發(fā)布時(shí)間：2020-09-12 20:11

　　 目的評價(jià)甲狀腺細(xì)針穿刺細(xì)胞學(xué)(FNAB)聯(lián)合BRAF V600E基因檢測對甲狀腺結(jié)節(jié)良惡性鑒別的診斷價(jià)值。方法總結(jié)經(jīng)手術(shù)病理證實(shí)的64個甲狀腺結(jié)節(jié)術(shù)前超聲引導(dǎo)下細(xì)針穿刺細(xì)胞學(xué)檢查和BRAF V600E基因檢測的資料,以手術(shù)后組織病理學(xué)結(jié)果作為甲狀腺結(jié)節(jié)性質(zhì)的診斷金標(biāo)準(zhǔn),分析FNAB、BRAF V600E基因檢測以及兩者聯(lián)合診斷的價(jià)值。結(jié)果 62例患者64個結(jié)節(jié)(2例雙側(cè))接受手術(shù)處理,其中共有44個結(jié)節(jié)檢測到BRAF V600E突變,43個結(jié)節(jié)術(shù)后病理為甲狀腺乳頭狀癌,1個術(shù)后病理為結(jié)節(jié)性甲狀腺腫。在44個檢測到BRAF V600E突變結(jié)節(jié)中,FNAB診斷惡性28個,良性6個,無法確定性質(zhì)10個。在20個未檢測到BRAF V600E突變結(jié)節(jié)中,FNAB診斷惡性5個,良性3,無法確定性質(zhì)12個,術(shù)后病理14個甲狀腺乳頭狀癌,4個結(jié)節(jié)性甲狀腺腫,1個亞急性甲狀腺炎,1個甲狀腺腺瘤。共57個甲狀腺乳頭狀癌中,檢查到BRAF V600E基因突變有43個,突變率為75.4%。與手術(shù)病理金標(biāo)準(zhǔn)比較,FNAB判斷甲狀腺結(jié)節(jié)良惡性的靈敏度、特異度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值、正確率分別是78.9%、85.7%、97.8%、33.3%、79.7%;BRAF V600E基因檢測判斷甲狀腺結(jié)節(jié)良惡性的靈敏度、特異度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值、正確率分別是75.4%、85.7%、97.7%、30.0%、76.6%;FNAB聯(lián)合BRAF V600E基因檢測判斷甲狀腺結(jié)節(jié)良惡性的靈敏度、特異度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值、正確率分別是94.7%、71.4%、96.4%、62.5%、92.2%。采用Mc Nemar配對資料χ2檢驗(yàn)比較FNAB、FNAB聯(lián)合BRAF基因檢測兩種診斷方法的差別,P0.001,兩者差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論對FNAB無法明確性質(zhì)的甲狀腺結(jié)節(jié),輔助聯(lián)合BRAF V600E基因檢測,可以提高甲狀腺結(jié)節(jié)良惡性診斷的準(zhǔn)確性。
【部分圖文】：

介入放射學(xué)雜志2017年7月第26卷第7期JInterventRadiol2017，Vol．26，No．7表1132個甲狀腺結(jié)節(jié)FNAB及BRAF基因檢測結(jié)果（個）FNABBRAF基因合計(jì)未突變突變不能診斷516良性病變41849非典型病變22426濾泡性腫瘤202可疑惡性7714惡性腫瘤72835合計(jì)8448132①穿刺前定位；②針尖穿刺至病灶內(nèi)圖1穿刺方法①BRAFV600E測序?yàn)橐吧�，未發(fā)生突變；②BRAFV600E測序?yàn)橥蛔冃�，檢測到突變圖2BRAFY600E測序結(jié)果ForReportingThyroidCytopathology，TBSRTC）［2］：Ⅰ級為無法明確診斷或細(xì)胞成分不足；Ⅱ級為良性病變；Ⅲ級為意義不明確的細(xì)胞異型性或?yàn)V泡性病變；Ⅳ級為濾泡性腫瘤或可疑濾泡性腫瘤；Ⅴ級為可疑甲狀腺癌；Ⅵ級為甲狀腺癌。BRAFV600E基因檢測方法：DNA提取和DNA擴(kuò)增分別采用組織提取試劑盒和巢式PCR。具體如下：使用QIAampDNAMiniKit試劑盒（QIAGEN公司，德國）從細(xì)胞液基瓶里提取基因組DNA，操作參考試劑盒說明書進(jìn)行。對提取好的DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，引物由實(shí)驗(yàn)室自行設(shè)計(jì)，如下：TCTTCATAAT-GCTTGCTCTGATAGG、TCTAGTAACTCAGCAGCA-TCTCA、M13F-TCATAATGCTTGCTCTGATAGGA、M13R-GGCCAAAAATTTAATCAGTGGA。PCR反應(yīng)體系為25μl：模板DNA2μl，Q5TMMasterMix（生產(chǎn)商：NEB）12.5μl，H2O5.5μl，引物混合物（巢式A輪和B輪正反向引物均為1∶1混合，濃度為5pmol/μl）5μl。PCR反應(yīng)條件：巢式A輪：98°C預(yù)變性30s，然后98°C10s，58°C30s，72°C1min，30個循環(huán)，最后72°C延伸5min；巢式B輪：加入2.0μl巢式A產(chǎn)物，98°C預(yù)變性30s，然后98°C10s，62°C30s，72°C1min，35個循環(huán)，最后72°C延伸5min。PCR產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳鑒定后純化，將純化的PCR產(chǎn)物進(jìn)行測序。最后采用Sequencer軟件進(jìn)行初步分析?

介入放射學(xué)雜志2017年7月第26卷第7期JInterventRadiol2017，Vol．26，No．7表1132個甲狀腺結(jié)節(jié)FNAB及BRAF基因檢測結(jié)果（個）FNABBRAF基因合計(jì)未突變突變不能診斷516良性病變41849非典型病變22426濾泡性腫瘤202可疑惡性7714惡性腫瘤72835合計(jì)8448132①穿刺前定位；②針尖穿刺至病灶內(nèi)圖1穿刺方法①BRAFV600E測序?yàn)橐吧�，未發(fā)生突變；②BRAFV600E測序?yàn)橥蛔冃�，檢測到突變圖2BRAFY600E測序結(jié)果ForReportingThyroidCytopathology，TBSRTC）［2］：Ⅰ級為無法明確診斷或細(xì)胞成分不足；Ⅱ級為良性病變；Ⅲ級為意義不明確的細(xì)胞異型性或?yàn)V泡性病變；Ⅳ級為濾泡性腫瘤或可疑濾泡性腫瘤；Ⅴ級為可疑甲狀腺癌；Ⅵ級為甲狀腺癌。BRAFV600E基因檢測方法：DNA提取和DNA擴(kuò)增分別采用組織提取試劑盒和巢式PCR。具體如下：使用QIAampDNAMiniKit試劑盒（QIAGEN公司，德國）從細(xì)胞液基瓶里提取基因組DNA，操作參考試劑盒說明書進(jìn)行。對提取好的DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，引物由實(shí)驗(yàn)室自行設(shè)計(jì)，如下：TCTTCATAAT-GCTTGCTCTGATAGG、TCTAGTAACTCAGCAGCA-TCTCA、M13F-TCATAATGCTTGCTCTGATAGGA、M13R-GGCCAAAAATTTAATCAGTGGA。PCR反應(yīng)體系為25μl：模板DNA2μl，Q5TMMasterMix（生產(chǎn)商：NEB）12.5μl，H2O5.5μl，引物混合物（巢式A輪和B輪正反向引物均為1∶1混合，濃度為5pmol/μl）5μl。PCR反應(yīng)條件：巢式A輪：98°C預(yù)變性30s，然后98°C10s，58°C30s，72°C1min，30個循環(huán)，最后72°C延伸5min；巢式B輪：加入2.0μl巢式A產(chǎn)物，98°C預(yù)變性30s，然后98°C10s，62°C30s，72°C1min，35個循環(huán)，最后72°C延伸5min。PCR產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳鑒定后純化，將純化的PCR產(chǎn)物進(jìn)行測序。最后采用Sequencer軟件進(jìn)行初步分析?

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前5條

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2 張博茗;林元強(qiáng);隋國慶;王洋;趙倩倩;王輝;;細(xì)針穿刺細(xì)胞學(xué)聯(lián)合BRAF~(V600E)基因突變檢測在甲狀腺結(jié)節(jié)診斷中的價(jià)值[J];腫瘤影像學(xué);2015年04期

3 王曉靜;李平;張彥秋;付占昭;張雪鵬;顧濤;徐紅梅;;CT引導(dǎo)下甲狀腺結(jié)節(jié)經(jīng)皮穿刺活檢技術(shù)的臨床應(yīng)用[J];介入放射學(xué)雜志;2014年05期

4 陸麗明;周偉生;;甲狀腺腫塊非血管介入診療進(jìn)展[J];介入放射學(xué)雜志;2009年07期

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【共引文獻(xiàn)】

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1 宋傳偉;;甲狀腺結(jié)節(jié)應(yīng)用細(xì)針穿刺細(xì)胞學(xué)與BRAF基因突變的診斷價(jià)值研究[J];當(dāng)代醫(yī)學(xué);2017年22期

2 章美武;張燕;范曉翔;毛達(dá)峰;呂淑懿;;甲狀腺細(xì)針穿刺細(xì)胞學(xué)聯(lián)合BRAF基因檢測的診斷價(jià)值[J];介入放射學(xué)雜志;2017年07期

3 王江s

本文編號：2817868