發(fā)布時間：2021-03-18 05:07

　　尾型同源框轉(zhuǎn)錄因子Cdx2在調(diào)控小鼠早期胚胎滋養(yǎng)外胚層（Trophectoderm, TE）的發(fā)育過程中起關(guān)鍵作用,干擾cdx2基因的小鼠胚胎能形成早期囊胚但不能維持囊胚腔,胚胎不能著床。但cdx2在牛早期胚胎發(fā)育及滋養(yǎng)層與內(nèi)細(xì)胞團(tuán)（Inner cell mass, ICM）細(xì)胞分化過程中的相關(guān)分子機制還不清楚。本試驗研究了cdx2基因在牛體外受精胚胎發(fā)育過程中的動態(tài)表達(dá)變化,并利用干擾cdx2基因的體細(xì)胞獲得克隆胚胎,探討了cdx2在克隆胚胎發(fā)育及第一次細(xì)胞分化過程中的作用。試驗結(jié)果如下：1)通過過表達(dá)cdx2的慢病毒顆粒獲得了穩(wěn)定表達(dá)外源cdx2的牛胎兒成纖維細(xì)胞系,轉(zhuǎn)基因細(xì)胞中cdx2mRNA表達(dá)水平是對照組的24.42倍；2)分別選取cdx2基因CDS序列的上、中、下游三個不同區(qū)域構(gòu)建成干擾載體pLL3.7-shRNA488、pLL3.7-shRNA621、pLL3.7-shRNA672及pLL3.7-shRNA-Control,過表達(dá)cdx2的細(xì)胞經(jīng)不同敲減載體病毒顆粒感染后,相對于對照組其cdx2的表達(dá)水平分別為0.387、0.183、0.123和0.773,因此選用pLL... 

【文章來源】：內(nèi)蒙古大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū) 211工程院校

【文章頁數(shù)】：57 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
目錄
縮略詞表
一、試驗研究
    摘要
    引言
    1 材料與方法
    2 實驗結(jié)果
        2.1 cdx2過表達(dá)和敲減載體的構(gòu)建
        2.2 病毒顆粒的生產(chǎn)
        2.3 過表達(dá)cdx2基因的魯西黃牛胎兒成纖維細(xì)胞系的建立與鑒定
        2.4 cdx2基因干擾細(xì)胞的獲得及干擾效率分析
        2.5 牛早期胚胎發(fā)育過程不同時期cdx2、tead4、oct4表達(dá)的動態(tài)變化
        2.6 敲減cdx2的表達(dá)對�？寺∨咛ピ缙诎l(fā)育及相關(guān)基因表達(dá)的影響
    3 討論
    4 小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
二、文獻(xiàn)綜述
    1 哺乳動物早期胚胎的發(fā)育
    2 關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子在TE和ICM形成中的作用
    3 關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子的轉(zhuǎn)錄調(diào)控
    4 牛TE的形成
    參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士期間發(fā)表的論文



本文編號：3087986