血吸蟲(chóng)需要雌雄蟲(chóng)配對(duì)和合抱以完成其發(fā)育成熟和產(chǎn)卵,并且成熟后血吸蟲(chóng)所產(chǎn)的產(chǎn)卵是造成宿主病理?yè)p傷的主要原因。因此,揭示參與血吸蟲(chóng)生殖發(fā)育相關(guān)的信號(hào)調(diào)控通路對(duì)開(kāi)發(fā)新的防控策略具有重要意義。我們實(shí)驗(yàn)室前期通過(guò)磷酸化蛋白質(zhì)組學(xué)研究發(fā)現(xiàn)Sjp38MAPK在日本血吸蟲(chóng)信號(hào)通路網(wǎng)絡(luò)中是關(guān)鍵節(jié)點(diǎn)之一,為了闡明Sjp38MAPK在日本血吸蟲(chóng)的寄生和生殖發(fā)育過(guò)程中的作用,本研究對(duì)日本血吸蟲(chóng)Sjp38MAPK基因編碼的cDNA進(jìn)行了克隆,并對(duì)重組蛋白進(jìn)行了表達(dá)及鑒定。另外,還對(duì)Sjp38MAPK在日本血吸蟲(chóng)不同發(fā)育階段、雌雄蟲(chóng)的轉(zhuǎn)錄水平進(jìn)行了分析。利用RNA干擾技術(shù),抑制了Sjp38MAPK基因的轉(zhuǎn)錄,對(duì)Sjp38MAPK在日本血吸蟲(chóng)的生殖和發(fā)育中的功能進(jìn)行了初步研究。具體包括以下三個(gè)內(nèi)容:(一)日本血吸蟲(chóng)Sjp38MAPK基因編碼cDNA的克隆表達(dá)及生物信息學(xué)分析根據(jù)實(shí)驗(yàn)室前期蛋白質(zhì)組學(xué)鑒定的Sjp38MAPK,設(shè)計(jì)引物,進(jìn)行PCR擴(kuò)增,序列分析表明該基因序列包含一個(gè)1038bp的開(kāi)放閱讀框,編碼Sjp38MAPK蛋白,預(yù)測(cè)分子量為39.58kD。生物信息學(xué)分析表明Sjp38MAPK序列與曼氏血吸蟲(chóng)的同源...

【文章頁(yè)數(shù)】：50 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
英文縮略表
第一章 引言
    1.1 血吸蟲(chóng)及血吸蟲(chóng)病概況
    1.2 MAPK信號(hào)通路的研究進(jìn)展
        1.2.1 MAPK信號(hào)通路概述
        1.2.2 MAPK信號(hào)通路在血吸蟲(chóng)生殖細(xì)胞中的研究進(jìn)展
        1.2.3 p38MAPK研究進(jìn)展
    1.3 RNAi技術(shù)在血吸蟲(chóng)中的應(yīng)用
第二章 日本血吸蟲(chóng)Sjp38MAPK克隆、重組蛋白表達(dá)及鑒定
    2.1 材料和方法
        2.1.1 材料
        2.1.2 方法
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 生物信息學(xué)分析Sjp38MAPK序列
        2.2.2 重組質(zhì)粒的構(gòu)建
        2.2.3 表達(dá)、純化和鑒定重組蛋白Sjp38MAPK
    2.3 討論
第三章 Sjp38MAPK在日本血吸蟲(chóng)中的表達(dá)分析
    3.1 材料和方法
        3.1.1 材料
        3.1.2 方法
    3.2 結(jié)果
        3.2.1 日本血吸蟲(chóng)Sjp38MAPK在不同生長(zhǎng)發(fā)育時(shí)期的表達(dá)
        3.2.2 日本血吸蟲(chóng)Sjp38MAPK在雌雄蟲(chóng)中的表達(dá)
    3.3 討論
第四章 日本血吸蟲(chóng)Sjp38MAPK的體外干擾
    4.1 材料和方法
        4.1.1 材料
        4.1.2 方法
    4.2 結(jié)果
        4.2.1 篩選日本血吸蟲(chóng)Sjp38MAPK的干擾siRNA
        4.2.2 siRNA-977 干擾日本血吸蟲(chóng)Sjp38MAPK對(duì)其卵殼蛋白的影響
        4.2.3 siRNA-977 干擾日本血吸蟲(chóng)對(duì)蟲(chóng)體活性的影響
    4.3 討論
第五章 全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)介



本文編號(hào)：3835887