胞內(nèi)勞森菌IPMA抗體檢測方法的建立及豬源性胞內(nèi)勞森菌在小鼠體內(nèi)的復(fù)制
發(fā)布時(shí)間:2022-09-17 13:22
豬增生性腸炎(porcine proliferative enteritis,PPE),又叫回腸炎,發(fā)生于生長和育肥階段的豬,是一個(gè)重要的傳染性腸道疾病。它是一種傳染性腸道疾病,能引起豬生長發(fā)育阻滯,PPE由胞內(nèi)勞森菌(lawsonia intracellularis,LI)引起,主要感染部位為豬的回腸和結(jié)腸,引起這些部位粘膜的增厚,進(jìn)而造成養(yǎng)豬業(yè)料肉比下降而造成重大經(jīng)濟(jì)損失。胞內(nèi)勞森菌是由三層波狀的胞膜結(jié)構(gòu)組成,以二分裂方式在回腸上皮細(xì)胞胞漿內(nèi)復(fù)制,一般彎曲狀、逗點(diǎn)狀或S形,革蘭氏染色陰性,嚴(yán)格胞內(nèi)寄生。目前國內(nèi)對(duì)胞內(nèi)勞森菌臨床感染情況的相關(guān)研究報(bào)道不多,有必要對(duì)LI引發(fā)的PPE進(jìn)行進(jìn)一步研究,F(xiàn)將本文研究內(nèi)容簡述如下:1胞內(nèi)勞森菌IPMA抗體檢測方法的建立及應(yīng)用本試驗(yàn)探索并建立了胞內(nèi)勞森菌IPMA抗體檢測方法,摸索了該方法的最佳HRP-Protein A工作濃度為1:2000,最佳孵育時(shí)間為1h,底物顯色最佳時(shí)間為15mmin。該方法特異性好、敏感性強(qiáng)、操作流程方便,適用于胞內(nèi)勞森菌抗體的檢測。為LI疫苗免疫效果的評(píng)價(jià)、流行病學(xué)調(diào)查及相關(guān)檢疫提供了一種技術(shù)手段。2上海地區(qū)規(guī);B(yǎng)豬...
【文章頁數(shù)】:53 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
符號(hào)說明
第一篇 文獻(xiàn)綜述
第一章 胞內(nèi)勞森菌研究進(jìn)展
1 胞內(nèi)勞森菌
1.1 胞內(nèi)勞森菌的形態(tài)、分類與生長特性
1.2 胞內(nèi)勞森菌的致病性與致病機(jī)理
2 豬增生性腸炎
2.1 豬增生性腸炎的流行病學(xué)
2.2 豬增生性腸炎的診斷與防控
3 免疫過氧化物酶單層試驗(yàn)(IPMA)方法簡介
4 總結(jié)與展望
參考文獻(xiàn)
第二篇 試驗(yàn)研究
第二章 胞內(nèi)勞森菌IPMA抗體檢測方法的建立
摘要
Abstract
1 材料與試劑
2 方法與步驟
2.1 胞內(nèi)勞森菌IPMA抗體檢測方法的建立
2.2 IPMA的特異性、敏感性、重復(fù)性試驗(yàn)
3 結(jié)果
3.1 IPMA反應(yīng)條件的確定
3.2 IPMA特異性、敏感性、重復(fù)性試驗(yàn)
4 討論
參考文獻(xiàn)
第三章 上海地區(qū)規(guī);B(yǎng)豬場PPE感染情況初探
摘要
Abstract
1 材料與儀器
1.1 標(biāo)準(zhǔn)菌株及檢測樣本
1.2 主要試劑
1.3 主要儀器設(shè)備
1.4 引物設(shè)計(jì)、合成及稀釋
2 材料與方法
2.1 方法步驟
3 結(jié)果
4 討論
參考文獻(xiàn)
第四章 豬源性胞內(nèi)勞森菌在小鼠體內(nèi)的復(fù)制
摘要
Abstract
1 材料與試劑
1.1 試驗(yàn)材料
1.2 試驗(yàn)動(dòng)物
1.3 主要試劑及配方
1.4 主要儀器及設(shè)備
2 方法與步驟
2.1 試驗(yàn)動(dòng)物的分組
2.2 病料的處理及接種方式
2.3 飼養(yǎng)與數(shù)據(jù)采集
2.4 樣本核酸的提取
2.5 胞內(nèi)勞森菌常規(guī)PCR方法
2.6 免疫熒光檢測
3 結(jié)果與分析
4 小結(jié)與討論
參考文獻(xiàn)
全文總結(jié)
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]豬增生性腸炎的研究現(xiàn)狀[J]. 陳彤,黃仁美. 福建畜牧獸醫(yī). 2010(03)
[2]豬胞內(nèi)勞森菌16SrRNA基因的克隆及序列分析[J]. 謝麗華,張寧,何蘋萍,李茂寧,尹業(yè)師,韋英益,肖愛歡,黃偉堅(jiān). 中國獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2009(08)
[3]豬增生性腸炎模型的建立及其病理學(xué)研究[J]. 韋英益,肖愛歡,謝麗華,楊乃歡,黃偉堅(jiān),王進(jìn)聲. 黑龍江畜牧獸醫(yī). 2009(15)
[4]國外豬增生性腸炎診斷方法研究進(jìn)展[J]. 唐娜,沈志強(qiáng),管宇,王金良. 養(yǎng)豬. 2009(03)
[5]豬增生性腸病的流行病學(xué)及防控[J]. 余華,陳世界,嚴(yán)玉寶,胡娟. 獸醫(yī)導(dǎo)刊. 2008(11)
[6]胞內(nèi)勞森菌與豬增生性腸炎的研究進(jìn)展[J]. 王元?jiǎng)P,嚴(yán)亞賢. 中國獸醫(yī)科學(xué). 2008(06)
[7]上海地區(qū)豬增生性腸炎的血清學(xué)調(diào)查[J]. 劉佩紅,王建,沈莉萍,徐鋒,趙洪進(jìn). 動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2007(09)
[8]PRRSV-IPMA抗體檢測試劑盒的研制及其應(yīng)用[J]. 譚斌,劉長明,危艷武,張超范,劉永剛,冉多良. 中國獸醫(yī)科學(xué). 2006(11)
[9]華南五省區(qū)豬增生性腸炎的血清學(xué)調(diào)查[J]. 黃忠,宋長緒,王浩文,方樹河. 中國獸醫(yī)科學(xué). 2006(09)
本文編號(hào):3679302
【文章頁數(shù)】:53 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
符號(hào)說明
第一篇 文獻(xiàn)綜述
第一章 胞內(nèi)勞森菌研究進(jìn)展
1 胞內(nèi)勞森菌
1.1 胞內(nèi)勞森菌的形態(tài)、分類與生長特性
1.2 胞內(nèi)勞森菌的致病性與致病機(jī)理
2 豬增生性腸炎
2.1 豬增生性腸炎的流行病學(xué)
2.2 豬增生性腸炎的診斷與防控
3 免疫過氧化物酶單層試驗(yàn)(IPMA)方法簡介
4 總結(jié)與展望
參考文獻(xiàn)
第二篇 試驗(yàn)研究
第二章 胞內(nèi)勞森菌IPMA抗體檢測方法的建立
摘要
Abstract
1 材料與試劑
2 方法與步驟
2.1 胞內(nèi)勞森菌IPMA抗體檢測方法的建立
2.2 IPMA的特異性、敏感性、重復(fù)性試驗(yàn)
3 結(jié)果
3.1 IPMA反應(yīng)條件的確定
3.2 IPMA特異性、敏感性、重復(fù)性試驗(yàn)
4 討論
參考文獻(xiàn)
第三章 上海地區(qū)規(guī);B(yǎng)豬場PPE感染情況初探
摘要
Abstract
1 材料與儀器
1.1 標(biāo)準(zhǔn)菌株及檢測樣本
1.2 主要試劑
1.3 主要儀器設(shè)備
1.4 引物設(shè)計(jì)、合成及稀釋
2 材料與方法
2.1 方法步驟
3 結(jié)果
4 討論
參考文獻(xiàn)
第四章 豬源性胞內(nèi)勞森菌在小鼠體內(nèi)的復(fù)制
摘要
Abstract
1 材料與試劑
1.1 試驗(yàn)材料
1.2 試驗(yàn)動(dòng)物
1.3 主要試劑及配方
1.4 主要儀器及設(shè)備
2 方法與步驟
2.1 試驗(yàn)動(dòng)物的分組
2.2 病料的處理及接種方式
2.3 飼養(yǎng)與數(shù)據(jù)采集
2.4 樣本核酸的提取
2.5 胞內(nèi)勞森菌常規(guī)PCR方法
2.6 免疫熒光檢測
3 結(jié)果與分析
4 小結(jié)與討論
參考文獻(xiàn)
全文總結(jié)
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]豬增生性腸炎的研究現(xiàn)狀[J]. 陳彤,黃仁美. 福建畜牧獸醫(yī). 2010(03)
[2]豬胞內(nèi)勞森菌16SrRNA基因的克隆及序列分析[J]. 謝麗華,張寧,何蘋萍,李茂寧,尹業(yè)師,韋英益,肖愛歡,黃偉堅(jiān). 中國獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2009(08)
[3]豬增生性腸炎模型的建立及其病理學(xué)研究[J]. 韋英益,肖愛歡,謝麗華,楊乃歡,黃偉堅(jiān),王進(jìn)聲. 黑龍江畜牧獸醫(yī). 2009(15)
[4]國外豬增生性腸炎診斷方法研究進(jìn)展[J]. 唐娜,沈志強(qiáng),管宇,王金良. 養(yǎng)豬. 2009(03)
[5]豬增生性腸病的流行病學(xué)及防控[J]. 余華,陳世界,嚴(yán)玉寶,胡娟. 獸醫(yī)導(dǎo)刊. 2008(11)
[6]胞內(nèi)勞森菌與豬增生性腸炎的研究進(jìn)展[J]. 王元?jiǎng)P,嚴(yán)亞賢. 中國獸醫(yī)科學(xué). 2008(06)
[7]上海地區(qū)豬增生性腸炎的血清學(xué)調(diào)查[J]. 劉佩紅,王建,沈莉萍,徐鋒,趙洪進(jìn). 動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2007(09)
[8]PRRSV-IPMA抗體檢測試劑盒的研制及其應(yīng)用[J]. 譚斌,劉長明,危艷武,張超范,劉永剛,冉多良. 中國獸醫(yī)科學(xué). 2006(11)
[9]華南五省區(qū)豬增生性腸炎的血清學(xué)調(diào)查[J]. 黃忠,宋長緒,王浩文,方樹河. 中國獸醫(yī)科學(xué). 2006(09)
本文編號(hào):3679302
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