【摘要】：第一部分毛細(xì)支氣管炎和支氣管哮喘外周血CD4+T淋巴細(xì)胞亞群比較 目的:比較毛細(xì)支氣管炎急性期和支氣管哮喘發(fā)作期外周血CD4+T淋巴細(xì)胞亞群Th1、Th2、Th17、Treg細(xì)胞百分比及其細(xì)胞因子水平。 方法:毛細(xì)支氣管炎急性期患兒31例,支氣管哮喘發(fā)作期26例及正常對照18例,采用流式細(xì)胞術(shù)檢測外周血單個核細(xì)胞(PBMCs)中Th1、Th2、Th17、Treg細(xì)胞占CD4細(xì)胞的比例。雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測血清IL-4,IL-10,IL-17和IFN-γ水平。 結(jié)果:毛細(xì)支氣管炎患兒Th1細(xì)胞亞群百分比較正常組和哮喘組均有降低,P值分別0.000和0.010;而支氣管哮喘組Th1百分比較正常組有降低趨勢,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.096)。毛細(xì)支氣管炎組Th2細(xì)胞亞群百分比較正常組有升高趨勢,但無統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.357);與支氣管哮喘組相比降低(P=0.006),同時哮喘組Th2細(xì)胞比例顯著高于正常組(P=0.001)。毛細(xì)支氣管炎組Th17細(xì)胞亞群百分比較正常組有升高趨勢,但無統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.336);較支氣管哮喘組有降低趨勢偏低,差異無統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.333)。毛細(xì)支氣管炎組Treg細(xì)胞亞群百分比較正常組和喘息組,P值分別為0.024和0.000。進一步做各組Th1/Th2細(xì)胞比值計算結(jié)果分別為:正常組:10.22±9.51,支氣管哮喘組:5.12±2.19,毛細(xì)支氣管炎組:5.52±1.16;統(tǒng)計學(xué)分析顯示毛細(xì)支氣管炎組與支氣管哮喘組比較P=0.763,與正常組比較P=0.000。毛細(xì)支氣管炎患兒血清IFN-γ,比正常組降低(P=0.001),與支氣管哮喘組比較偏高(P=0.023)。毛細(xì)支氣管炎組IL-4,較正常組升高但無統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.893),與支氣管哮喘組相比降低(P=0.000)。毛細(xì)支氣管炎組IL-17細(xì)胞亞群較正常組升高,無統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.451);較支氣管哮喘組偏低,差異無統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.363)。毛細(xì)支氣管炎組IL-10較正常組降低(P=0.002);與支氣管哮喘組相比降低,差異無統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.023)。 結(jié)論:毛細(xì)支氣管炎急性期與正常組比較Th1細(xì)胞亞群降低,Th2細(xì)胞亞群升高不明顯,Treg細(xì)胞亞群下降;哮喘發(fā)作期與正常組比較,Th1和Treg細(xì)胞亞群降低,Th2細(xì)胞亞群升高。Th1/Th2細(xì)胞比值提毛細(xì)支氣管炎急性期和哮喘發(fā)作期可能存在與相似的Th1和Th2細(xì)胞比值下降的失衡趨勢。同時毛細(xì)支氣管炎急性期Treg細(xì)胞百分比上調(diào),但可能存在功能不足。 第二部分毛細(xì)支氣管炎急性期外周血調(diào)節(jié)性T淋巴細(xì)胞對毛細(xì)支氣管炎后喘息的影響 目的:了解毛細(xì)支氣管炎后喘息與非喘息組外周血CD4+T淋巴細(xì)胞的Th1、Th2、Th17、Treg細(xì)胞計數(shù)及其細(xì)胞因子水平之間有無差異,以及過敏史、病毒感染類型對毛細(xì)支氣管炎后喘息的影響。 方法:電話隨訪毛細(xì)支氣管炎患兒近一年的喘息情況。毛細(xì)支氣管炎后喘息患兒11例,非喘息患兒7例。.采用流式細(xì)胞術(shù)檢測外周血單個核細(xì)胞(PBMCs)中Th1、Th2、Th17、Treg細(xì)胞占CD4+細(xì)胞的比例。ELISA檢測血清IL-4,IL-10,IL-17和IFN-γ水平。 結(jié)果:毛細(xì)支氣管炎后喘息與非喘息患兒相比較,喘息組在毛細(xì)支氣管炎急性期Th17/CD4+T細(xì)胞和Th2細(xì)胞/CD4+T細(xì)胞百分比有升高趨勢,Th1細(xì)胞百分比有降低趨勢,但均無統(tǒng)計學(xué)差異。而喘息組在毛細(xì)支氣管炎急性期Treg細(xì)胞百分比較非喘息組降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.023)。毛細(xì)支氣管炎后喘息患兒與非喘息患兒相比較,喘息組在毛細(xì)支氣管炎急性期血清IL-17、IL-4、IL-10、IFN-γ水平較非喘息組有升高趨勢,但均無統(tǒng)計學(xué)差異。 結(jié)論:毛細(xì)支氣管炎后喘息的發(fā)生可能與毛細(xì)支氣管炎急性期Treg細(xì)胞功能障礙有關(guān)。 第三部分Mina基因多態(tài)性與兒童變應(yīng)性喘息相關(guān)性研究 目的:研究Mina基因rs832081 (C/T), rs832078 (C/T), rs4857304 (G/T), rs9879532 (C/T), rs17374916 (A/G), rs1532206 (A/G)共6個位點單核苷酸多態(tài)性(SNPs)與重慶地區(qū)漢族兒童變應(yīng)性喘息的相關(guān)性。 方法:采用病例對照研究,標(biāo)簽SNPs用Haploview version 4.0軟件通過TAGGER程序計算。MALDI-TOF技術(shù)進行Mina位點基因分型。觀察不同基因型和等位基因頻率在喘息組和對照組中的分布差異。 結(jié)果:共納入支氣管哮喘患兒202例年齡在6.97±2.85歲之間,對照組191例年齡在8.14±3.13歲之間。Mina的rs4857304位點在喘息組和對照組等位基因頻率比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.0199,OR=1.477,95%可信區(qū)間=1.062-2.052),喘息組rs4857304位點等位基因T頻率高于對照組,而兩組之間該位點基因型分布比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。 結(jié)論: Mina基因rs4857304位點與兒童變應(yīng)性喘息相關(guān)。 第四部分Mina基因rs4857304位點多態(tài)性不能判斷學(xué)齡前兒童反復(fù)喘息與支氣管哮喘 目的:研究Mina基因rs4857304 (G/T)位點單核苷酸多態(tài)性與5-7歲和7歲以上兒童變應(yīng)性喘息的相關(guān)性。 方法:采用病例對照研究。MALDI-TOF技術(shù)進行Mina位點基因分型。顯性遺傳模型用來比較rs4857304 (G/T)位點GG型和TT+TG基因型之間的差異。隱性遺傳模型用來比較rs4857304 (G/T)位點TT型和TG+GG型之間基因型的差異。觀察Mina基因rs4857304位點TT型和TG+GG型在反復(fù)喘息和哮喘兒童之間差異。 結(jié)果:共納入喘息患兒202例年齡在6.97±2.85歲之間,對照組191例年齡在8.14±3.13歲之間。通過隱性遺傳模型分析發(fā)現(xiàn),rs4857304位點主要等位基因T純合型,即TT型和GG+GT型相比,在兩組比較有統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.0282,OR=1.568,95%CI=1.048-2.346)。進一步將喘息兒童分為反復(fù)喘息組和支氣管哮喘組,5-6歲反復(fù)喘息共有58例,其中TT型39例,GT+GG型19例。7歲哮喘病人共有141例,其中TT型84例,GT+GG型57例。經(jīng)卡方檢驗發(fā)現(xiàn),兩組患兒之間的TT型和GT+GG型比較無統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.353)。 結(jié)論: Mina基因rs4857304位點多態(tài)性不能作為判斷學(xué)齡前兒童反復(fù)喘息和支氣管哮喘的標(biāo)準(zhǔn)之一。
【圖文】：

Bronchiolitis group Asthma group Control group圖 1 Thl 細(xì)胞流式檢測圖igure 2 Flow cytometric analysis the proportion of Thl/CD4+ T cells in PBMCs of patientswith asthma and bronchiolitis and the controls

Bronchiolitis group Asthma group Control group圖 1 Thl 細(xì)胞流式檢測圖igure 2 Flow cytometric analysis the proportion of Thl/CD4+ T cells in PBMCs of patientswith asthma and bronchiolitis and the controls
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號】：R725.6

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本文編號：2665983