研究背景:長期的寒冷和炎熱的養(yǎng)殖環(huán)境可導致家畜生產力下降。圍產期間環(huán)境溫度應激可使新生羊出生體重降低,甚至導致死亡率的升高。我們前期在重慶地區(qū)的研究表明,季節(jié)性環(huán)境冷熱因素能造成山羊新生兒體重顯著降低,死亡率增高等負面影響。低出生體重的家畜在幼年和成年都呈現(xiàn)出難以恢復的代謝紊亂,其結果是飼料利用率和肉質品質的降低等,嚴重危害畜牧生產。雖然環(huán)境熱應激的研究在羊上已較為深入,但針對冷應激在山羊生產上的研究卻并不多見;圍產期環(huán)境冷應激造成的低出生體重羔羊在其后天生長過程中代謝內分泌的影響還有待系統(tǒng)性研究。研究目標:闡釋圍產期冷熱應激對低出生體重新生羊糖穩(wěn)態(tài)的影響,并分析外周組織糖代謝調控機制的變化。研究方法:本研究采用圍產期持續(xù)處于冬季、夏季、溫和季節(jié)的重慶大足黑山羊新生羔羊,將其分成“冷應激組”、“熱應激組”和“溫和組”,檢測羔羊出生后生長勢能變化。通過對其葡萄糖耐量和胰島素耐量的檢測,探究羔羊活體水平葡萄糖及胰島素代謝調控功能。再從分子層面探索肝臟和肌肉糖代謝相關調控通路,分析其糖穩(wěn)態(tài)紊亂的機制。研究結果和結論:冷應激組和熱應激組的羔羊體重較溫和組羔羊出生體重下調了26.8%和29.8%... 

【文章來源】：西南大學重慶市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：78 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
英文縮寫詞
第1章 文獻綜述
    1.1 環(huán)境溫度應激對畜牧業(yè)的影響
    1.2 低出生體重對胰島素分泌的影響
        1.2.1 胰島素分泌調控機制
        1.2.2 低出生體重損害胰島素分泌功能
    1.3 低出生體重對外周組織糖脂穩(wěn)態(tài)的影響
        1.3.1 胰島素在外周組織的功能及調控機制
        1.3.2 低出生體重對肝臟糖穩(wěn)態(tài)的影響
        1.3.3 低出生體重對山羊肌肉糖脂穩(wěn)態(tài)的影響
    1.4 穩(wěn)態(tài)失調的危害及其研究意義
    1.5 小結
第2章 前言
第3章 羔羊生長勢能、糖耐量和胰島素耐量的測定
    3.1 實驗材料
        3.1.1 實驗動物
        3.1.2 主要儀器設備
        3.1.3 溶液配制
    3.2 實驗方法
        3.2.1 羔羊血瘺管手術
        3.2.2 葡萄糖耐量實驗(GTT)
        3.2.3 胰島素耐量實驗(ITT)
        3.2.4 脂肪酸檢測
        3.2.5 羔羊的解剖和組織保存
    3.3 實驗結果
    3.4 數(shù)據(jù)處理
        3.4.1 羔羊0~28日齡內體重變化
        3.4.2 葡萄糖耐受實驗(GTT)中羔羊血糖濃度和血漿胰島素濃度的變化
        3.4.3 胰島素耐受實驗(ITT)中羔羊血糖濃度的變化
        3.4.4 三組羔羊的HOMA-IR
        3.4.5 羔羊血漿中游離脂肪酸的濃度
        3.4.6 羔羊解剖后的臟體比
    3.5 討論
    3.6 小結
第4章 肝臟組織糖穩(wěn)態(tài)檢測
    4.1 實驗材料
        4.1.1 實驗動物
        4.1.2 主要試劑
        4.1.3 主要儀器設備
        4.1.4 溶液配制
    4.2 實驗方法
        4.2.1 用Trizol法提取組織內的RNA
        4.2.2 瓊脂糖凝膠電泳確定RNA質量
        4.2.3 引物序列合成
        4.2.4 反轉錄合成cDNA
        4.2.5 實時熒光定量PCR反應
        4.2.6 組織切片的制作和切片的HE染色
        4.2.7 蛋白免疫印跡
    4.3 數(shù)據(jù)處理
    4.4 實驗結果
        4.4.1 肝臟的脂肪異位沉積情況
        4.4.2 瓊脂糖凝膠電泳確定RNA質量
        4.4.3 胰島素近端信號和葡萄糖轉運信號的表達
        4.4.4 糖異生通路相關調控因子表達情況
        4.4.5 脂肪生成通路相關調控因子表達情況
        4.4.6 胰島素信號相關的蛋白表達情況
    4.5 討論
        4.5.1 圍產期冷應激組羔羊IRS2表達量下調
        4.5.2 圍產期冷應激組羔羊PPARγ表達量上調
        4.5.3 結論
    4.6 小結
第5章 肌肉組織糖脂穩(wěn)態(tài)檢測
    5.1 實驗材料
        5.1.1 實驗動物
        5.1.2 主要試劑
        5.1.3 溶液配制
    5.2 實驗方法
        5.2.1 轉錄組測序
        5.2.2 用Trizol法提取組織內的RNA
        5.2.3 瓊脂糖凝膠電泳確定RNA質量
        5.2.4 引物序列合成
        5.2.5 反轉錄合成cDNA
        5.2.6 實時熒光定量PCR反應
    5.3 數(shù)據(jù)處理
        5.3.1 轉錄組數(shù)據(jù)處理分析:
        5.3.2 熒光定量PCR實驗數(shù)據(jù)處理分析
    5.4 實驗結果
        5.4.1 肌肉組織RNA質量測定
        5.4.2 冷應激組與溫和組差異基因數(shù)量
        5.4.3 較大Fold Change的差異基因
        5.4.4 qPCR對轉錄組結果的驗證
        5.4.5 差異表達基因涉及的信號途徑類別:
        5.4.6 胰島素信號和脂肪轉運調控信號的表達
    5.5 討論
        5.5.1 低出生體重未直接影響肌肉胰島素信號
        5.5.2 冷應激低出生體重羔羊血漿中游離脂肪酸含量上升
        5.5.3 圍產期冷應激誘導肌肉內的氧化應激和胰島素功能紊亂
        5.5.4 結論
    5.6 小結
第6章 結論
第7章 參考文獻
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]山羊圍產期的飼養(yǎng)管理技術要點[J]. 叢培強.  山東畜牧獸醫(yī). 2017(03)
[2]熱應激影響家畜繁殖機能的機理及其調控研究進展[J]. 郭亮,張敏紅.  中國畜牧獸醫(yī). 2008(09)
[3]宮內生長受限大鼠肝臟糖異生酶的表達增加與胰島素抵抗[J]. 劉曉梅,盧巖,潘莉莉,李書琴.  中國當代兒科雜志. 2008(02)



本文編號：3439782