2017年3月-2018年12月,在云南省昆明市、大理州、迪慶州、德宏州和楚雄州的35個采樣點共采集各種野生小型哺乳動物肌肉樣品1153份,包括嚙齒類23種1037份,食蟲目4種96份,樹鼩目1種20份;2017年10月,在廣西壯族自治區(qū)玉林市農(nóng)貿(mào)市場采集37份源于不同個體的家犬肌肉樣品。在1153份源于不同個體的野生小型哺乳動物的肌肉樣品中,檢查到有肉孢子蟲感染的計193份,自然感染率為16.74%(193/1153),共鑒定出8種肉孢子蟲:(1)黃毛鼠肉孢子蟲新種(Sarcocystis losea n.sp.),中間宿主包括黃毛鼠(Rattuslosea)、黃胸鼠(R.flavipectus)和褐家鼠(R.norvegicus)。光鏡下包囊突起長指狀,電鏡下突起呈柵欄狀,內(nèi)無微管,包囊壁電鏡類型為“10”型;GenBank中與其18SrDNA基因相似性最高的是鼠屬(Rattus)的左氏肉孢子蟲(S.zuoi)(平均相似度98.24%);與其線粒體COX1基因相似度最高的是以東方鼠蛇(Pantherophis alleghaniensis)為終末宿主的1種未命名肉孢子蟲(Sarcoc...

【文章頁數(shù)】：111 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 文獻綜述
    1 肉孢子蟲的研究史和分類地位
    2 肉孢子蟲的結(jié)構(gòu)和生活史
        2.1 結(jié)構(gòu)
        2.2 生活史
    3 肉孢子蟲的分類依據(jù)
    4 野生小型哺乳動物肉孢子蟲的研究背景及意義
        4.1 野生鼠類肉孢子蟲的研究背景
            4.1.1 寄生于鼠屬(Rattus)已命名的7種肉孢子蟲
            4.1.2 寄生于姬鼠屬(Apodemus)已命名的1種肉孢子蟲
            4.1.3 寄生于絨鼠屬(Eothenomys)已命名的2種肉孢子蟲
        4.2 野生食蟲目肉孢子蟲的研究背景
        4.3 野生小型哺乳動物肉孢子蟲的研究意義
    5 犬肌肉肉孢子蟲的研究背景及意義
        5.1 犬肌肉肉孢子蟲的研究背景
        5.2 犬肌肉肉孢子蟲的研究意義
第二章 云南省部分野生小型哺乳動物肉孢子蟲的形態(tài)學和分子標記特征
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 野生小型哺乳動物肌肉樣品的采集
        2.2 野生小型哺乳動物(宿主)的鑒定
        2.3 肉孢子蟲包囊的光鏡觀察
        2.4 制備肉孢子蟲包囊的透射電鏡材料及觀察
        2.5 分子生物學實驗所需試劑與實驗儀器
            2.5.1 包囊DNA提取所需試劑
            2.5.2 PCR擴增及檢測電泳試劑
            2.5.3 分子生物學實驗所需試劑
            2.5.4 實驗所需主要儀器設備
        2.6 分子實驗方法
            2.6.1 包囊DNA提取
            2.6.2 基因的PCR擴增
            2.6.3 PCR產(chǎn)物的純化與回收
            2.6.4 目的片段的連接與轉(zhuǎn)化
            2.6.5 陽性質(zhì)粒DNA的PCR鑒定
    3 實驗結(jié)果
        3.1 野生小型哺乳動物肉孢子蟲包囊的光鏡和電鏡形態(tài)
            3.1.1 黃毛鼠肉孢子蟲新種(S.losea n.sp.)
            3.1.2 西姆里肉孢子蟲(S.cymruensis)
            3.1.3 社鼠肉孢子蟲新種(S. confucianus n.sp.)
            3.1.4 左氏肉孢子蟲(S.zuoi)
            3.1.5 齊氏肉孢子蟲新種(S.chevieri n.sp.)
            3.1.6 絨鼠肉孢子蟲(S.eothenomysi)
            3.1.7 (?)肉孢子蟲(S.clethrionomyelaphis)
            3.1.8 灰麝鼩肉孢子蟲新種(S.attenuata n.sp.)
        3.2 部分野生小型哺乳動物肉孢子蟲的18S rDNA序列分析
        3.3 部分野生小型哺乳動物肉孢子蟲的線粒體COX1基因序列分析
        3.4 部分野生小型哺乳動物肉孢子蟲的18S rDNA和線粒體COX1基因序列的遺傳距離分析
        3.5 部分野生小型哺乳動物肉孢子蟲的18S rDNA和線粒體COX1基因序列的分子系統(tǒng)學分析
            3.5.1 部分野生小型哺乳動物肉孢子蟲的18S rDNA序列分子系統(tǒng)學分析
            3.5.2 部分野生小型哺乳動物肉孢子蟲的線粒體COX1基因序列分子系統(tǒng)學分析
    4 討論
    5 結(jié)論
    參考文獻
第三章 犬肌肉肉孢子蟲的形態(tài)學和分子標記特征
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 家犬肌肉的收集
        2.2 犬的肉孢子蟲包囊的光鏡觀察
        2.3 制備犬的肉孢子蟲包囊的透射電鏡材料及觀察
        2.4 實驗所需試劑和實驗儀器
            2.4.1 包囊DNA提取所需試劑
            2.4.2 PCR擴增及檢測電泳試劑
            2.4.3 分子生物學實驗所需試劑
            2.4.4 實驗所需主要儀器設備
        2.5 分子實驗方法
            2.5.1 包囊DNA提取
            2.5.2 基因的PCR擴增
            2.5.3 PCR產(chǎn)物的純化與回收
            2.5.4 目的片段的連接與轉(zhuǎn)化
            2.5.5 陽性質(zhì)粒DNA的PCR鑒定
            2.5.6 DNA測序
    3 實驗結(jié)果
        3.1 犬肉孢子蟲(S caninum)的包囊形態(tài)
        3.2 犬肉孢子蟲(S.caninum)的18S rDNA序列分析
        3.3 犬肉孢子蟲(S.caninum)的28S rDNA序列分析
        3.4 犬肉孢子蟲(S. caninum)的線粒體COX1基因序列分析
        3.5 犬肉孢子蟲(S. caninum)的ITS-1基因序列分析
        3.6 犬肉孢子蟲(S. caninum)的RpoB基因序列分析
        3.7 犬肉孢子蟲(S. caninum)的18S rDNA、28S rDNA、線粒體COX1、ITS-1和RpoB基因序列的分子系統(tǒng)學分析
            3.7.1 犬肉孢子蟲(S. caninum)的18S rDNA序列的分子系統(tǒng)學分析
            3.7.2 犬肉孢子蟲(S.caninum)的28S rDNA序列的分子系統(tǒng)學分析
            3.7.3 犬肉孢子蟲(S. caninum)的線粒體COX1基因序列的分子系統(tǒng)學分析
            3.7.4 犬肉孢子蟲(S.caninum)的ITS-1基因序列的分子系統(tǒng)學分析
            3.7.5 犬肉孢子蟲(S. caninum)的RpoB基因序列的分子系統(tǒng)學分析
    4 討論
    5 結(jié)論
    參考文獻
攻讀碩士學位期間完成的科研成果
致謝



本文編號：4039465