目的:奶牛乳腺炎是奶牛養(yǎng)殖業(yè)常見(jiàn)的乳腺疾病,嚴(yán)重影響了奶牛的健康與生產(chǎn)性能,甚至對(duì)人類健康也有所影響,我國(guó)奶牛業(yè)奶牛乳腺炎的發(fā)病率一直居高不下,對(duì)社會(huì)經(jīng)濟(jì)造成了巨大的損害。金黃色葡萄球菌是奶牛乳腺炎的主要病原菌之一。TGF-β1是一種多功能的細(xì)胞因子,對(duì)調(diào)節(jié)機(jī)體免疫及細(xì)胞增殖發(fā)揮重要的作用。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)乳腺炎多發(fā)的奶牛群TGF-β1水平較高,并且TGF-β1會(huì)增加奶牛乳腺上皮細(xì)胞對(duì)金黃色葡萄球菌的易感性。然而,在TGF-β1作用下,奶牛乳腺上皮細(xì)胞是否會(huì)通過(guò)細(xì)胞間通訊影響免疫細(xì)胞的功能卻仍然是未知的。因此本研究假設(shè)在TGF-β1作用下,奶牛乳腺上皮細(xì)胞來(lái)源的外泌體會(huì)影響牛巨噬細(xì)胞的功能,旨在探討在TGF-β1作用下,奶牛乳腺上皮細(xì)胞來(lái)源的外泌體影響牛巨噬細(xì)胞的功能的機(jī)制。方法:在本研究中我們通過(guò)超速離心法和試劑盒法提取了正常牛乳腺上皮細(xì)胞（MAC-T）來(lái)源的外泌體（un-exo）和TGF-β1作用下牛乳腺上皮細(xì)胞來(lái)源的外泌體（t-exo）,分別作用于牛巨噬細(xì)胞,通過(guò)MTT實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞流式實(shí)驗(yàn)檢測(cè)了兩種外泌體體對(duì)牛巨噬細(xì)胞增殖和細(xì)胞周期的影響,采用q RT-PCR和Western ... 

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

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來(lái)源于未處理的MAC-T細(xì)胞（un-exo）和TGFβ1處理的MAC-T細(xì)胞（t-exo）

第二篇 研究?jī)?nèi)容 第一章 TGF-β1 作用下牛乳腺上皮細(xì)胞來(lái)源外泌體對(duì)牛巨噬細(xì)胞增殖、凋亡和細(xì)胞周期的影響及機(jī)制研究 間的 BOSMAC 中 p38 的 mRNA 表達(dá)水平。如圖 3C 所示，t-exo 處理顯著提高了 BOSMAC 中 p38 的 mRNA 表達(dá)水平。這些結(jié)果表明，在 TGF-β1 作用下來(lái)源于牛乳腺上皮細(xì)胞的外泌體可誘導(dǎo)牛巨噬細(xì)胞中 p38 的表達(dá)和磷酸化。

且兩種來(lái)源外泌體對(duì)引起牛巨噬細(xì)胞凋亡的能力無(wú)顯著差異（圖5A 和圖 5B）。FADD 又名 fas 相關(guān)死亡域蛋白，可以與 caspase8 相互作用是后者激活，從而形成死亡誘導(dǎo)信號(hào)復(fù)合物，再激活一系列的 Caspase-1, 3, 7 等，促進(jìn)Fas 蛋白所在細(xì)胞的凋亡發(fā)生。Western blot 結(jié)果顯示，相比于對(duì)照組，un-exo 組和 t-exo 組 FADD 蛋白、caspase8 蛋白的表達(dá)量都顯著降低�？傊�，這些數(shù)據(jù)表明，牛乳腺上皮細(xì)胞來(lái)源的外泌體可以誘導(dǎo)牛巨噬細(xì)胞凋亡，這一過(guò)程不依賴FADD 信號(hào)通路，且 TGF-β1 作用對(duì)于牛乳腺上皮細(xì)胞來(lái)源的外泌體誘導(dǎo)牛巨噬細(xì)胞凋亡無(wú)顯著影響。


本文編號(hào)：3071298