牛分子標記輔助育種的前提是找到對生長性狀有顯著影響的基因或分子標記。翼螺旋轉(zhuǎn)錄因子FOXA2是調(diào)節(jié)組織發(fā)育、胰腺分泌、糖脂代謝及脂肪分化的重要轉(zhuǎn)錄因子。目前，尚未見該基因在牛上的研究報道。因此，本試驗利用熒光定量PCR首先在mRNA水平上考察了不同發(fā)育階段的秦川牛和不同營養(yǎng)水平肥育的中國荷斯坦牛FOXA2基因的組織表達規(guī)律，探索FOXA2基因?qū)εＩL發(fā)育的影響，再利用DNA池測序和PCR-RFLP等方法在群體水平上研究了FOXA2基因在秦川牛、南陽牛、郟縣紅牛、德南牛和夏郟牛中的遺傳變異，并分析了該基因4個多態(tài)位點的遺傳多樣性及其與5個黃牛群體的生長性狀之間的關(guān)聯(lián)性，以期發(fā)現(xiàn)對黃牛生長發(fā)育影響顯著的分子標記，為今后黃牛分子標記輔助選擇、培育優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)的新品系提供科學依據(jù)。本研究獲得以下結(jié)果：（1）秦川牛FOXA2基因在不同發(fā)育階段的組織表達譜分析FOXA2基因在秦川牛3個發(fā)育階段（胎牛、新生犢牛、成年牛）9個組織中的相對定量結(jié)果顯示，F(xiàn)OXA2的表達受組織特異性和時間特異性的影響。FOXA2基因在同一時期各組織間差異表達，在三個時期的肝臟中其表達量均很高，在胎牛和犢牛的肺臟中表達豐度最高... 

【文章來源】：西北農(nóng)林科技大學陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：88 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

組織總RNA瓊脂糖電泳圖

圖 2-1 組織總 RNA 瓊脂糖電泳圖Fig. 2-1 The electrophoresis result of total RNA in tissues注：M 代表 marker 2000，1,2,3 代表 RNA 泳道。Note: M represents marker 2000, 1,2,3 represents RNA lanes.2.2.2 cDNA 質(zhì)量及 qRT-PCR 引物特異性檢測結(jié)果以反轉(zhuǎn)錄所得 cDNA 為模板，以跨外顯子的引物擴增持家基因 GAPDH，經(jīng) 1%瓊脂糖凝膠電泳檢測結(jié)果如圖 2-2a，僅出現(xiàn)一條 145 bp 的目的片段，與預(yù)期結(jié)果一致，說明 cDNA 沒有受到基因組 DNA 的污染；經(jīng) qRT-PCR 結(jié)果顯示的溶解曲線峰圖 2-2b顯示，目的基因 FOXA2 和內(nèi)參基因 GAPDH 的溶解曲線各均只出現(xiàn)了一個單峰，表明引物特異性好，可進行下一步試驗。

2.2.3 FOXA2 基因在秦川牛中的組織表達譜2.2.3.1 秦川牛 FOXA2 基因在胎牛時期的組織表達譜秦川牛胎牛時期的 8 個不同組織中 FOXA2 基因的相對表達量結(jié)果如圖 2-3 所示，在所檢測的組織中，肺臟的 FOXA2 基因表達豐度最高（P<0.01），且肝臟和肺臟兩個組織的 FOXA2 基因表達量均極顯著高于其他組織（P<0.01），胃和小腸中也表達，脾臟、腎臟和肌肉低量表達或不表達，提示 FOXA2 基因可能在秦川牛胚胎時期與肺臟和肝臟發(fā)育緊密相關(guān)。

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號：3492543