【摘要】：目的:探討人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞(human amniotic mesenchymal stem cells,hAMSCs)聯(lián)合PPCNg聚合物(polyethylene glycol citrate-co-N-isopropylacrylamide gelatin,PPCNg)在宮腔粘連(intrauterine adhesions,IUA)治療中的有效性和可行性。方法:將PKH26標(biāo)記的hAMSCs在不同濃度PPCNg中培養(yǎng),48小時(shí)后熒光顯微鏡下察看細(xì)胞形態(tài),CCK-8法進(jìn)行細(xì)胞增殖和毒性分析,評(píng)價(jià)PPCNg的材料毒性。雌性SD級(jí)大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、單純IUA模型組(模型組)、PPCNg治療IUA組(PPCNg組)、hAMSCs治療IUA組(hAMSCs組)及PPCNg聯(lián)合hAMSCs治療IUA組(PPCNg+hAMSCs組)。建立IUA模型2周后,假手術(shù)組不處理,其余建模的各組分別宮腔內(nèi)注射PBS、PPCNg、hAMSCs的PBS懸液及hAMSCs的PPCNg懸液。宮腔注射2周后,子宮組織石蠟包埋、切片,通過HE染色和Masson染色檢測(cè)子宮內(nèi)膜腺體及纖維化狀況,免疫組化檢測(cè)子宮內(nèi)膜中TGF-β1、VEGF、VIM、α-SMA、CK19及E-Ca染色情況;冰凍切片熒光顯微鏡下觀察子宮內(nèi)膜中hAMSCs分布狀況。結(jié)果:(1)hAMSCs在PPCNg(濃度依次為0.625%PPCNg、1.25%PPCNg、2.5%PPCNg、5%PPCNg、10%PPCNg)中貼壁成長(zhǎng),狀態(tài)良好;(2)CCK-8法檢測(cè)實(shí)驗(yàn)組(0.625%PPCNg、1.25%PPCNg、2.5%PPCNg、5%PPCNg、10%PPCNg)和陰性對(duì)照組的OD值,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,材料毒性的分級(jí)為1級(jí)(合格);(3)與假手術(shù)組相比,模型組腺體數(shù)目下降(P=0.000),纖維化面積比增高(P=0.000);與模型組相比,PPCNg組、hAMSCs組及PPCNg+hAMSCs組的腺體數(shù)目不同程度增多(P=0.000),纖維化面積比不同程度減少;(4)與模型組相比,PPCNg組、hAMSCs組及PPCNg+hAMSCs組TGF-β1、VEGF、VIM及α-SMA的表達(dá)均不同程度降低,其中PPCNg+hAMSCs組明顯降低(P=0.000),而CK19及E-Ca表達(dá)則不同程度升高,其中PPCNg+hAMSCs組明顯升高(P=0.000);(5)PPCNg+hAMSCs組PKH26標(biāo)記的hAMSCs遠(yuǎn)遠(yuǎn)多于hAMSCs組。結(jié)論:hAMSCs在PPCNg中生長(zhǎng)良好,PPCNg無細(xì)胞毒性,可聯(lián)合hAMSCs治療IUA。PPCNg與hAMSCs聯(lián)用,有助于hAMSCs定植于子宮,減少hAMSCs流失,優(yōu)于單用hAMSCs,能更好的改善宮腔纖維化,增強(qiáng)子宮內(nèi)膜修復(fù),防治再粘連,從而提升hAMSCs治療IUA的有效性。
【圖文】：

圖 1 熒光顯微鏡下各組細(xì)胞的形態(tài)（200X）re 1 Cell morphology of each group under fluorescence microscope（200X）g 細(xì)胞毒性檢測(cè)

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文 hAMSCs 在大鼠子宮內(nèi)膜中的分布情況見PKH26標(biāo)記的hAMSCs的細(xì)胞膜呈紅色熒光，，所有被DAPI熒光。hAMSCs 組及 PPCNg+hAMSCs 組呈藍(lán)色及紅色熒光。光分布明顯少于 PPCNg+hAMSCs 組（見圖 2）。hAMSCs組 PPCNg+hAMSCs組
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R711.74

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2640429