發(fā)布時間：2021-08-19 15:07

　　棉酚是一種從棉籽中提取出來的一種多酚類化合物,由于具有抗炎、抗病毒、抗寄生蟲、抗腫瘤等作用越來越受人們的重視,同時棉酚也具有毒性作用,特別是生殖毒性,然而近幾年對于生殖毒性的研究甚少,因此我們研究了棉酚生殖毒性的分子作用機制。為了探究不同濃度棉酚對小鼠睪丸組織抗氧化酶活性的影響,及對相關(guān)凋亡蛋白NF-κB（P65）,P53,Caspase-3表達(dá)的影響,旨在進一步了解棉酚的生殖毒性作用機制。本試驗將48只7周齡,體重為25.53±1.45 g的成年小鼠隨機分成4組,每組12只,分為對照組:CG（1%CMC-Na）、低劑量組:LG（40 mg·kg-1·d-1棉酚）、中劑量組:MG（80 mg·kg-1·d-1棉酚）和高劑量組:HG（120 mg·kg-1·d-1棉酚）,連續(xù)灌胃20 d后處死,取睪丸稱重并計算臟器指數(shù),睪丸組織SOD、GSH-Px活性及MDA含量采用分光光度法測定,用熒光定量PCR方法分析睪丸組織NF-κB（P65）,P53,Caspase-3 mRNA的表達(dá)水平。用western-blot方法分析睪丸組織NF-κB（P65）,P53,Caspase-3蛋白的表達(dá)水平。... 

【文章來源】：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)黑龍江省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
英文摘要
1 引言
    1.1 棉酚的性質(zhì)
    1.2 棉酚的藥理作用
        1.2.1 棉酚的抗腫瘤作用
        1.2.2 棉酚的抗病毒作用
        1.2.3 棉酚的抗炎活性
        1.2.4 棉酚的抗寄生蟲活性
    1.3 棉酚毒性
        1.3.1 棉酚的生殖毒性
        1.3.2 棉酚的免疫毒性
    1.4 氧化應(yīng)激作用
        1.4.1 氧化應(yīng)激概述
        1.4.2 棉酚對氧化應(yīng)激的作用
    1.5 細(xì)胞凋亡
        1.5.1 細(xì)胞凋亡概述
        1.5.2 細(xì)胞凋亡途徑
        1.5.3 細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白
        1.5.4 棉酚對線粒體能量代謝的影響
    1.6 試驗研究的目的與意義
2 材料與方法
    2.1 試驗動物
    2.2 動物分組及處理
    2.3 主要儀器與試劑
        2.3.1 主要儀器及設(shè)備
        2.3.2 主要試驗試劑及其它
    2.4 試驗內(nèi)容與方法
        2.4.1 動物組織的采集
        2.4.2 組織勻漿的制備
        2.4.3 組織蛋白濃度的測定
        2.4.4 總超氧化物歧化酶（T-SOD）活性測定
        2.4.5 谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）活性測定
        2.4.6 MDA含量測定
        2.4.7 采用QRT-PCR檢測睪丸中NF-κB,P53和Caspase-3 m RNA的表達(dá)
        2.4.8 采用western-blot檢測睪丸NF-κB,P53和Caspase-3 m RNA水平
    2.5 試驗數(shù)據(jù)的處理與分析
3 結(jié)果
    3.1 棉酚對小鼠體重及臟器指數(shù)的影響
        3.1.1 棉酚對小鼠體重的影響
        3.1.2 棉酚對小鼠睪丸臟器指數(shù)的影響
    3.2 棉酚對小鼠睪丸組織SOD,GSH-PX活性和MDA含量的影響
        3.2.1 棉酚對小鼠睪丸組織SOD活性的影響
        3.2.2 棉酚對小鼠睪丸組織GSH-Px活性的影響
        3.2.3 棉酚對小鼠睪丸組織MDA含量的影響
    3.3 小鼠睪丸組織中NF-ΚB,P53和CASPASE-3 MRNA表達(dá)情況
        3.3.1 小鼠睪丸組織總RNA的純度測定
        3.3.2 不同濃度棉酚對小鼠睪丸組織中NF-κB（P65）mRNA表達(dá)的影響
        3.3.3 不同濃度棉酚對小鼠睪丸組織中P53 mRNA表達(dá)的影響
        3.3.4 不同濃度棉酚對小鼠睪丸組織中Caspase-3 m RNA表達(dá)的影響
    3.4 小鼠睪丸組織中NF-ΚB,P53和CASPASE-3 蛋白表達(dá)情況
        3.4.1 睪丸組織中核蛋白NF-κB（P65）表達(dá)情況
        3.4.2 睪丸組織中全蛋白NF-κB（P65）表達(dá)的影響
        3.4.3 睪丸組織中核蛋白P53表達(dá)情況
        3.4.4 睪丸組織中全蛋白P53表達(dá)情況
        3.4.5 睪丸組織中蛋白Caspase-3 表達(dá)情況
    3.5 睪丸組織中抗氧化酶活性與相關(guān)基因MRNA表達(dá)的相關(guān)性分析
4 討論
    4.1 棉酚引起小鼠中毒的臨床及病理表現(xiàn)
    4.2 棉酚對小鼠體重及臟器指數(shù)的影響
    4.3 棉酚對小鼠睪丸組織抗氧化能力的影響
    4.4 棉酚對小鼠睪丸組織中P53,NF-ΚB和CASPASE-3 表達(dá)水平的影響
    4.5 對棉酚引起的氧化應(yīng)激作用和蛋白表達(dá)的深入分析
5 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[7]棉酚及其衍生物抗腫瘤機制的研究進展[J]. 付帥,吳勇.  醫(yī)學(xué)綜述. 2011(04)
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碩士論文
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[2]棉酚抗炎活性及作用機制初步研究[D]. 劉志成.吉林大學(xué) 2014
[3]PI3K-Akt和JNK信號通路與AfMNPV誘導(dǎo)斜紋夜蛾SL-1細(xì)胞凋亡[D]. 孫瑤瑤.華中師范大學(xué) 2014
[4]H2O2誘導(dǎo)兔關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞凋亡機制研究[D]. 莊彩屏.暨南大學(xué) 2013
[5]金黃色葡萄球菌誘導(dǎo)牛乳腺上皮細(xì)胞凋亡及其信號通路的研究[D]. 崔新潔.內(nèi)蒙古大學(xué) 2013
[6]8-MOP誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞凋亡及其機制探討[D]. 彭妍.南京醫(yī)科大學(xué) 2012



本文編號：3351639