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豬瘟病毒RT-LAMP-LFD檢測(cè)方法的建立與應(yīng)用

發(fā)布時(shí)間:2017-07-06 11:21

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【摘要】:【目的】建立一種新型的、能在基層場(chǎng)地進(jìn)行實(shí)時(shí)便捷診斷的豬瘟病毒檢測(cè)方法!痉椒ā凯h(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)-橫向流動(dòng)試紙條技術(shù)(Lateral flow dipstick,LFD)相結(jié)合,針對(duì)豬瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)NS5B基因設(shè)計(jì)一套特異性引物及生物素標(biāo)記探針,結(jié)合異硫氰酸熒光素標(biāo)記的擴(kuò)增產(chǎn)物,建立RT-LAMP-LFD檢測(cè)方法!窘Y(jié)果】所建立的方法能夠特異地檢測(cè)出CSFV的存在,檢測(cè)PRRSV、JEV、PCV-2等其他病毒均為陰性;所建立的CSFV-RT-LAMP方法對(duì)RNA的最低檢測(cè)限為50 pg;反應(yīng)快速,整個(gè)擴(kuò)增反應(yīng)可在1 h內(nèi)完成;操作簡單,不需要PCR儀等復(fù)雜的儀器,結(jié)果可經(jīng)肉眼觀察!窘Y(jié)論】應(yīng)用RTLAMP-LFD檢測(cè)CSFV特異性強(qiáng)、靈敏度高,并且操作安全、簡便、快捷,可以滿足基層檢疫的需要。
【作者單位】: 華南農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】豬瘟病毒 NSB基因 環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù) 橫向流動(dòng)試紙條技術(shù) 病毒檢測(cè)
【基金】:國家自然科學(xué)基金(U1405216;31172321和31472200) 廣東省高等教育科技創(chuàng)新特殊項(xiàng)目(2012CXZD0013)
【分類號(hào)】:S852.65
【正文快照】: 優(yōu)先出版網(wǎng)址:http://www.cnki.net/kcms/detail/44.1110.s.20151207.1115.002.html豬瘟(Classical swine fever,CSF)是由豬瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)引起的豬的一種高度接觸性、急性傳染病。該病的高發(fā)病率和高死亡率給養(yǎng)豬業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失,嚴(yán)重危害畜

【相似文獻(xiàn)】

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10 郭煥成;席進(jìn);涂長春;;豬瘟病毒基因分型寡核苷酸芯片方法的建立[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)動(dòng)物傳染病學(xué)分會(huì)第四次豬病防控學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2010年

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本文編號(hào):526005

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