【摘要】： 目的:利用新生大鼠缺血缺氧性腦損傷(hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)動物模型,觀察缺血缺氧性腦損傷后不同時間腦皮質(zhì)細胞形態(tài)變化、NF-κB(P65)的表達及腦細胞死亡形式,探討HIBD后NF-κB(P65)的表達與細胞凋亡的關(guān)系,為缺血缺氧性腦病提供實驗和理論依據(jù)。 方法:7日齡SD大鼠128只,雌雄不限,體重12～18g,隨機分為假手術(shù)組和缺血缺氧組(均分為處理前、處理后2h、6h、12h、18h、24h、48h、72h組)共16組,每組各8只,缺血缺氧組動物采用阻斷右側(cè)頸總動脈后置于含8%O_2的低氧環(huán)境中2小時,建立缺血缺氧性腦損傷動物模型并對其行為進行觀察。根據(jù)實驗設(shè)計取各組新生大鼠腦組織,用組織化學(HE染色法)、免疫組織化學和脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導的缺口末端標記法(terminal-deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling,TUNEL)在光鏡下觀察皮質(zhì)腦組織的病理改變,通過免疫組化法測定NF-κB(P65)核陽性細胞數(shù)及用TUNEL法測定凋亡細胞指數(shù)。 結(jié)果:缺血缺氧后新生大鼠出現(xiàn)不同程度的行為異常。HE染色缺血缺氧后2-6h右側(cè)腦神經(jīng)細胞水腫及少量局灶性壞死,缺血缺氧后72h右側(cè)腦組織中可見界限清楚的壞死灶。正常腦組織內(nèi)僅觀察到少量位于胞漿中的NF-κB(P65)陽性細胞及凋亡細胞。缺血缺氧后NF-κB(P65)陽性細胞數(shù)明顯增加,且發(fā)生核移位,缺血缺氧后2h即可在皮質(zhì)部位觀察到NF-κB(P65)核陽性細胞數(shù);缺血缺氧后6-18h,NF-κB(P65)核陽性細胞數(shù)明顯增多;缺血缺氧后24～48h達到高峰:然后,隨缺血缺氧時間的延長,NF-κB(P65)核陽性細胞數(shù)逐漸減少,至缺血缺氧后72h時,NF-κB(P65)核陽性細胞數(shù)仍比假手術(shù)組高。缺血缺氧后2h皮質(zhì)部位出現(xiàn)凋亡細胞;缺血缺氧后6h凋亡細胞明顯增多,凋亡細胞出現(xiàn)高峰時間為18h～24h,然后凋亡細胞逐漸減少,細胞形態(tài)逐漸以壞死為主,缺血缺氧后48h～72h凋亡細胞明顯減少,壞死嚴重。 結(jié)論:在HIBD后24h內(nèi),隨著NF-κB(P65)的合成,腦組織內(nèi)凋亡細胞逐漸增多,表明在此階段神經(jīng)細胞仍處于可逆性損傷階段,提示此階段NF-κB(P65)的促損傷作用主要以促進細胞凋亡為主。HIBD 18h～24h后,凋亡細胞逐漸減少,神經(jīng)細胞的死亡以壞死為主,此階段神經(jīng)細胞呈不可逆性損傷,提示此階段NF-κB(P65)的促損傷作用主要以促進細胞壞死為主。
【學位授予單位】：山西醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2009
【分類號】：R722.1
【圖文】：

HIBD48h(X200)HIBD72h(X200)5:假手術(shù)組大腦皮質(zhì)部位僅有極少量的胞漿染色，未見明顯的NF一出(P65)胞;缺血缺氧后6-18h右側(cè)大腦皮質(zhì)部位NF一妞(P65)核陽性細胞逐漸增多氧后2今碑8h，右側(cè)大腦皮質(zhì)部位NF瑰B(P65)核陽性細胞數(shù)達到高峰。48刁腦皮質(zhì)部位NF一妞(P65)陽性細胞逐漸減少。

【參考文獻】

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本文編號：2729334