本文關鍵詞：超聲聯(lián)合微泡增強宮頸癌對化療藥物敏感性的實驗及臨床研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：宮頸癌(cervical carcinoma,CC)是女性常見惡性腫瘤,其發(fā)病率高,全球年新增發(fā)病例數(shù)460,000,其中發(fā)展中國家占80%以上。宮頸腫瘤多發(fā)生于40-70歲的中老年圍絕經(jīng)期婦女,但近年來,宮頸癌發(fā)病日趨年輕化,20-30歲育齡期婦女也較常見;其組織病理類型中宮頸鱗狀細胞癌占80%以上,宮頸腺癌及腺鱗癌發(fā)病率也逐漸增高。宮頸癌患者多表現(xiàn)為陰道不規(guī)則出血、同房后出血,也有少數(shù)患者無明顯癥狀,在健康體檢中發(fā)現(xiàn)。宮頸腫瘤多由HPV病毒感染引起,根據(jù)腫瘤分期,治療方法采取手術、放療及化療的綜合治療,早期發(fā)現(xiàn)并合理施治能提高患者生存率,改善預后;隨著生活水平的提高及宮頸腫瘤發(fā)病的年輕化趨勢,更多患者渴求保留子宮甚至保留生育功能;因此宮頸癌的診療不僅要求規(guī)范化,更需要個體化。大量臨床實驗發(fā)現(xiàn),中晚期宮頸癌患者在實施新輔助化療后,腫瘤緩解率增高,新輔助化療后手術切除率明顯增高,達48-100%,患者5年生存率約為83%,但腫瘤耐藥及化療藥物的毒副作用使術前化療的臨床應用受到限制。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn),不同強度、不同頻率的超聲波聯(lián)合微泡介導的超聲空化效應能對腫瘤內(nèi)部微小血管產(chǎn)生不同程度的影響,高聲壓超聲波多數(shù)造成血管內(nèi)皮細胞的損傷,微血栓形成,血管壁通透性增高,低聲壓超聲波可使腫瘤血管擴張,血流速度增快,腫瘤血流灌注增加。為進一步深入研究超聲聯(lián)合微泡對腫瘤化療的增敏作用及其機制,我們運用低頻率低聲壓超聲聯(lián)合微泡輔助順鉑作用于宮頸癌He La細胞,通過對腫瘤細胞增殖活性及凋亡水平的影響,推測超聲聯(lián)合微泡在一定程度上能增強化療藥物的作用,造成細胞增殖減緩,促使細胞凋亡增加;為進一步證實超聲增敏臨床術前化療的作用,我們對10例行新輔助化療的宮頸癌患者給予診斷超聲聯(lián)合微泡及雙氧水的增敏治療,同時選取29例IIA-IIB期行新輔助化療的宮頸癌患者作為對照組,比較兩組患者新輔助化療前后宮頸及宮頸腫塊的大小改變,對10例行超聲治療的宮頸癌患者進行治療前后超聲造影,觀察超聲治療前后宮頸腫塊的血流灌注改變情況,經(jīng)化療后的患者部分進行子宮完全切除手術,對宮頸癌肌層浸潤深度進行病理學評價,宮頸肌層無癌細胞浸潤=0分,腫瘤細胞浸潤肌層1/2=1分,腫瘤細胞浸潤肌層1/2=2分,浸潤肌層全層=3分,比較試驗組與對照組病理評分,研究結果初步顯示超聲聯(lián)合微泡及雙氧水能明顯改變宮頸腫瘤的血流灌注狀態(tài),有使宮頸腫瘤術后病理完全緩解率增加的趨勢。實驗方法:第一部分:首先測定順鉑對宮頸癌Hela細胞的毒性作用,在一定濃度順鉑作用下,對空白對照組(C),單純順鉑組(P),超聲微泡組(UM),順鉑超聲組(PU),超聲微泡順鉑組(PUM)的Hela細胞進行相應處理后,使用CCK-8對細胞增殖活性進行檢測,進行Annexin-FITC/PI雙染色,運用流式細胞儀檢測各組細胞凋亡情況,通過Hochest33342染色,在熒光顯微鏡下觀察并計數(shù)各組細胞凋亡的形態(tài)學改變。第二部分:選取10例IIa-IIb經(jīng)病理學確診的宮頸癌患者,同時選取近期在本院進行治療的29例同期別宮頸癌患者作為對照組,患者的治療方案均為紫杉醇聯(lián)合奈達鉑的宮頸癌新輔助化療后實施子宮全切術,對試驗組的10例患者在化療過程中進行超聲聯(lián)合微泡及雙氧水的增敏治療,選取兩種不同的超聲輻照模式,B-MODE輻照模式和Flash輻照模式進行治療,根據(jù)化療周期,每位患者進行2-4次增敏治療,并在超聲治療前后行宮頸腫瘤超聲造影,并通過TIC曲線定量分析宮頸腫瘤的多組超聲造影參數(shù)(PI,AUC,TP,MTT),比較兩組患者新輔助化療前后宮頸及宮頸腫瘤的大小改變,通過造影參數(shù)評估超聲增敏治療前后宮頸血流灌注的改變情況,化療后部分患者行子宮全切除術,通過術后病理標本對試驗組與對照組進行定性定量評價。實驗結果:1.超聲聯(lián)合微泡能使腫瘤細胞增殖速率減慢,凋亡增加(1)通過終濃度抑制率回歸曲線圖計算得出順鉑的IC50為4.822μg/ml。(2)空白對照組(C)和超聲微泡組(UM)的細胞在24h、48h、72h、96h生長趨勢無明顯差異,超聲+微泡+順鉑組(PUM)的生長明顯受到抑制,增殖速度減慢。(3)超聲+微泡+順鉑組(PUM)在處理后24h的凋亡率為58.1%,單純順鉑組(P)和順鉑+超聲組(PU)凋亡率分別為25.3%和41.5%,空白對照組(C)和超聲+微泡組(UM)凋亡不明顯;(4)Hoechst33342染色后通過熒光顯微鏡觀察,PUM組細胞約50%呈胞核致密濃染的固縮狀態(tài),胞核藍染高亮,形成凋亡小體。2.超聲聯(lián)合微泡及雙氧水增敏宮頸癌化療(1)宮頸腫瘤在新輔助化療后,試驗組和對照組宮頸腫塊均明顯縮小,試驗組宮頸腫塊最大徑線由40.90mm縮小至11.43mm,但兩組間比較無明顯差異;(2)超聲造影參數(shù)分析,B-MODE治療模式下,超聲治療后宮頸腫瘤造影顯示峰值強度(PI),曲線下面積(AUC)均增高;Flash治療模式下,超聲治療后宮頸腫瘤造影顯示:達峰時間(TP),平均渡越時間(MTT)均明顯延長。(3)通過分析超聲造影圖像,使用B-MODE超聲治療模式下,可見宮頸腫瘤血流灌注明顯增加,血流灌注強度增強;在Flash超聲治療模式下,部分宮頸腫瘤出現(xiàn)治療后出現(xiàn)血流灌注減慢,峰值強度減低,平均渡越時間及達峰時間延長,也可見部分患者出現(xiàn)血流灌注增加。(4)病理結果,試驗組(n=10):0分3例(30%)、1分4例(40%)、2分3例(30%)、3分0例;對照組(n=29)有0分3例(10.3%)、1分7例(24%)、2分15例(51%)、3分4例(13.7%)。采用fisher確切概率法對病理結果是否完全緩解進行分析,得出P=0.06,無統(tǒng)計學差異,但試驗組患者中的病理完全緩解率有增加趨勢。實驗結論:1.低聲壓低頻率超聲聯(lián)合微泡能夠增強宮頸癌Hela細胞對順鉑的敏感性,一定程度上抑制腫瘤細胞的增殖活性,誘導腫瘤細胞凋亡增加,有降低并延緩腫瘤細胞耐藥性產(chǎn)生的趨勢。2.診斷超聲聯(lián)合微泡及雙氧水可以明顯改變宮頸腫瘤病灶血流灌注強度,血流灌注時間,即超聲空化造成的血管效應。該效應可能對宮頸癌化療產(chǎn)生一定的增敏作用,增強腫瘤對化療藥物敏感性,使腫瘤無癌率明顯增加。
【關鍵詞】：超聲微泡 增敏治療 腫瘤化療 宮頸癌
【學位授予單位】：安徽醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R737.33
【目錄】：

• 縮略語表5-7
• 中文摘要7-11
• 英文摘要11-14
• 第一章 前言14-17
• 第二章 低頻超聲聯(lián)合微泡增強宮頸癌Hela細胞對順鉑敏感性的實驗研究17-29
• 1 材料和方法17-22
• 2 結果22-24
• 3 討論24-25
• 4 總結25-29
• 第三章 診斷超聲聯(lián)合微泡及雙氧水增敏宮頸癌化療的臨床研究29-40
• 1 資料和方法30-34
• 2 結果34-37
• 3 討論37-39
• 4 總結39-40
• 全文總結40-41
• 參考文獻41-43
• 附錄43-44
• 致謝44-45
• 文獻綜述45-54
• 參考文獻52-54

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

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  本文關鍵詞：超聲聯(lián)合微泡增強宮頸癌對化療藥物敏感性的實驗及臨床研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號：474382