排激素的配制37
• 1.2.2 胚胎操作液hCZB的配制37
• 1.2.3 植入前胚胎體外培養(yǎng)液G~-(CZB)/G~+的配制37-38
• 1.2.4 磷酸緩沖液PBS的配制38
• 1.2.5 免疫組化試劑配制38-39
• 1.3 實驗方法39-41
• 1.3.1 動物分組及模型制作39
• 1.3.2 實驗組及對照組MII期卵母細胞的收集39-40
• 1.3.3 體內受精胚胎及體外培養(yǎng)各時期胚胎的收集40
• 1.3.4 間接免疫熒光檢測H3K9乙�；牟襟E40-41
• 2 數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計分析41
• 3 結果與分析41-48
• 3.1 雌鼠MII期卵母細胞H3K9乙酰化水平41-42
• 3.2 灌酒雌鼠體內各時期植入前胚胎H3K9乙酰化水平的半定量分析42-43
• 3.3 體內甜菜堿組及灌酒組各時期植入前胚胎H3K9乙�；降陌攵糠治�43-44
• 3.4 體內甜菜堿組及酒精組各時期植入前胚胎H3K9乙酰化免疫熒光圖44-45
• 3.5 灌酒雌鼠體外各時期植入前胚胎H3K9乙�；降陌攵糠治�45-46
• 3.6 體外甜菜堿組及酒精組各時期植入前胚胎H3K9乙酰化水平的半定量分析46-47
• 3.7 體外甜菜堿組及酒精組各時期植入前胚胎H3K9乙�；庖邿晒鈭D47-48
• 4 小結48-51
• 結論51-52
• 參考文獻52-60
• 附錄60-62
• 致謝62-63
• 碩士期間發(fā)表論文63-64
• 碩士期間參與科研情況64

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 鐘立霖;朱靜;吳曉蕓;陳國珍;孫慧超;楊雪芳;田杰;;乙醇及其代謝產物對心肌祖細胞的毒性及H3K9表突變作用[J];第三軍醫(yī)大學學報;2010年14期

2 干小英,劉慶生;甜菜堿和肉堿用于仔豬飼料效果的研究[J];國外畜牧科技;1997年04期

3 胡艷秋;蔣杞英;程相樹;鄧錦波;;孕期酒精暴露對子鼠海馬神經元凋亡的影響[J];鄭州大學學報(醫(yī)學版);2007年05期

4 蔣杞英;胡艷秋;程相樹;鄧錦波;;孕期酒精接觸對子鼠視皮質神經元凋亡的影響[J];解剖學報;2007年04期

5 王琳軼;田杰;鐘立霖;呂鐵偉;吳曉云;朱靜;;姜黃素干預乙醇對心肌祖細胞H3K9的高乙酰化失衡及心臟發(fā)育相關基因表達異常[J];臨床心血管病雜志;2011年04期

6 郭坤亮,季克良,王昌祿;酒精代謝及其相關基因遺傳多態(tài)性[J];釀酒科技;2005年07期

7 潘博;孫慧超;呂鐵偉;吳曉云;朱靜;田杰;;酒精致小鼠胚胎心臟組蛋白H3K9高乙�；Ш饧捌浔硗蛔僛J];臨床心血管病雜志;2013年05期

8 鐘國清;甜菜堿及其應用[J];中國飼料;1997年03期

9 樓文珠;孫雪燕;李龍珠;宋夢婉;陶晶;郭俊明;;組蛋白脫乙酰酶抑制劑的抗癌作用[J];中國細胞生物學學報;2011年09期

10 蔣杞英;胡艷秋;吳萍;程相樹;鄧錦波;;妊娠期接觸酒精對子鼠視皮質神經元數(shù)量的影響[J];中國藥理學通報;2007年07期

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本文編號：936481