【摘要】：子癇前期(preeclampsia,PE)是重要的妊娠期高血壓疾病之一,一般發(fā)生于妊娠20周之后,患者的主要特征表現(xiàn)為高血壓、蛋白尿,嚴(yán)重者可導(dǎo)致腦水腫、腦出血、肺水腫、胎盤早剝、胎兒生長(zhǎng)受限(fetal growth restriction,FGR)、胎死宮內(nèi)等并發(fā)癥,是孕產(chǎn)婦及圍產(chǎn)兒病死率升高的原因之一,甚至可直接導(dǎo)致10%-15%的孕產(chǎn)婦死亡�，F(xiàn)有各種學(xué)說(shuō)都不能完全闡明其原因及發(fā)病機(jī)制,目前比較公認(rèn)的兩階段學(xué)說(shuō)認(rèn)為滋養(yǎng)細(xì)胞浸潤(rùn)異常,螺旋動(dòng)脈重鑄不良,胎盤血流灌注減少為子癇前期發(fā)病的第一階段;進(jìn)而出現(xiàn)器官受損,導(dǎo)致各種臨床征象為發(fā)生第二階段。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)胎盤細(xì)胞自噬可能與子癇前期的發(fā)病密切相關(guān)。多種細(xì)胞傳導(dǎo)信號(hào)參與細(xì)胞自噬調(diào)控,其中比較公認(rèn)的是PI3K/Akt/mTOR(磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/雷帕霉素靶)。哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白(mammalian Target of Rapamyc,m TOR)則對(duì)自噬泡的形成及成熟起抑制作用。BECN 1(Beclin1)基因是哺乳動(dòng)物參與自噬的特異性基因,是PI3K復(fù)合物的組成部分。LC3為微管相關(guān)蛋白1和輕鏈3,LC3存在可溶型LC3-I以及膜結(jié)合型LC3-II兩種形式,在自噬過(guò)程中LC3-I向LC3-II轉(zhuǎn)化,LC3-II的含量與自噬體數(shù)量呈正相關(guān)關(guān)系。這三者均是重要的自噬相關(guān)蛋白,LC3-II、Beclin1更是被作為自噬標(biāo)記蛋白。IGF2是一種主要在胚胎期表達(dá)的小分子糖蛋白。它具有促進(jìn)細(xì)胞有絲分裂、促進(jìn)分化,調(diào)節(jié)代謝和抗凋亡等作用。有研究顯示在腫瘤組織中IGF2蛋白的異常表達(dá)與細(xì)胞過(guò)度自噬相關(guān)。目的:本研究擬檢測(cè)IGF2蛋白及自噬相關(guān)蛋白m TOR、Beclin1、LC3-II在正常和重度子癇前期(severe preeclampsia,SE)胎盤組織中的表達(dá)及相互關(guān)系。方法:選擇2015年07月至2017年02月在中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院產(chǎn)科分娩的重度子癇前期患者30例,選取同期分娩無(wú)合并癥正常孕婦30例作為對(duì)照組。采用Western Blot及免疫組化SP法檢測(cè)兩組患者胎盤組織中IGF2蛋白及自噬相關(guān)蛋白的表達(dá)情況,透射電鏡觀察滋養(yǎng)細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)及自噬體形成。分析重度子癇前期胎盤組織中IGF2蛋白與自噬相關(guān)蛋白表達(dá)間的相互關(guān)系。結(jié)果:免疫組化結(jié)果顯示IGF2、Beclin1、LC3-II、mTOR在SE組和對(duì)照組胎盤組織中都有表達(dá)。SE組IGF2的高表達(dá)率為30%,對(duì)照組IGF2的高表達(dá)率為56.67%,SE組的IGF2的高表達(dá)率明顯低于對(duì)照組(P0.01);SE組m TOR高表達(dá)率為20%,對(duì)照組m TOR的高表達(dá)率為56.67%,SE組的m TOR的高表達(dá)率明顯低于對(duì)照組(P0.01);SE組Beclin1的高表達(dá)率為76.67%,對(duì)照組Beclin1的高表達(dá)率為26.67%,SE組的Beclin1的高表達(dá)率明顯高于對(duì)照組(P0.01);SE組LC3-II的高表達(dá)率為60%,對(duì)照組LC3-II的高表達(dá)率為16.67%,SE組的LC3-II的高表達(dá)率明顯高于對(duì)照組(P0.01)。Western Blot方法對(duì)IGF2、m TOR、Beclin1和LC3-II在SE組和對(duì)照組表達(dá)的含量進(jìn)行半定量。結(jié)果顯示SE組IGF2的相對(duì)含量為0.48±0.16,對(duì)照組IGF2的相對(duì)含量為1±0.21、SE組IGF2的表達(dá)明顯低于對(duì)照組(P0.05);SE組m TOR的相對(duì)含量為0.44±0.08,對(duì)照組m TOR的相對(duì)含量為1±0.26,SE組m TOR的表達(dá)明顯低于對(duì)照組(P0.05);SE組Beclin1的相對(duì)含量為3.45±0.95,對(duì)照組Beclin1的相對(duì)含量為1±0.23,SE組Beclin1的表達(dá)明顯高于對(duì)照組(P0.05);SE組LC3-II的相對(duì)含量為3.50±0.52,對(duì)照組LC3-II的相對(duì)含量為1±0.17、SE組LC3-II的表達(dá)明顯高于對(duì)照組(P0.05)。采用Spearman相關(guān)分析方法,對(duì)SE組中,IGF2的陽(yáng)性表達(dá)率與自噬相關(guān)蛋白的mTOR、Beclin1、LC3-II陽(yáng)性表達(dá)率之間的相關(guān)性進(jìn)行比較。IGF2與m TOR的表達(dá)率間的相關(guān)系數(shù)為0.440,P=0.015;IGF2與Beclin1的表達(dá)率間的相關(guān)系數(shù)為-0.417,P=0.022;IGF2與LC3-II的表達(dá)率間的相關(guān)系數(shù)為-0.539,P=0.002;表明IGF2與自噬相關(guān)蛋白表達(dá)強(qiáng)度間均存在相關(guān)性。透射電鏡下可觀察到重度子癇前期胎盤組織細(xì)胞質(zhì)中典型的雙層膜結(jié)構(gòu)的自噬小體以及單層膜結(jié)構(gòu)包繞著尚未分解完全的細(xì)胞器的自噬溶酶體的形成。結(jié)論:重度子癇前期的胎盤組織中細(xì)胞自噬活躍,SE胎盤組織中IGF2的異常表達(dá)可能與細(xì)胞自噬相關(guān)。SE胎盤組織中IGF2表達(dá)降低,可能通過(guò)m TOR通路調(diào)節(jié),導(dǎo)致過(guò)度自噬參與子癇前期的發(fā)病。
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R714.244
【圖文】：

中國(guó)醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文3 結(jié)果3.1 IGF2 蛋白相對(duì)表達(dá)水平免疫組化結(jié)果顯示，IGF2 在正常對(duì)照組中高表達(dá)率為 56.67%，在 SE 組中高達(dá)率僅為 30% (見(jiàn)表 1 和圖 1)。對(duì)照組胎盤組織中 IGF2 的表達(dá)明顯高于 SE 組，異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。表 1 免疫組化方法檢測(cè) IGF2 在 SE 組和對(duì)照組胎盤組織中的表達(dá)情況組別 例數(shù)IGF2/例 高表達(dá)率（-/+） (++/+++)（%）SE 組 30 21 9 30對(duì)照組 30 13 17 56.67*P＜0.01

圖 2 Western blot 方法顯示 IGF2 在正常對(duì)照組及 SE 組胎盤組織中的表達(dá)情況（*P<0.03.2 mTOR 蛋白相對(duì)表達(dá)水平免疫組化結(jié)果顯示，mTOR 在正常對(duì)照組中高表達(dá)率為 56.67%，在 SE 組中表達(dá)率為 20% (見(jiàn)表 2 和圖 3)。對(duì)照組胎盤組織中 mTOR 的表達(dá)明顯高于 SE 組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。表 2 免疫組化方法檢測(cè) mTOR 在 SE 組和對(duì)照組胎盤組織中的表達(dá)情況組別 例數(shù)mTOR/例 高表達(dá)率（-/+） (++/+++)（%）SE 組 30 24 6 20對(duì)照組 30 13 17 56.67*P＜0.01

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前9條

1 董倩;徐小潔;紀(jì)貝貝;范忠義;梁迎春;王濤;葉棋濃;胡毅;;人LC3B基因的真核表達(dá)及鑒定[J];生物技術(shù)通訊;2015年05期

2 劉蓉;宗實(shí);史娟娟;王s

本文編號(hào)：2733022