本文關(guān)鍵詞：脂多糖體外刺激對未成熟星形膠質(zhì)細胞氧化損傷的機制研究

  更多相關(guān)文章： 脂多糖 星形膠質(zhì)細胞 超氧化物歧化酶 丙二醛 茶多酚

【摘要】：腦白質(zhì)損傷是早產(chǎn)兒腦損傷的主要類型。其病理特點主要是反應(yīng)性星形膠質(zhì)細胞膠質(zhì)化、小膠質(zhì)細胞浸潤、少突膠質(zhì)細胞損傷和髓鞘損害及軸突損傷等。流行病學(xué)研究表明,宮內(nèi)感染在早產(chǎn)兒腦白質(zhì)損傷的發(fā)生機制中起了重要的作用。宮內(nèi)感染導(dǎo)致腦白質(zhì)損傷,其不僅僅是少突膠質(zhì)細胞損傷的過程,星形膠質(zhì)細胞在疾病的發(fā)生發(fā)展中也發(fā)揮了重要的作用。星形膠質(zhì)細胞氧化損傷在腦白質(zhì)損傷的發(fā)生機制中可能有重要作用,但感染／炎癥是否導(dǎo)致未成熟星形膠質(zhì)細胞的氧化損傷及其機制尚不清楚。因此,本研究通過星形膠質(zhì)細胞培養(yǎng),研究脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)體外刺激對未成熟星形膠質(zhì)細胞的氧化損傷影響,以及星形膠質(zhì)細胞培養(yǎng)液細胞因子巨噬細胞炎性蛋白-1β(MIP-1β)是否參與這一過程。而且予茶多酚(TP-EGCG)干預(yù),探討TP-EGCG對LPS體外刺激后未成熟星形膠質(zhì)細胞氧化損傷的保護作用；以及星形膠質(zhì)細胞培養(yǎng)液細胞因子MIP-1β是否參與這一過程,為將來腦白質(zhì)損傷的防治提供理論依據(jù)。 目的： 研究LPS體外刺激后未成熟星形膠質(zhì)細胞的總超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量及細胞因子MIP-1β水平的變化,探討LPS體外刺激對未成熟星形膠質(zhì)細胞的氧化損傷作用,以及這一作用是否有細胞因子MIP-1β參與；另外通過予TP-EGCG干預(yù)后檢測星形膠質(zhì)細胞總SOD活力、MDA含量、凋亡細胞數(shù)與總細胞數(shù)的百分比及細胞因子MIP-1β等水平的變化,探討TP-EGCG是否對LPS體外刺激后星形膠質(zhì)細胞氧化損傷有保護作用。 方法： 1.星形膠質(zhì)細胞培養(yǎng)：不同濃度LPS (5μg/mL、10μg/mL)分別刺激不同時間(1天、3天、7天)后,比色法檢測星形膠質(zhì)細胞培養(yǎng)液總SOD活力和MDA含量變化,觀察星形膠質(zhì)細胞氧化損傷情況。ELISA法檢測星形膠質(zhì)細胞培養(yǎng)液細胞因子MIP-1β的濃度變化。 2. TP-EGCG干預(yù)：以LPS (5μg/mL)刺激3天,同時予TP-EGCG干預(yù)后,比色法檢測星形膠質(zhì)細胞培養(yǎng)液總SOD活力和MDA含量變化,觀察星形膠質(zhì)細胞氧化損傷情況；以LPS (5μg/mL)刺激1天、3天,通過TUNEL法檢測凋亡細胞數(shù)與總細胞數(shù)百分比的變化,觀察細胞凋亡情況；ELISA法檢測星形膠質(zhì)細胞培養(yǎng)液細胞因子MIP-1β的濃度變化。 結(jié)果： 1. LPS (5μg/mL,分別刺激1天、3天、7天時星形膠質(zhì)細胞培養(yǎng)液總SOD活力較對照組差異均無顯著意義(P0.05)。LPS(5μg/mL)刺激3天時星形膠質(zhì)細胞培養(yǎng)液MDA含量較對照組明顯增加(p0.05); LPS(10mg/mL)刺激1天、3天、7天及LPS (5μg/mL)刺激1天、7天時MDA含量較對照組差異均無顯著意義(P0.05)。LPS (5μg/mL)刺激1天和7天、LPS (10μg/mL)刺激1天和3天星形膠質(zhì)細胞培養(yǎng)液MIP-1β濃度明顯降低(P0.05); LPS (5μg/mL)刺激3天、LPS (10μg/mL)刺激7天星形膠質(zhì)細胞培養(yǎng)液MIP-1β濃度較對照組差異無顯著意義(P0.05)。 2.予TP-EGCG干預(yù)后刺激3天星形膠質(zhì)細胞培養(yǎng)液總SOD活力與LPS組及對照組比較明顯減少,差異具有顯著意義(P0.05)。予TP-EGCG干預(yù)后刺激3天星形膠質(zhì)細胞培養(yǎng)液MDA含量較LPS組比較明顯減少(P0.05),但與對照組比較差異不明顯(P0.05)。刺激1天時LPS組、LPS+EGCG組與TP-EGCG組之間相比較,星形膠質(zhì)細胞凋亡細胞數(shù)/總細胞數(shù)百分比差異無顯著意義(P0.05),其與對照組比較差異也無顯著意義(P0.05); LPS刺激3天時星形膠質(zhì)細胞凋亡細胞數(shù)/總細胞數(shù)百分比較對照組明顯增加,差異具有顯著意義(P0.05),且予TP-EGCG干預(yù)后星形膠質(zhì)細胞凋亡細胞數(shù)/總細胞數(shù)百分比較LPS組明顯減少,差異具有顯著意義(P0.05),TP-EGCG刺激3天與對照組比較,星形膠質(zhì)細胞凋亡細胞數(shù)/總細胞數(shù)百分比明顯減少,差異具有顯著意義(P0.05)。予TP-EGCG干預(yù)后刺激3天及單用TP-EGCG刺激3天星形膠質(zhì)細胞培養(yǎng)液MEP-1β濃度較LPS刺激組及對照組降低均無顯著意義。 結(jié)論： 1.不同濃度的LPS體外刺激對星形膠質(zhì)細胞氧化損傷的影響程度可能是不同的。 2. TP-EGCG對星形膠質(zhì)細胞及LPS體外刺激條件下的星形膠質(zhì)細胞可能有抗氧化、抗凋亡作用,表明TP-EGCG對LPS體外刺激引起的星形膠質(zhì)細胞氧化損傷可能有保護作用。
【關(guān)鍵詞】：脂多糖 星形膠質(zhì)細胞 超氧化物歧化酶 丙二醛 茶多酚
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R722.6;R742
【目錄】：

• 致謝4-5
• 中文摘要5-8
• Abstract8-12
• 目次12-14
• 引言14-16
• 第一部分 脂多糖體外刺激對未成熟星形膠質(zhì)細胞的氧化損傷機制研究16-31
• 1 前言16-17
• 2 實驗材料和方法17-22
• 2.1 材料17-18
• 2.2 方法18-22
• 3 結(jié)果22-28
• 3.1 星形膠質(zhì)細胞的純化培養(yǎng)22-23
• 3.2 LPS體外刺激對未成熟星形膠質(zhì)細胞的氧化作用23-24
• 3.3 LPS體外刺激對未成熟星形膠質(zhì)細胞氧化損傷的影響24-26
• 3.4 ELISA結(jié)果26-28
• 4 討論28-30
• 5 結(jié)論30-31
• 第二部分 TP-EGCG對LPS體外刺激時未成熟星形膠質(zhì)細胞氧化損傷的保護作用機制研究31-51
• 1 前言31-33
• 2 實驗材料和方法33-40
• 2.1 材料33-34
• 2.2 方法34-40
• 3 結(jié)果40-48
• 3.1 TP-EGCG對LPS體外刺激條件下星形膠質(zhì)細胞的氧化作用40-41
• 3.2 TP-EGCG對LPS體外刺激條件下星形膠質(zhì)細胞氧化損傷的保護作用41-42
• 3.3 LPS刺激和TP-EGCG干預(yù)不同時間后星形膠質(zhì)細胞凋亡的變化42-46
• 3.4 TP-EGCG對LPS體外刺激條件下星形膠質(zhì)細胞MIP-1β濃度的變化46-48
• 4 討論48-50
• 5 結(jié)論50-51
• 全文結(jié)論51-52
• 參考文獻52-55
• 綜述55-62
• 參考文獻60-62
• 作者簡歷及在學(xué)期間所取得的科研成果62

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 陳惠金;魏克倫;姚裕家;楊于嘉;周叢樂;范秀芳;高喜容;江蓮;劉曉紅;錢繼紅;王莉;吳本清;吳高強;張青梅;張小蘭;周曉玉;;我國早產(chǎn)兒腦室周圍白質(zhì)軟化發(fā)生率的多中心調(diào)查報告[J];中國當(dāng)代兒科雜志;2008年06期

2 史學(xué)凱;農(nóng)紹漢;高平明;吳時光;趙正云;羅曉鴻;鄭增鑫;;胎盤組織炎癥對早產(chǎn)兒腦室內(nèi)出血發(fā)病風(fēng)險的影響[J];中國新生兒科雜志;2010年03期

3 徐佳麗;張小林;龍?zhí)炝?;褪黑素對燙傷大鼠腦組織抗氧化能力與星形膠質(zhì)細胞的影響[J];中國實用醫(yī)藥;2011年20期

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本文編號：943806