禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖�。╮eticuloendotheliosis, RE）是繼雞馬立克氏病、雞淋巴細(xì)胞白血病之后的第三種病毒性腫瘤病。微衛(wèi)星不穩(wěn)定性（microsatellite instability, MSI）廣泛地應(yīng)用于人類腫瘤病的檢測(cè)。目前未見有應(yīng)用微衛(wèi)星技術(shù)研究禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖病病毒（reticuloendotheliosis virus, REV）感染雞胚成纖維細(xì)胞后引起宿主基因組變化的報(bào)道。本試驗(yàn)將REV感染雞胚成纖維細(xì)胞后,檢測(cè)雞染色體上微衛(wèi)星不穩(wěn)定性,旨在發(fā)現(xiàn)禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖病病毒感染雞胚成纖維細(xì)胞后是否引起宿主基因組的改變,為此病的早期診斷及腫瘤的分子發(fā)病機(jī)制提供線索。本試驗(yàn)中應(yīng)用22個(gè)SPF雞胚培養(yǎng)雞胚成纖維細(xì)胞,將每個(gè)雞胚的細(xì)胞分成兩部分,一半細(xì)胞接種REV,另一半作為對(duì)照,獲得含試驗(yàn)和對(duì)照的22組樣本,提取細(xì)胞的基因組DNA。選取雞1、2、3號(hào)染色體上135個(gè)微衛(wèi)星標(biāo)記,分別采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)、12%變性聚丙烯酰胺凝膠電泳、銀染等技術(shù)檢測(cè)基因組微衛(wèi)星不穩(wěn)定性。試驗(yàn)結(jié)果統(tǒng)計(jì)顯示135個(gè)微衛(wèi)星標(biāo)記,有106個(gè)位點(diǎn)發(fā)生不同百分率的MSI,占全部微衛(wèi)星標(biāo)記的78.... 

【文章來源】：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：89 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
目錄
摘要
ABSTRACT
文中所引部分縮略語
前言
上篇 文獻(xiàn)綜述
    第一章 禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖病綜述
        1 病原
            1.1 病毒的分類
            1.2 病毒的理化特性
        2 病毒的復(fù)制
        3 流行病學(xué)
            3.1 分布
            3.2 宿主
            3.3 感染途徑和傳播方式
        4 發(fā)病機(jī)制
            4.1 急性網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞腫瘤的形成
            4.2 矮小綜合癥
            4.3 慢性腫瘤的形成
        5 臨床癥狀和病理變化
            5.1 急性網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞增生
            5.2 矮小綜合征
            5.3 慢性腫瘤的形成
        6 診斷
            6.1 病毒分離法
            6.2 間接免疫熒光試驗(yàn)(IFA)
            6.3 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)
            6.4 PCR方法
        7 防治措施
            7.1 疫苗
            7.2 治療
            7.3 預(yù)防和控制措施
        8 小結(jié)
        參考文獻(xiàn)
    第二章 微衛(wèi)星不穩(wěn)定性及其在腫瘤上的研究
        1 微衛(wèi)星不穩(wěn)定性
            1.1 微衛(wèi)星不穩(wěn)定性產(chǎn)生的機(jī)制
            1.2 微衛(wèi)星不穩(wěn)定性的檢測(cè)方法
            1.3 微衛(wèi)星不穩(wěn)定性的腫瘤發(fā)生機(jī)制
        2 微衛(wèi)星不穩(wěn)定性在腫瘤學(xué)上的應(yīng)用研究
            2.1 人醫(yī)臨床中微衛(wèi)星不穩(wěn)定性在腫瘤中的發(fā)現(xiàn)
            2.2 禽腫瘤病微衛(wèi)星不穩(wěn)定性的研究
        參考文獻(xiàn)
下篇 試驗(yàn)研究
    第三章 雞胚成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)及REV病毒感染
        摘要
        1 材料與方法
            1.1 材料
            1.2 方法
        2 結(jié)果
            2.1 細(xì)胞培養(yǎng)的結(jié)果
            2.3 PCR檢測(cè)結(jié)果
        3 討論
            3.1 關(guān)于REV增殖
            3.2 PCR檢測(cè)方法的選擇
            3.3 env基因的擴(kuò)增
            3.4 病毒的純化和負(fù)染
        參考文獻(xiàn)
        Abstract
    第四章 CEF感染REV后部分染色體MSI的研究
        摘要
        1 材料與方法
            1.1 材料
            1.2 方法
        2 結(jié)果與分析
            2.1 部分微衛(wèi)星變性聚丙烯酰酰胺凝膠電泳結(jié)果
            2.2 不同位點(diǎn)微衛(wèi)星不穩(wěn)定性統(tǒng)計(jì)結(jié)果
            2.3 不同樣品微衛(wèi)星不穩(wěn)定性統(tǒng)計(jì)結(jié)果
            2.4 發(fā)生MSI的位點(diǎn)的序列比對(duì)結(jié)果
        3 討論
            3.1 MSI的發(fā)生
            3.2 微衛(wèi)星不穩(wěn)定性發(fā)生率與位點(diǎn)有關(guān)
            3.3 1,2,3號(hào)染色體上MSI的特點(diǎn)及其其臨床病理學(xué)意義
        4 小結(jié)
        參考文獻(xiàn)
        ABSTRACT
全文總結(jié)
創(chuàng)新之處
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表論文
附錄
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]禽網(wǎng)狀內(nèi)皮增生病毒囊膜基因gp90的克隆表達(dá)及ELISA方法的初步建立[J]. 余沖,黃勇,田明星,石敏,李敏,趙芳芳.  浙江大學(xué)學(xué)報(bào)(農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版). 2011(04)
[2]網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖病研究進(jìn)展[J]. 賀帥.  上海畜牧獸醫(yī)通訊. 2010(04)
[3]錯(cuò)配修復(fù)和微衛(wèi)星不穩(wěn)定性與食管癌的關(guān)系[J]. 李斌,袁寧.  中國(guó)醫(yī)藥指南. 2010(19)
[4]雞胚成纖維細(xì)胞感染馬立克氏病病毒后部分染色體上微衛(wèi)星不穩(wěn)定性研究[J]. 高喜梅,邱燕,韓濤,姚剛,楊德吉.  新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2009(01)
[5]CAV與REV共感染SPF雞對(duì)疫苗免疫反應(yīng)的抑制作用[J]. 李延鵬,崔治中,姜世金,郭慧君.  中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2008(11)
[6]微衛(wèi)星DNA檢測(cè)方法的研究[J]. 杜爽,仇雪梅.  生物技術(shù)通報(bào). 2008(03)
[7]禽腫瘤性疾病世界流行現(xiàn)狀及分析[J]. 張洪海,成子強(qiáng).  中國(guó)家禽. 2007(17)
[8]鴨瘟病毒提純方法比較[J]. 文明,程安春,汪銘書,吳彤.  山地農(nóng)業(yè)生物學(xué)報(bào). 2006(02)
[9]微衛(wèi)星不穩(wěn)定性與惡性腫瘤[J]. 周尊強(qiáng),趙金鵬.  國(guó)際遺傳學(xué)雜志. 2006(01)
[10]含有禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生病病毒基因組片段的天然重組禽痘病毒的研究[J]. 丁家波,崔治中,于立娟,孫淑紅,姜世金.  微生物學(xué)報(bào). 2004(05)

博士論文
[1]禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖病病毒檢測(cè)及其動(dòng)物感染模型的建立[D]. 翟新驗(yàn).吉林大學(xué) 2007

碩士論文
[1]CEF感染ALV-J后2、3號(hào)染色體微衛(wèi)星不穩(wěn)定性的研究[D]. 趙波.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[2]雞胚成纖維細(xì)胞感染禽白血病病毒ALV-J后1號(hào)染色體微衛(wèi)星不穩(wěn)定性研究[D]. 吳艷婷.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[3]雞馬立克腫瘤形成前宿主基因組的部分微衛(wèi)星不穩(wěn)定性研究[D]. 李尚同.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[4]馬立克腫瘤及接種火雞皰疹病毒活疫苗后的SPF雞微衛(wèi)星不穩(wěn)定性的研究[D]. 郭俊清.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
[5]馬立克氏病病毒感染雞胚成纖維細(xì)胞后4號(hào)染色上基因微衛(wèi)星不穩(wěn)定性研究[D]. 尚月麗.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007
[6]雞馬立克腫瘤發(fā)生后2號(hào)染色體微衛(wèi)星標(biāo)記變化的研究[D]. 夏繼飛.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006
[7]禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖病病毒PCR及RT-PCR檢測(cè)方法的研究和p30主要抗原域的原核表達(dá)[D]. 葛菲菲.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2003



本文編號(hào)：3475539