胰蛋白酶在臨床上主要用于抗炎消腫以及改善炎癥部位在內的全身性血液循環(huán),有益于緩解藥物的吸收。糜蛋白酶可將炎癥部位纖維蛋白的凝結物分解,從而加快傷口愈合。胰蛋白酶和糜蛋白酶都有分解蛋白質功能,兩者同時作用可將蛋白質分解為小分子的多肽以及氨基酸。同時胰蛋白酶和糜蛋白酶組成的混合酶對引起奶牛乳房炎的主要革蘭氏陽性菌金黃色葡萄球菌等都有比較明顯的抑菌效果,這兩種酶均可用于奶牛乳房炎的治療。因此,有必要在血清和牛奶中建立胰蛋白酶和糜蛋白酶的檢測方法,以便于臨床藥代動力學的研究。胰蛋白酶和糜蛋白酶可將底物分解為對硝基苯胺（p-NA）,p-NA在405 nm波長下有吸收,因此通過檢測檢測底物的消光值,計算得出酶活。為了提高復合酶在血清和牛奶中檢出的敏感性和準確性,本試驗在現有胰蛋白酶在奶牛血清和牛奶中活性檢測方法的基礎上進行了改良。經過改良的檢測方法結果顯示,在0～0.4 nmol/μL范圍內,胰蛋白酶的吸光度值與濃度呈現良好的線性關系,回歸方程Y=0.023X-0.0038,R²= 0.9996;以信噪比S/N = 3為標準,在血清中最低檢測限濃度為15 ng/mL,平均回收... 

【文章來源】：南京農業(yè)大學江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數】：65 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮略符號
上篇 文獻綜述
    引言
    第一章 胰蛋白酶、糜蛋白酶及復合酶制劑研究進展
        1 胰蛋白酶的研究進展
            1.1 胰蛋白酶的化學組成與性質
            1.2 胰蛋白酶的生產工藝
                1.2.1 浸取
                1.2.2 分級鹽析、結晶
                1.2.3 溶解、分級鹽析
                1.2.4 活化
                1.2.5 除鈣、鹽析、透析、凍干
            1.3 胰蛋白酶的藥理作用
            1.4 胰蛋白酶的毒性
            1.5 胰蛋白酶的臨床應用
        2 糜蛋白酶的研究進展
            2.1 糜蛋白酶的化學組成與性質
            2.2 糜蛋白酶的生產工藝
                2.2.1 絞碎、提取
                2.2.2 分級鹽析、結晶
                2.2.3 活化、鹽析、結晶
                2.2.4 透析、滅菌、干燥
            2.3 糜蛋白酶的藥理作用
            2.4 糜蛋白酶的毒性
            2.5 糜蛋白酶的臨床應用
        3 其它酶制劑在畜牧生產中的研究進展
            3.1 酶制劑在飼料中的作用
                3.1.1 直接分解營養(yǎng)物質,提高飼料的利用率
                3.1.2 補充內源酶不足,激活分泌消化功能
                3.1.3 消除抗營養(yǎng)因子,改善消化機能
                3.1.4 提高植酸磷的利用率
                3.1.5 消化道成分位點轉移
            3.2 酶制劑在畜牧業(yè)生產中的應用效果
                3.2.1 在蛋雞生產中的應用效果
                3.2.2 在肉雞生產中的應用效果
                3.2.3 在斷奶仔豬生產上的應用效果
                3.2.4 在肥育豬生產中的應用效果
                3.2.5 在奶牛中的應用效果
                3.2.6 在肉牛生產中的應用效果
                3.2.7 在養(yǎng)羊生產中的應用效果
            3.3 酶的研究目的及其意義
        4 胰蛋白酶和糜蛋白酶的檢測方法
            4.1 胰蛋白酶的檢測方法
            4.2 糜蛋白酶的檢測方法
    參考文獻
下篇 檢測方法研究
    第二章 奶牛血清和牛奶中胰蛋白酶檢測方法改良
        1 材料與方法
            1.1 主要試劑
            1.2 主要儀器設備
            1.3 胰蛋白酶活性檢測主要溶液配制
                1.3.1 p-NA標準液的配制
                1.3.2 待測樣品的制備
                1.3.3 反應(底物)混合體系制備
                1.3.4 鹽酸(pH3)的配制
        2 結果
            2.1 胰蛋白酶試劑盒檢測方法
            2.2 方法學建立
                2.2.1 標準曲線的繪制
                2.2.2 樣品檢測濃度的確定
                2.2.3 樣品的處理
                2.2.4 特異性
                2.2.5 定量限和檢測限
                2.2.6 添加回收率
                2.2.7 精密度
        3 討論
        參考文獻
    第三章 奶牛血清和牛奶中糜蛋白酶檢測方法改良
        1 材料與方法
            1.1 主要試劑
            1.2 主要儀器設備
            1.3 糜蛋白酶活性檢測主要溶液配制
                1.3.1 糜蛋白酶在血清中標準液的制備
                1.3.2 糜蛋白酶在牛奶中標準液的制備
                1.3.3 鹽酸溶液(pH3)的制備
        2 結果
            2.1 糜蛋白酶檢測方法
                2.1.1 檢測原理
                2.1.2 檢測過程
                2.1.3 計算公式
            2.2 方法學建立
                2.2.1 標準曲線的繪制
                2.2.2 樣品檢測濃度的確定
                2.2.3 樣品的處理
                2.2.4 特異性
                2.2.5 定量限和檢測限
                2.2.6 添加回收率實驗
                2.2.7 精密度
        3 討論
        參考文獻
全文總結
致謝



本文編號：3452003