目的:本實驗通過研究BMSC對白血病細胞的保護作用,通過檢測VLA-4抗體干預(yù)后白血病細胞凋亡率的改變,研究VLA-4抗體對BMSC保護作用的影響;通過檢測抗凋亡基因Survivin、Bcl-2的表達變化,進一步闡明可能機制,為深入研究兒童白血病及其臨床治療提供理論依據(jù)。 方法:一、收集白血病兒童骨髓標本,并進行分離培養(yǎng),提取BMSC與白血病細胞并用倒置相差顯微鏡觀察細胞形態(tài);實驗選第2代的BMSC和第4⁶代的白血病細胞。二、采用熒光染色、流式細胞術(shù)(FCM)檢測細胞凋亡率,研究BMSC對白血病細胞的保護作用及VLA-4抗體對其保護作用影響;三、應(yīng)用RT-PCR法研究各組白血病細胞Survivin、Bcl-2基因的表達情況,從基因水平來說明BMSC、VLA-4抗體、化療藥物三者之間的關(guān)系以及它們對白血病細胞凋亡的影響。 結(jié)果:一、體外單獨培養(yǎng)原代白血病細胞生存時間較短,生長狀態(tài)欠佳;在BMSC存在情況下,其生存時間延長,狀態(tài)比較好。二、BMSC組的凋亡率低于白血病細胞組(P<0.05);抗體組、抗體加藥物組白血病細胞凋亡率較BMSC組明顯增高(P<0....

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖2-1原代細胞的形態(tài)觀察a：分離的單個核細胞（200×）；b：分離出的白血病細胞（200×）

圖2-1原代細胞的形態(tài)觀察a：分離的單個核細胞（200×）；b：分離出的白血病細胞（200×）Fig2-1Themorphousofprimarygenerationcellsa:mononuclearcellswerejustbesegregate....

圖2-2骨髓基質(zhì)細胞的形態(tài)觀察a：原代BMSC（200×）；b：第二代BMSC（200×）

圖2-1原代細胞的形態(tài)觀察a：分離的單個核細胞（200×）；b：分離出的白血病細胞（200×）Fig2-1Themorphousofprimarygenerationcellsa:mononuclearcellswerejustbesegregate....

圖2-3BMSC和白血病細胞共培養(yǎng)a：剛分離的白血病細胞；b：共培養(yǎng)2天；c：共培養(yǎng)5天；d：共培養(yǎng)12天

-12-圖2-3BMSC和白血病細胞共培養(yǎng)a：剛分離的白血病細胞；b：共培養(yǎng)2天；c：共培養(yǎng)5天；d：共培養(yǎng)12天。（a、b、c：200×，d：400×）Fig2-3Theco-cultureofBMSCandleukemiccellsa:....

圖3--I共培養(yǎng)l壓各組白血病細胞流式細胞儀結(jié)果

組別AnnexinⅤ+/PI-AnnexinⅤ+/PI+AnnexinⅤ+/PI+andAnnexinⅤ+/PI-白血病細胞組10.51±1.98☆7.27±0.78☆17.78±2.17☆BMSC組4.99±1.663.27±1.228.26±1.22上....

本文編號：3933475