【摘要】：目的：研究川崎病(KD)患兒急性期、恢復(fù)期血清基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP-2)、基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)、基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑1(TIMP-1)、基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑2(TIMP-2)及一氧化氮(NO)的表達(dá)水平,并探討KD急性期血清MMP-2、MMP-3、TIMP-1、TIMP-2與NO的相關(guān)性分析的研究,探討其表達(dá)在KD冠脈損害中的作用,從而為預(yù)防冠脈損害提供理論依據(jù)。 方法：1.標(biāo)本采集：(1)研究組：30例川崎病患兒,冠脈損害組(CAL)15例,冠脈正常組(NCAL)15例,分別收集急性期(靜注IVIG前,病程第1-2周)、恢復(fù)期(靜注IVIG后,病程第3-4周)外周血制備血清。(2)對照組：分別抽取30例年齡相仿的發(fā)熱患兒(發(fā)熱對照組,F組)和30例年齡相仿的正常健康兒童(正常對照組,C組)外周血制備血清。 2.指標(biāo)檢測：用固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)測定各組患兒血清中MMP-2、MMP-3、TIMP-1、TIMP-2的水平,用硝酸還原法檢測各組患兒血清中N0的水平。 3.統(tǒng)計學(xué)處理：采用SPSS17.0進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析,數(shù)據(jù)以均數(shù)加減標(biāo)準(zhǔn)差(X±S)表示。方差齊用t檢驗,方差不齊用t’檢驗；MMP-2 /TIMP-2、MMP-3/TIMP-1比值用秩和檢驗。血清MMPs、TIMPs等與NO的相關(guān)分析采用Pearson法,檢驗水準(zhǔn)為0.05(雙側(cè)),P0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)果：1.MMP-2.TIMP-2.MMP-2/TIMP-2(1)川崎病CAL組MMP-2水平(480.75±9.82μg/L)高于NCAL組(450.06±4.38μg/L),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)；川崎病CAL組血清TIMP-2(393.61±3.89μg/L).MMP-2/TIMP-2(1.57±0.21)水平與NCAL組TIMP-2(376.30±11.28μg/L). MMP-2/TIMP-2(1.29±0.14)相比較明顯升高,差異有極顯著意義(P均0.01)。(2)KD急性期血清MMP-2(465.40±17.31μg/L). TIMP-2(384.95±12.09μg/L).MMP-2/TIMP-2(1.71±0.16)水平與發(fā)熱對照組MMP-2(311.26±15.81μg/L).TIMP-2(264.05±12.35μg/L).MMP-2/TIMP-2(1.05±0.19)和正常對照組MMP-2 (295.02±18.18μg/L).TIMP-2(253.46±15.41μg/L) MMP-2/TIMP-2(0.94±0.12)相比明顯升高(P均0.01)。(3)KD恢復(fù)期血清MMP-2(422.51±16.13μg/L).TIMP-2(338.83±14.93μg/L)與發(fā)熱對照組MMP-2(311.26±15.81μg/L).TIMP-2 (264.05±12.35μg/L).正常對照組MMP-2(295.02±18.18μg/L).TIMP-2(253.46±15.41μg/L)相比明顯升高(P均0.01),KD恢復(fù)期MMP-2/TIMP-2(1.29±0.12)與發(fā)熱對照組(1.05±0.19)和正常對照組(0.94±0.12)相比較明顯升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。(4)KD急性期血清MMP-2水平(465.40±17.31μg/L)與恢復(fù)期(422.51±16.13μg/L)相比較明顯升高(P0.05)TIMP-2(384.95±12.09μg/L).MMP-2/TIMP-2(1.71±0.16)水平與恢復(fù)期TIMP-2(338.83±14.93μg/L).MMP-2/TIMP-2(1.29±0.12)相比明顯升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)。(5)發(fā)熱對照組MMP-2(311.26±15.81μg/L).TIMP-2(264.05±12.35μg/L).MMP-2/TIMP-2(1.05±0.19)和正常對照組MMP-2(295.02±18.18μg/L).TIMP-2(253.46±15.41μg/L).MMP-2 /TIMP-2(0.94±0.12)相比較,無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。 2.MMP-3.TIMP-1.MMP-3/TIMP-1(1)川崎病CAL組血清MMP-3(58.38±9.43μg/L)和NCAL組血清水平(33.78±3.34μg/L)相比明顯升高,差異有極顯著意義(P0.01)；血清TIMP-1水平(298.37±61.45μg/L)水平較NCAL組(357.16±.22.79μg/L)明顯降低,差異有極顯著意義(P0.01)；血清MMP-3/TIMP-1(0.45±0.15)和NCAL組(0.08±0.02)相比較明顯升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。(2)KD急性期MMP-3(46.07±14.31μg/L).MMP-3／TIMP-1(0.14±0.06).恢復(fù)期血清MMP-3 (32.41±7.48μg/L).MMP-3／TIMP-1(0.13±0.09)水平與發(fā)熱對照組MMP-3(31.96±4.11μg/L).MMP-3/TIMP-1(0.15±0.04)和正常對照組MMP-3(10.51±0.45μg/L).MMP-3/TIMP-1(0.12±0.02)相比較均明顯升高(P均0.01)。(3)KD急性期TIMP-1水平(328.93±45.17μg/L)、KD'恢復(fù)期TIMP-1水平(281.61±39.42μg/L)與發(fā)熱對照組(247.64±16.73μg/L)和正常對照組(94.63±3.60μg/L)相比較,明顯升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P均0.01)；而KD急性期TIMP-1水平(328.93±45.17μg/L)與KD恢復(fù)期TIMP-1 (281.61±39.42μg/L)相比較,差異沒有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。(4)發(fā)熱對照組MMP-3(31.96±4.11μg/L).TIMP-1(247.64±16.73μg/L)與正常對照組MMP-3(10.51±0.45μg/L).TIMP-1 (94.63±3.60μg/L)相比；差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)；而發(fā)熱對照組MMP-3／TIMP-1(0.15±0.04)和正常對照組MMP-3/ TIMP-1(0.12±0.02)相比較,差異沒有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。 3. NO(1)川崎病CAL組NO水平(176±22μmol/L)明顯高于NCAL組(97±14μmol/L),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。(2)KD急性期NO水平(137±44μmol/L)、恢復(fù)期(73±23μmol/L)與發(fā)熱對照組(44±11μmol/L).正常對照組(41±11μmol/L)相比較,明顯升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P均0.01)。(3)KD急性期N0水平(137±44μmol/L)與恢復(fù)期(73±23μmol/L)相比較,明顯升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)。(4)發(fā)熱對照組NO水平(44±11μmol/L)和正常對照組(41±11μmol/L)相比較沒有顯著差異(P0.05)。 4.MMPs.TIMPs與NO的相關(guān)性分析：(1)血清MMP-2、MMP-3與NO之間呈顯著正相關(guān)(r=0.895,P0.01；r=0.898,P0.01)。(2)血清中TIMP-2.TIMP-1與NO之間呈顯著負(fù)相關(guān)(r=-0.382,P0.05；r=-0.772,P0.01) 結(jié)論：1.KD冠脈損害組患兒血清MMP-2.T IMP-2.MMP-2/TIMP-2的水平明顯高于KD冠脈正常組,提示血清中MMP-2.TIMP-2.MMP-2/ TIMP-2可以做為川崎病冠脈損害的一個危險因素,在KD血管壁的損傷以及冠狀動脈瘤的形成中起著重要作用,KD急性期過后可能仍存在有MMP-2,TIMP-2升高,表明KD可能存在持久的冠狀動脈損傷,因而對KD患兒需長期監(jiān)測血管損害情況。 2.川崎病CAL組血清MMP-3和NCAL組相比明顯升高,提示MMP-3很可能參與了血管壁的損傷過程；可以做為預(yù)測與早期診斷CAL的客觀生化指標(biāo)。KD急性期MMP-3.TIMP-1.MMP-3/TIMP-1水平明顯高于恢復(fù)期和對照組；提示MMP-3.TIMP-1.MMP-3/TIMP-1可作為早期診斷川崎病的一個客觀生化指標(biāo)。 3.NO過度表達(dá)參與了KD急性期血管炎尤其是冠脈損害的發(fā)生發(fā)展,由此可以將循環(huán)中NO水平作為判斷KD冠脈損害的一個有效指標(biāo)。 4.血清中MMP-2、MMP-3與NO之間呈顯著性正相關(guān),提示MMP-2、MMP-3與NO之間可能存在相互協(xié)同作用,共同促進(jìn)冠脈損害的發(fā)生和發(fā)展。血清中TIMP-2.TIMP-1與NO之間呈顯著性負(fù)相關(guān),表明可能TIMPs做為MMPs特異抑制劑在一定程度上抑制MMPs的同時,對NO的表達(dá)也有一定抑制作用,應(yīng)用TIMPs對MMPs水平進(jìn)行調(diào)控的同時,可能對血清中NO水平表達(dá)也是一個調(diào)控。
【圖文】：

例數(shù)組15L組15MMI〕一2(pg/L)480.75士9.82TIMP一2(pg/L)HMP一2/Tl柳一393.61士3.891.57士0.21450.06士4.38376.30士11.281.29士0.146.2213。297.75<0.05<0.01<0.01一一一一--一---一---一-川崎病CAL組血清MMP一2、Tl珊一2、MMP一2/TI淤一2和NCAL組相較明顯增高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05或P<0.01)

圖4CAL組、NCAL組血清MMP一2/TIMP一2的比較組對象血清MMP一3、T1MP一1含量與MMP一3/T1MP--1的川崎病組、發(fā)熱對照組、正常對照組血清MMP一3、TIMP一3/TIMP一1比值的比較，，見表3、圖5、圖6。表3各組血清MMP一3、TIMP一1、MMP一3/TIMP一1比較別例數(shù)MMP一3(pg/L)TIMP一1(pg/L)MMP一急性期3046.07士14.31▲獲328.93士45一7城0一
【學(xué)位授予單位】：瀘州醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號】：R725.4

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本文編號：2666968