旋毛蟲病是由旋毛蟲引起的人獸共患疾病,呈世界性分布。豬是旋毛蟲主要宿主之一,生食或半生食感染旋毛蟲的豬肉及其產(chǎn)品是人類感染旋毛蟲的主要方式,旋毛蟲病嚴(yán)重威脅人類健康和公共安全。目前旋毛蟲檢測方法無法滿足現(xiàn)場快速檢測旋毛蟲病的要求。因此,開發(fā)適用于現(xiàn)場的高效、靈敏的旋毛蟲檢測方法,能有效地縮短旋毛蟲的檢驗時間,并為旋毛蟲病的診斷和檢測提供強有力的技術(shù)支持。本研究基于上轉(zhuǎn)發(fā)光免疫層析（up-converting phosphor technology-based lateral flow assay,UPT-LF）技術(shù)快速檢測豬旋毛蟲。通過抗原和檢測模式篩選、層析條件優(yōu)化,確定間接法制備試紙條。將山羊抗豬IgG與示蹤物上轉(zhuǎn)發(fā)光顆粒（up-converting phosphor particle,UCP）共價偶聯(lián),以旋毛蟲肌幼蟲絲氨酸蛋白酶抑制因子基因（WM5）表達(dá)的蛋白WM5（2 mg/mL）與兔抗山羊IgG（0.5 mg/mL）噴點于分析膜上作為檢測帶（T）與質(zhì)控帶（C）,并命名該試紙條為Tsp-UPT-LF。通過進一步優(yōu)化確定Tsp-UPT-LF最佳血清稀釋倍數(shù)（5倍）、最優(yōu)樣品處理液... 

【文章來源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：75 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

上轉(zhuǎn)發(fā)光過程

第一篇 文獻(xiàn)綜述成[94]，各組成部分（圖 2.2）：（1）樣品墊：被檢樣本滴加的部位；（：含有 UCP-抗原或抗體結(jié)合物的部位；（3）分析膜：層析試紙的核心和抗體分別固定于其上的某一位置作為檢測帶（T 帶）與質(zhì)控帶（C 帶）墊：通過虹吸作用，為整個檢測過程提供動力，使樣品流過整個試紙條底襯：各部分的載體。

1.1 三種蛋白的 SDS-PAGE 鑒；1.純化后的 Zh68；2.純化后的 WMig.1.1 SDS-PAGE of three prote Marker; 1. Purified Zh68; 2. Purified W、WM5 蛋白 Western blot 鑒定鑒定 ES 抗原、Zh68 和 WM5 均）識別，具有很好的抗原原性（紙條的備選抗原。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3436516