發(fā)布時間：2021-11-04 08:50

　　豬鏈球菌（Streptococcus Suis,S.suis）導致患病豬的腦膜炎,敗血癥以及各種化膿性炎癥,是引起公共衛(wèi)生危害的重要病原之一。按照莢膜抗原的血清學分類,目前共有35個豬鏈球菌的血清型。此外還存在不能定型或者不屬于現(xiàn)有血清型的菌株。1.仔豬腦膜炎新型豬鏈球菌分離株的鑒定和毒力分析2013年3月至5月,江蘇某豬場大量斷奶仔豬患病死亡。發(fā)病率達35%,死亡率為90%�；疾游锉憩F(xiàn)出共濟失調、轉圈、頭部震顫等明顯的腦膜炎癥狀。剖檢9只瀕臨死亡的病豬發(fā)現(xiàn),腦部均有不同程度的水腫和點狀出血。從仔豬腦組織中分離培養(yǎng)獲得一株細菌,命名為CZ130302。通過生化鑒定,結合16S rRNA基因和谷氨酸脫氫酶基因（gdh）的測序鑒定,確定該細菌（CZ130302）為豬鏈球菌。電鏡觀察CZ130302株有莢膜結構,與參考血清的凝集試驗和多重PCR分型鑒定方法進一步確定該分離株不屬于現(xiàn)有的任一血清型。制備豬鏈球菌CZ130302菌株的高免血清。該血清與現(xiàn)有的35個血清型菌株進行凝集反應試驗,結果均為陰性。150只BALB/c小鼠隨機分為15組,測定CZ130302的半數(shù)致死量（LD5o）為2.... 

【文章來源】：南京農業(yè)大學江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：100 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮略詞
第一章 豬鏈球菌的鑒定分型研究進展
    1 生化鑒定
    2 血清學分型
    3 分子生物學分型技術
        3.1 多重PCR技術(Mulitiplex PCR)
        3.2 多位點序列分型(MLST)技術
        3.3 利用看家基因對豬鏈球菌的鑒定和分群
        3.4 多位點酶電泳法(MEE)技術
        3.5 限制性內切酶圖譜分析法(REA)
        3.6 脈沖凝膠電泳(PFGE)分型
        3.7 隨機擴增核酸片段多態(tài)性分析(RAPD)
        3.8 基于EF等毒力因子的分型
        3.9 核糖體酶切分型(Ribotyping)
    參考文獻
第二篇 實驗研究
    第二章 仔豬腦膜炎新型分離株的鑒定
        摘要
        1 材料和方法
            1.1 病原的檢測和分離
            1.2 菌株、質粒和培養(yǎng)條件
            1.3 病毒的檢測
            1.4 細菌的培養(yǎng)特性分析
            1.5 血清凝集試驗
            1.6 多重PCR(Multiplex PCR)反應
            1.7 毒力表型鑒定
            1.8 BALB/c小鼠攻毒試驗
            1.9 細胞黏附試驗
            1.10 CZ130302抗血清的制備
        2 結果
            2.1 病原的鑒定
            2.2 血清凝集試驗
            2.3 PCR反應
            2.4 毒力表型鑒定
            2.5 BALB/c小鼠攻毒試驗
            2.6 小鼠攻毒臟器分布試驗
            2.7 細胞黏附試驗
        3 討論
        參考文獻
        ABSTRACT
    第三章 CZ130302株基因組分析及PCR定型方法的建立
        摘要
        1 材料和方法
            1.1 基因組測序
            1.2 CPS基因的補洞和拼接
            1.3 ORF分析與BPGN命名
            1.4 序列比較與進化分析
            1.5 cpn60、recN和sodA的進化樹分析
            1.6 MLST分型
            1.7 CPS合成聚合酶以及翻轉酶等基因分析
            1.8 CPS HGs的比對
            1.9 PCR分型方法的建立
            1.10 未定型菌株的定型篩選
            1.11 新定型菌株的生物學特性分析
        2 結果
            2.1 CPS的測序結果
            2.2 CPS HGs分析
            2.3 MLST分型
            2.4 HGs的比對結果
            2.5 cpn60、recN和sodA的進化樹分析
            2.6 CPS的合成途徑聚合酶以及翻轉酶等基因分析
            2.7 新血清型PCR檢測方法的建立
            2.8 新型檢測方法的建立
            2.9 新型菌株毒力因子的檢測
            2.10 新型菌株半數(shù)致死量的測定
            2.11 莢膜電鏡
            2.12 細胞黏附試驗
        3 討論
        參考文獻
        ABSTRACT
全文總結
致謝
博士在讀期間發(fā)表的論文


【參考文獻】：
期刊論文
[1]豬鏈球菌2型感染實驗動物模型的研究進展[J]. 宋潔,黎庶.  微生物學免疫學進展. 2010(03)
[2]體內表達新基因trag在豬鏈球菌的分布及其免疫反應性分析[J]. 祝昊丹,顧宏偉,陸承平.  微生物學報. 2008(12)
[3]豬鏈球菌35個血清型標準抗血清的制備及應用[J]. 姜艷華,孫乾,王楷宬,黃保續(xù),辛長衛(wèi),姜平,范偉興.  中國動物檢疫. 2008(09)
[4]用斑馬魚檢測豬鏈球菌2型的致病力[J]. 濮俊毅,黃新新,陸承平.  中國農業(yè)科學. 2007(11)
[5]豬鏈球菌1998分離株病原特性鑒定[J]. 姚火春,陳國強,陸承平.  南京農業(yè)大學學報. 1999(02)



本文編號：3475404