發(fā)布時(shí)間：2018-05-26 15:02

  本文選題：呼吸道合胞病毒(RSV) + 胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素(TSLP)　； 參考：《中國免疫學(xué)雜志》2017年09期

【摘要】：目的:通過觀察當(dāng)呼吸道合胞病毒(RSV)感染幼齡大鼠肺組織時(shí)胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素(TSLP)與IL-4、IL-10和IL-13的變化,探討TSLP與Th2反應(yīng)的相關(guān)性。方法:將18只正常Wistar大鼠隨機(jī)分為模型組和正常對(duì)照組,每組各9只。應(yīng)用RSV病毒液滴鼻造模,生理鹽水滴鼻做對(duì)照。取大鼠肺部組織進(jìn)行病理切片觀察炎癥反應(yīng)情況;運(yùn)用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(q-PCR)分別檢測兩組大鼠不同時(shí)間點(diǎn)合胞病毒載量情況和肺組織TSLP在基因水平的表達(dá)情況,同時(shí)采用免疫印記法(Western blot)檢測肺組織TSLP在蛋白水平的表達(dá)情況;同時(shí)應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測大鼠血清中Th2型相關(guān)細(xì)胞因子IL-4、IL-10和IL-13的表達(dá)水平;并對(duì)TSLP與L-4、IL-10、IL-13的關(guān)系進(jìn)行Spearman相關(guān)分析。結(jié)果:與正常對(duì)照組相比,模型組大鼠在滴鼻感染后出現(xiàn)精神狀態(tài)差、毛粗糙、活動(dòng)減少、呼吸短促等癥狀,且上述癥狀進(jìn)行性加重;病理觀察顯示模型組大鼠可見肺泡壁明顯增厚,肺間質(zhì)可見大量的漿細(xì)胞、淋巴細(xì)胞以及嗜酸性粒細(xì)胞浸潤;q-PCR法檢測模型組大鼠合胞病毒載量逐漸增加,在第5天左右達(dá)到峰值,后逐漸降低;RSV感染促進(jìn)大鼠體內(nèi)TSLP表達(dá)水平增加,q-PCR法和Western blot法檢測顯示:模型組大鼠的TSLP濃度均高于對(duì)照組(P0.05);同時(shí)ELISA檢測表明模型組大鼠血清中IL-4、IL-10和IL-13的濃度均高于對(duì)照組(P0.05);Spearman相關(guān)分析顯示RSV模型組大鼠的TSLP與IL-4和IL-10表達(dá)水平均呈正相關(guān),TSLP與IL-13表達(dá)水平無相關(guān)性。結(jié)論:RSV感染W(wǎng)istar大鼠肺組織時(shí),可誘導(dǎo)TSLP表達(dá)水平增加,同時(shí)促進(jìn)Th2型炎癥反應(yīng)的發(fā)生及相關(guān)細(xì)胞因子的表達(dá),為進(jìn)一步研究RSV感染致毛細(xì)支氣管炎和哮喘等喘息類疾病的作用機(jī)制及臨床治療奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:Objective: To observe the changes of thymic stromal lymphopoietin (TSLP) and IL-4, IL-10 and IL-13 in the lung tissue of young rats infected with respiratory syncytial virus (RSV), and to explore the correlation between TSLP and Th2 reaction. Methods: 18 normal Wistar rats were randomly divided into model group and normal control group, 9 rats in each group. Model, physiological saline drip nose was used as control. Pathological section of rat lung was taken to observe the inflammatory response. Real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction (q-PCR) was used to detect the load of syncytial virus at different time points and the expression of TSLP in the lung tissue in two groups, and the immune imprint method (Western blot) was used. The expression of TSLP in the protein level of lung tissue was detected; at the same time, enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) was used to detect the expression level of Th2 related cytokines IL-4, IL-10 and IL-13 in rat serum, and the relationship between TSLP and L-4, IL-10 and IL-13 was carried out Spearman correlation analysis. The symptoms such as poor mental state, rough hair, reduced activity, short breathing and other symptoms were observed, and the above symptoms were aggravated. Pathological observation showed that the alveolar wall in the model group was obviously thickened, the pulmonary interstitium could be seen in a large number of plasma cells, lymphocyte and eosinophil infiltration, and the load of the syncytial virus increased gradually in the q-PCR test model group. The peak value reached fifth days and then decreased gradually. RSV infection promoted the TSLP expression in rats. The q-PCR and Western blot assay showed that the TSLP concentration in the model group was higher than that of the control group (P0.05), and the ELISA detection showed that the concentration of IL-4, IL-10 and IL-13 in the serum of the model group was higher than that of the control group (P0.05). The correlation analysis showed that the TSLP in the RSV model group was positively correlated with the expression level of IL-4 and IL-10, and there was no correlation between the expression level of TSLP and IL-13. Conclusion: RSV can induce the increase of TSLP expression level in the lung tissue of Wistar rats with RSV infection, and promote the occurrence of the Th2 type inflammatory reaction and the expression of related cytokines, which can further study the capillary capillary of RSV infection. The mechanism and clinical treatment of asthmatic diseases such as bronchitis and asthma have laid the foundation.
【作者單位】： 大連市兒童醫(yī)院;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(No.81473726) 遼寧省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(2014020173)資助
【分類號(hào)】：R725.6

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本文編號(hào)：1937679