本文關(guān)鍵詞：妊娠期DEHP暴露對(duì)小鼠胎盤生長(zhǎng)與發(fā)育的影響

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【摘要】：目的:鄰苯二甲酸二(2-乙基)己酯(Di-(2-ethylhexyl)phthalate,DEHP)作為一種增塑劑被廣泛使用且存在于環(huán)境中,由于DEHP與塑料制品之間不能共價(jià)結(jié)合,且隨著產(chǎn)品的反復(fù)使用、加熱及清洗,其可通過呼吸道、消化道及皮膚等途徑進(jìn)入機(jī)體,對(duì)動(dòng)物和人類生殖系統(tǒng)造成危害。已有研究顯示,妊娠期DEHP暴露,可導(dǎo)致子宮內(nèi)膜接受性明顯下降、妊娠率降低、流產(chǎn)率升高以及胎兒體重減輕等現(xiàn)象。然而,這些是否與妊娠期間DEHP暴露導(dǎo)致胎盤的生長(zhǎng)發(fā)育障礙密切相關(guān)呢?至目前為止,還未見相關(guān)的研究。本項(xiàng)目擬通過強(qiáng)制性灌胃方法,在體觀察圍植入期DEHP暴露對(duì)妊娠小鼠胎盤生長(zhǎng)和發(fā)育的影響。方法:從妊娠第1天起,通過體外強(qiáng)制性灌胃方法給予不同劑量的DEHP(125、250、500 mg/kg/day),于妊娠第9天(GD9)和13天(GD13)取子宮、胚胎及胎盤標(biāo)本。通過HE染色觀察DEHP暴露對(duì)胎盤組織結(jié)構(gòu)的影響;通過免疫組織化學(xué)方法觀察DEHP暴露對(duì)胎盤增殖和迷路層血管發(fā)育的影響;通過實(shí)時(shí)定量PCR分析DEHP暴露對(duì)胎盤標(biāo)志性基因表達(dá)水平的影響;Western blot方法分析DEHP暴露對(duì)胎盤凋亡及相關(guān)的信號(hào)通路的影響。結(jié)果:(1)在GD9,與對(duì)照組相比,不同劑量DEHP處理對(duì)胚胎的重量以及胚胎與體重的比值,均無明顯影響(P0.05)。然而,在GD13,隨著DEHP濃度的增加,胚胎加胎盤的重量以及其與體重的比值均顯著性降低(P0.05或0.01);胎盤的重量及其與體重的比值均低于對(duì)照組(P0.01)。(2)在GD9,DEHP的暴露明顯抑制了外胎盤錐的生長(zhǎng)和發(fā)育。在GD13,與對(duì)照組相比,DEHP的暴露明顯降低胎盤總面積及海綿層細(xì)胞的面積(P0.05或0.01)。(3)在GD9、GD13,與對(duì)照組相比,DEHP暴露均明顯抑制胎盤中Ascl2、Esx1 mRNA的表達(dá)水平(P0.05或0.01)。在GD9,DEHP處理組Fosl1 mRNA的表達(dá)水平與對(duì)照組之間無顯著性差異(P0.05)。然而,在GD13,與對(duì)照組相比,dehp暴露均明顯抑制胎盤中fosl1mrna的表達(dá)水平(p0.01),增加eomes、hand1mrna的表達(dá)水平(p0.05或0.01)。(4)在gd13,與對(duì)照組相比,dehp暴露可明顯抑制小鼠胎盤迷路層血管的形成。(5)免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示,在gd9、gd13,與對(duì)照組相比,外胎盤錐、胎盤迷路層及海綿層的ki67陽性細(xì)胞均明顯下降(p0.05或0.01)。(6)在gd13,與對(duì)照組相比,dehp處理組胎盤bax、caspase-3和caspase-8mrna表達(dá)水平均顯著性升高,bcl-2mrna表達(dá)水平顯著降低(p0.05或0.01)。然而,在gd9,dehp處理組與對(duì)照組之間沒有顯著性的差異(p0.05)。免疫印跡結(jié)果顯示,在gd9、gd13,與對(duì)照組相比,dehp處理組caspase-3和caspase-8均被激活。在gd13,dehp處理組bax蛋白表達(dá)水平明顯升高,而bcl-2蛋白水平明顯下降(p0.01)。(7)westernblot檢測(cè)顯示,在gd9,與對(duì)照組相比,250mg/kg/day和500mg/kg/day的dehp處理明顯增加erk1/2磷酸化水平(p0.01)。在gd13,erk1/2磷酸化水平隨著dehp濃度的增加而顯著性增加(p0.05或0.01)。結(jié)論:(1)妊娠期間dehp暴露可顯著性抑制小鼠外胎盤錐和胎盤的生長(zhǎng)與發(fā)育。(2)妊娠期間dehp暴露可破壞小鼠胎盤迷路層血管的形成。(3)妊娠期間dehp暴露可明顯抑制小鼠外胎盤錐和胎盤的增殖。(4)dehp可通過激活mapk信號(hào)通路以及凋亡相關(guān)其因caspase-3、-8、bax上調(diào)和bcl-2下調(diào)促進(jìn)胎盤的凋亡。
【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R714.2
【目錄】：

• 摘要3-5
• ABSTRACT5-10
• 中英文縮寫一覽表10-11
• 第1章 引言11-15
• 1.1 引起生物機(jī)體病變12
• 1.2 對(duì)人體器官產(chǎn)生危害12
• 1.3 對(duì)動(dòng)物及人類生殖系統(tǒng)的毒性作用12-15
• 1.3.1 對(duì)雄性生殖系統(tǒng)的毒性作用12-13
• 1.3.2 對(duì)雌性生殖系統(tǒng)的毒性作用13-15
• 第2章 材料與方法15-24
• 2.1 材料15-18
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物15
• 2.1.2 主要試劑15-16
• 2.1.3 主要儀器16-17
• 2.1.4 實(shí)驗(yàn)溶液配制17-18
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法18-24
• 2.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及處理18-19
• 2.2.2 組織切片的制作19
• 2.2.3 HE染色19
• 2.2.4 RNA的提取和實(shí)時(shí)熒光定量PCR19-20
• 2.2.5 免疫組織化學(xué)20-21
• 2.2.6 蛋白印跡21-23
• 2.2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析23-24
• 第3章 結(jié)果24-34
• 3.1 妊娠期DEHP暴露對(duì)胚胎著床和胎盤重量的影響24-26
• 3.2 DEHP暴露對(duì)胎盤組織結(jié)構(gòu)的影響26-29
• 3.3 DEHP暴露對(duì)胎盤發(fā)育相關(guān)基因表達(dá)的影響29
• 3.4 DEHP暴露破壞胎盤迷路層血管的形成29-30
• 3.5 DEHP暴露對(duì)胎盤增殖和凋亡的影響30-33
• 3.6 DEHP對(duì)MAPK信號(hào)通路的影響33-34
• 第4章 討論34-37
• 第5章 結(jié)論37-38
• 致謝38-39
• 參考文獻(xiàn)39-43
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果43-44
• 綜述44-51
• 參考文獻(xiàn)48-51

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 馬明月;張玉敏;裴秀叢;段志文;;青春期前鄰苯二甲酸二(2-乙基)己酯暴露對(duì)雌性大鼠生殖發(fā)育及過氧化物酶體增殖劑激活受體的影響[J];衛(wèi)生研究;2011年06期

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本文編號(hào)：725733