目的探究人巨細(xì)胞病毒活動性感染對早孕絨毛細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP9)和組織型基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑(TIMP1)活性的影響。方法收集2016年10月-2018年10月在湘潭市婦幼保健院和衡陽市第一人民醫(yī)院自愿接受流產(chǎn)的健康孕婦的絨毛,人巨細(xì)胞病毒感染后,免疫組化檢測細(xì)胞角蛋白7(CK7)、人波形蛋白(Vim)、HER-2基因(c-erbB-2)的表達(dá)以觀察絨毛細(xì)胞純度。免疫組化檢測pp65抗原用于觀察人巨細(xì)胞病毒(HCMV)的感染情況。Western Blot、熒光定量PCR(RT PCR)和酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)用于檢測HCMV感染后早孕絨毛細(xì)胞中MMP9和TIMP1的表達(dá)水平。結(jié)果免疫組化染色顯示,分離的原代細(xì)胞為高純度絨毛細(xì)胞且HCMV可感染原代早孕絨毛細(xì)胞。PCR結(jié)果顯示,HCMV組MMP9基因表達(dá)水平為0.23±0.08,低于對照組(P<0.05),TIMP1基因表達(dá)水平為5.49±1.76,高于對照組(P<0.05)。HCMV感染后第4天,HCMV組早孕絨毛細(xì)胞胞質(zhì)中MMP9蛋白表達(dá)水平為0.18±0.08,低于對照組(P<0.05),TIMP1...

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圖1免疫組化方法檢測CK7、Vim、c-erbB-2在早孕絨毛細(xì)胞中的表達(dá)(×400)

免疫組化染色顯示,HCMV培養(yǎng)48h后,早孕絨毛細(xì)胞中HCMVpp65陽性(圖2A),而對照組細(xì)胞呈陰性(圖2B)。見圖2。圖2免疫組化方法檢測HCMVpp65抗原在HCMV感染組和對照組中的表達(dá)(×400)

圖2免疫組化方法檢測HCMVpp65抗原在HCMV感染組和對照組中的表達(dá)(×400)

圖1免疫組化方法檢測CK7、Vim、c-erbB-2在早孕絨毛細(xì)胞中的表達(dá)(×400)2.3PCR結(jié)果顯示HCMV感染下調(diào)早孕絨毛細(xì)胞中MMP9和上調(diào)TIMP1的表達(dá)

圖3Westernblot和明膠酶切法檢測HCMV感染組和對照組中MMP9和TIMP1的蛋白水平

受精3周后,絨毛外滋養(yǎng)細(xì)胞逐漸替代子宮螺旋動脈內(nèi)皮細(xì)胞,重塑母體間質(zhì)和血管系統(tǒng)[14]。絨毛外滋養(yǎng)細(xì)胞的侵襲能力受損是螺旋動脈重構(gòu)不良的重要病理基礎(chǔ),與流產(chǎn)、死產(chǎn)、胎兒生長遲緩及后代發(fā)育不良密切相關(guān)[5]。目前認(rèn)為HCMV是子宮內(nèi)最常見的病原體,可引起流產(chǎn)、死產(chǎn)和中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷....

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