胎盤作為一種暫時性的營養(yǎng)器官,負責了胚胎植入后發(fā)育過程中所需一切營養(yǎng)物質(zhì)的供給。因此,胎盤功能若出現(xiàn)異常將嚴重影響胚胎發(fā)育進程甚至造成妊娠失敗。滋養(yǎng)層干細胞(trophoblast stem cell,TSC)作為胎盤滋養(yǎng)層的前體細胞,具有在體外分化形成所有胎盤滋養(yǎng)層細胞的能力。因此,滋養(yǎng)層干細胞是研究滋養(yǎng)外胚層分化、滋養(yǎng)層細胞譜系確立以及胎盤形成的有力細胞模型,而在體外建立性質(zhì)穩(wěn)定且擁有較強自我更新能力的滋養(yǎng)層干細胞系將是開啟胎盤研究的基礎和關鍵環(huán)節(jié)。2i培養(yǎng)體系因包含PD0325901和CHIR99021兩種抑制劑分子而得名,前者是MEK/ERK信號通路抑制劑,而后者為GSK-3β抑制劑。該體系最初被報道用于小鼠和大鼠胚胎干細胞(embryonic stem cell,ESC)的體外培養(yǎng),利用2i培養(yǎng)體系結(jié)合持續(xù)分泌Wnt3a蛋白的L細胞與小鼠胎兒成纖維細胞(mouse embryonic fibroblast,MEF)作為混合飼養(yǎng)層我們成功建立牛TSC細胞系(BTS-1),為了深入探究Wnt3a及其對應WNT信號通路在牛TSC體外建系中的作用,我們進行了以下研究:1.不同培養(yǎng)體系...

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【學位級別】：博士

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圖1小鼠胚胎發(fā)育及TSC微環(huán)境示意圖

16圖1小鼠胚胎發(fā)育及TSC微環(huán)境示意圖該圖基于文獻[25]圖4繪制。Fig.1MouseembryodevelopmentandnichesofTSCs

圖2小鼠TSC類型及其集落的不同形態(tài)

型集落；（B）Ⅱ型集落；（C）Ⅲ型集落，箭頭所示區(qū)域為集落中松散的堆疊）Ⅳ型集落，黑色箭頭所示區(qū)域為堆疊狀細胞團簇，白色箭頭所示為小鼠；（E）尺寸較小的小鼠TSC，箭頭所示為細胞表面的胞質(zhì)突起結(jié)構；（F）TSC，白色箭頭所示為細胞核，黑色箭頭所示為核仁。（A-D）中虛線框內(nèi)....

圖1.1體外受精牛囊胚

40圖1.1體外受精牛囊胚體外受精后第7-8d的擴張囊胚形態(tài)，ICM清晰可見。標尺，200μmFig.1.1Invitrofertilizationblastocysts

圖1.2不同培養(yǎng)體系下囊胚來源細胞集落形態(tài)

44圖1.2不同培養(yǎng)體系下囊胚來源細胞集落形態(tài)Fig.1.2Thecolonymorphologyofcellsderivedfromblastocystsindifferentculturesystems

本文編號：3910704