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中獸藥黃芪莖葉散臨床前研究

發(fā)布時(shí)間:2017-09-23 05:16

  本文關(guān)鍵詞:中獸藥黃芪莖葉散臨床前研究


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【摘要】:目的本課題通過(guò)對(duì)中獸藥黃芪莖葉散進(jìn)行臨床前研究,旨在開(kāi)發(fā)黃芪藥材新的藥用部位,科學(xué)合理地利用黃芪莖葉自然資源,為黃芪莖葉應(yīng)用于中獸藥領(lǐng)域奠定理論基礎(chǔ),為開(kāi)發(fā)其藥用價(jià)值提供科學(xué)依據(jù)。方法(1)黃芪莖葉原料藥材的質(zhì)量研究:采用觀察法、石蠟切片法、顯微鑒別法對(duì)其性狀、組織特征及粉末特征進(jìn)行研究;采用TLC對(duì)其進(jìn)行定性研究;采用藥典法測(cè)定水分、總灰分、浸出物的含量;采用HPLC測(cè)定黃芪甲苷、毛蕊異黃酮葡萄糖苷的含量;采用比色法測(cè)定總皂苷、APS的含量。(2)黃芪莖葉散的藥學(xué)研究:采用藥典法對(duì)黃芪莖葉散處方及制劑工藝進(jìn)行研究;采用單篩分法、烘干法、裝量差異檢查法對(duì)其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行研究;根據(jù)獸藥穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)技術(shù)規(guī)范對(duì)其穩(wěn)定性進(jìn)行研究。(3)黃芪莖葉散的藥效學(xué)研究:采用倍比稀釋法與藥敏紙片法結(jié)合應(yīng)用來(lái)探究其體外抑菌效果;采用ConA與LPS誘導(dǎo)的體外小鼠脾細(xì)胞增值實(shí)驗(yàn)來(lái)探究其是否具有免疫功能調(diào)節(jié)作用。(4)黃芪莖葉散的急性毒性試驗(yàn):經(jīng)過(guò)一次給藥后觀察小鼠的毒性反應(yīng)并測(cè)定其LD50并做最大耐受量測(cè)定。結(jié)果(1)黃芪莖葉原料藥材的質(zhì)量研究:本品性狀:莖呈圓柱形,分枝較多,長(zhǎng)約為50~60 cm,直徑約為0.5~1.5 cm。質(zhì)地堅(jiān)硬,韌性強(qiáng)不易折斷,斷面纖維性強(qiáng),皮部呈黃綠色,木部呈淡黃色,呈放射狀紋理,有裂隙。葉片呈橢圓形或長(zhǎng)卵圓形,長(zhǎng)約為0.5~1.5 cm,寬約為0.5~1.0 cm,葉片先端鈍尖,截形或具短尖頭,全緣;其托葉呈披針形或三角形。羽狀復(fù)葉互生,呈黃綠色,皺縮;干燥葉片紙質(zhì),易碎。氣微味甘,嚼之微有豆腥味。鑒別:莖橫切面:表皮細(xì)胞多呈方形,皮層和髓分化不明顯,皮層由厚角組織、薄壁組織組成。維管束中維管柱排列明顯。葉橫切面:上、下表皮細(xì)胞呈類方形,最外層為角質(zhì)層。上下各一層?xùn)艡诮M織且通過(guò)主脈。海綿組織細(xì)胞呈類圓形,有草酸鈣簇晶,主脈維管束外韌型,周圍排列著柱鞘纖維,呈環(huán)形;薄壁細(xì)胞中有草酸鈣棱晶,木薄壁細(xì)胞中,偶見(jiàn)草酸鈣簇晶。本品粉末呈黃綠色,其中含有螺紋導(dǎo)管、纖維、草酸鈣簇晶、厚壁細(xì)胞和淀粉粒。薄層色譜斑點(diǎn)清晰、圓整且重復(fù)性較好。黃芪莖葉水分質(zhì)量分?jǐn)?shù)為6.24%~12.24%,總灰分為8.21%~10.55%,水溶性浸出物為12.12%~27.30%,醇溶性浸出物為6.89%~10.28%,總皂苷為23.74~26.52 mg·g-1,APS為23.31~45.70 mg·g-1,黃芪甲苷為0.047%~0.18%,毛蕊異黃酮葡萄糖苷為0.21%~0.26%。(2)黃芪莖葉散的藥學(xué)研究:通過(guò)5號(hào)藥典篩的粉末重量為96%~99%。外觀色澤均勻,無(wú)花紋、色斑。水分質(zhì)量分?jǐn)?shù)為6.04%~9.28%。裝量差異均未超出裝量差異限度,且其在加速試驗(yàn)和長(zhǎng)期試驗(yàn)下均較穩(wěn)定。(3)黃芪莖葉散的藥效學(xué)研究:黃芪莖葉散提取物對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、枯草桿菌和綠膿桿菌四種供試菌的最低抑菌濃度值(MIC值),其中水提物(一年生)為15.6、62.5、31.2、62.5 mg·mL-1;水提物(多年生)為15.6、31.2、31.2、62.5 mg·mL-1;醇提物(一年生)為7.81、31.2、31.2、62.5 mg·mL-1;醇提物(多年生)為7.81、31.2、15.6、62.5mg·mL-1。最低殺菌濃度值(MBC值)分別為62.5、31.2、125 mg·mL-1、62.5 mg·mL-1。黃芪莖葉散提取物對(duì)ConA誘導(dǎo)的體外小鼠脾細(xì)胞增值試驗(yàn)探究的結(jié)果為,中低劑量組OD值降低,而高劑量組OD值增高。對(duì)LPS誘導(dǎo)的體外小鼠脾細(xì)胞增殖試驗(yàn)結(jié)果為高中劑量組OD值增高,而低劑量組除水提物(一年生)及醇提物(多年生)外,OD值均增高。(4)黃芪莖葉散的急性毒性試驗(yàn):經(jīng)一次給藥后未能測(cè)出其LD50。在給藥后7日內(nèi),觀察到小鼠活動(dòng)正常,被毛光澤,眼、鼻、口腔未見(jiàn)異常分泌物,進(jìn)食情況良好,排泄物顏色正常且無(wú)一例死亡現(xiàn)象。結(jié)論(1)黃芪莖葉原料藥材的質(zhì)量研究:本試驗(yàn)采用的方法方便快捷,有較好的可重復(fù)性,結(jié)果準(zhǔn)確,可作為制定黃芪莖葉原料藥材的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)提供依據(jù)。(2)黃芪莖葉散的藥學(xué)研究:對(duì)黃芪莖葉散,建立切實(shí)可行的質(zhì)量控制方法,包括粒度、外觀均勻度、含量測(cè)定、水分、裝量差異等,黃芪莖葉散經(jīng)加速試驗(yàn)和長(zhǎng)期試驗(yàn)后本品性狀、含量、粒度、外觀均勻度均符合規(guī)定。(3)黃芪莖葉散的藥效學(xué)研究:黃芪莖葉散對(duì)金黃色葡萄球菌,大腸桿菌,枯草桿菌及綠膿桿菌四種供試菌均有抑制作用,且均能促進(jìn)ConA、LPS誘導(dǎo)的脾淋巴細(xì)胞體外增殖,說(shuō)明其具有免疫增強(qiáng)作用。(4)黃芪莖葉散的急性毒性試驗(yàn):黃芪莖葉散為安全低毒的綠色中獸藥產(chǎn)品。
【關(guān)鍵詞】:黃芪莖葉散 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 穩(wěn)定性 抑菌活性 免疫增強(qiáng)作用
【學(xué)位授予單位】:佳木斯大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:S853.7
【目錄】:
  • 摘要7-9
  • Abstract9-12
  • 前言12-13
  • 第1章 文獻(xiàn)綜述13-17
  • 1.1 黃芪莖葉研究進(jìn)展13-15
  • 1.1.1 黃芪莖葉的化學(xué)成分13-14
  • 1.1.2 黃芪莖葉的藥理學(xué)研究14-15
  • 1.1.3 研究開(kāi)發(fā)現(xiàn)狀15
  • 1.2 黃芪莖葉在中獸藥領(lǐng)域中的應(yīng)用15-16
  • 1.3 展望16-17
  • 第2章 黃芪莖葉原料藥材的質(zhì)量研究17-36
  • 2.1 儀器與材料17-18
  • 2.1.1 儀器17
  • 2.1.2 試劑17-18
  • 2.1.3 材料18
  • 2.2 方法18-25
  • 2.2.1 黃芪莖葉原料藥材性狀、組織特征18-19
  • 2.2.2 黃芪莖葉原料藥材中指標(biāo)成分的鑒別19-20
  • 2.2.3 黃芪莖葉原料藥材的檢查20-21
  • 2.2.4 黃芪莖葉原料藥材的浸出物21
  • 2.2.5 黃芪莖葉原料藥材的含量測(cè)定21-25
  • 2.3 結(jié)果與討論25-34
  • 2.3.1 黃芪莖葉原料藥材性狀、組織特征結(jié)果25-27
  • 2.3.2 黃芪莖葉原料藥材中指標(biāo)成分的鑒別結(jié)果27
  • 2.3.3 黃芪莖葉原料藥材的檢查結(jié)果27-28
  • 2.3.4 黃芪莖葉原料藥材的浸出物測(cè)定結(jié)果28
  • 2.3.5 黃芪莖葉原料藥材的含量測(cè)定結(jié)果28-34
  • 2.3.6 討論34
  • 2.4 小結(jié)34-36
  • 第3章 黃芪莖葉散的藥學(xué)研究36-43
  • 3.1 儀器與材料36
  • 3.1.1 儀器36
  • 3.1.2 試劑36
  • 3.1.3 材料36
  • 3.2 方法36-37
  • 3.2.1 處方及制劑工藝研究36
  • 3.2.2 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究36-37
  • 3.2.3 穩(wěn)定性考察37
  • 3.3 結(jié)果與討論37-41
  • 3.3.1 黃芪莖葉散的藥學(xué)研究結(jié)果37-41
  • 3.3.2 討論41
  • 3.4 小結(jié)41-43
  • 第4章 黃芪莖葉散的藥效學(xué)研究43-59
  • 4.1 儀器與材料43-44
  • 4.1.1 儀器43
  • 4.1.2 試劑43
  • 4.1.3 材料43-44
  • 4.2 方法44-47
  • 4.2.1 體外抑菌作用研究44-45
  • 4.2.2 黃芪莖葉散對(duì)免疫功能調(diào)節(jié)作用的研究45-47
  • 4.3 結(jié)果與討論47-58
  • 4.3.1 黃芪莖葉散的藥效學(xué)研究結(jié)果47-57
  • 4.3.2 討論57-58
  • 4.4 小結(jié)58-59
  • 第5章 黃芪莖葉散急性毒性試驗(yàn)59-61
  • 5.1 儀器與材料59
  • 5.1.1 儀器59
  • 5.1.2 材料59
  • 5.1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物59
  • 5.2 方法59-60
  • 5.2.1 受試藥品的制備59
  • 5.2.2 LD50測(cè)定59
  • 5.2.3 最大耐受量測(cè)定59-60
  • 5.3 結(jié)果與討論60
  • 5.3.1 LD50測(cè)定結(jié)果60
  • 5.3.2 最大耐受量測(cè)定結(jié)果60
  • 5.3.3 討論60
  • 5.4 小結(jié)60-61
  • 結(jié)論61-62
  • 參考文獻(xiàn)62-67
  • 致謝67-68
  • 英文縮寫68-69
  • 附圖69-70
  • 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)成果70

【參考文獻(xiàn)】

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中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 馬振平;黃芪葉化學(xué)成分及含量測(cè)定研究[D];黑龍江中醫(yī)藥大學(xué);2014年



本文編號(hào):903406

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