P-gp是由Abcb1基因編碼的一種相對分子質量為170 kda的跨膜轉運蛋白,屬于能量依賴的藥物外排泵。近年來的研究發(fā)現(xiàn),P-gp除了在腫瘤細胞中高表達介導其對化療藥物的耐藥外,人和動物的正常組織中也有分布,如膽小管、腸上皮、腎小管以及血腦屏障等,可限制藥物及其它外源性物質在生物體內的吸收、分布和排泄,是影響口服藥物生物利用度的一個重要因素。P-gp的表達可以受到多種因素影響,包括化學物質、年齡、性別、生理狀態(tài)、疾病以及激素等。目前關于大腸桿菌感染對肉雞體內P-gp表達和功能的影響以及對口服底物藥物藥動學過程的研究仍較少,故本試驗研究了大腸桿菌感染對肉雞P-gp mRNA表達的影響及其對恩諾沙星在肉雞體內藥動學的影響,并初步探討了大腸桿菌對P-gp mRNA表達影響的調控機制。首先,采用P-gp誘導劑利福平以及抑制劑維拉帕米研究其對恩諾沙星在肉雞體內藥動學的影響,證實恩諾沙星為P-gp的底物。本研究選取30只健康8周齡肉雞,隨機分為6組（n=5）,分別為單劑量口服恩諾沙星（10 mg/kg.bw）組、單劑量口服維拉帕米（15 mg/kg.bw）后口服恩諾沙星（10mg/kg.bw）組... 

【文章來源】：南京農業(yè)大學江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：97 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
符號及縮略語
引言
第一章 文獻綜述
    1 P-gp的結構和分布
    2 P-gp與藥物的吸收、分布、代謝和排泄
    3 影響P-gp表達和功能的因素
        3.1 疾病對P-gp表達和功能的影響
        3.2 年齡對P-gp表達和功能的影響
        3.3 激素對P-gp表達和功能的影響
        3.4 化學物對P-gp表達和功能的影響
            3.4.1 P-gp的誘導劑
            3.4.2 P-gp的抑制劑
    4 P-gp的表達調控
        4.1 核受體對P-gp編碼基因Abcbl的轉錄調控
            4.1.1 PXR/SXR對Abcb1基因的轉錄調控
            4.1.2 CAR對P-gp表達和功能的影響
        4.2 細胞因子對P-gp表達和功能的影響
            4.2.1 IL-6對P-gp表達和功能的影響
            4.2.2 IL-1p對P-gp表達和功能的影響
            4.2.3 IL-2和IL-4對P-gp表達和功能的影響
            4.2.4 TNFα對P-gp表達和功能的影響
            4.2.5 IFN-γ對P-gp表達和功能的影響
            4.2.6 TGF-β1對P-gp表達和功能的影響
            4.2.7 細胞因子對P-gp表達和功能的調控通路
        4.3 NOS對P-gp表達和功能的影響
        4.4 NF-κB對P-gp表達和功能的影響
        4.5 其它因子對P-gp表達和功能的影響
    5 小結
    參考文獻
第二章 P-糖蛋白對恩諾沙星在肉雞體內藥動學的影響
    1 材料和方法
        1.1 材料
            1.1.1 試驗動物
            1.1.2 藥品與試劑
            1.1.3 試驗儀器
        1.2 方法
            1.2.1 血漿中恩諾沙星檢測的色譜條件
            1.2.2 標準曲線的制備
            1.2.3 主要工作液配制
            1.2.4 給藥方案與血樣的采集
            1.2.5 樣品處理
        1.3 數(shù)據的處理
    2 結果
        2.1 色譜行為
        2.2 標準曲線的繪制
        2.3 藥時曲線與藥動學參數(shù)
            2.3.1 對照組和維拉帕米處理組雞體內恩諾沙星的藥時曲線
            2.3.2 對照組和維拉帕米處理組雞體內恩諾沙星的藥動學參數(shù)
            2.3.3 對照組和利福平處理組雞體內恩諾沙星的藥時曲線
            2.3.4 對照組和利福平處理組雞體內恩諾沙星的藥動學參數(shù)
    3 討論
    參考文獻
第三章 大腸桿菌感染對肉雞組織中P-gp的表達及對口服恩諾沙星的影響
    1 材料與方法
        1.1 試劑
        1.2 試驗儀器
        1.3 菌株
        1.4 試驗動物及處理
        1.5 方法
            1.5.1 感染模型的建立
            1.5.2 real time RT-PCR方法測定肉雞組織中Abcb1 mRNA的表達量
                1.5.2.1 樣品采集及處理
            1.5.3 SABC免疫組織化學方法檢測P-gp的蛋白表達
            1.5.4 HPLC測定口服恩諾沙星的血藥濃度
    2 結果
        2.1 肉雞大腸桿菌感染模型的建立
        2.2 健康和大腸桿菌感染肉雞組織中Abcb1 mRNA的表達水平變化
            2.2.1 RNA完整性鑒定
            2.2.2 RNA及cDNA檢測
        2.3 P-gp蛋白在健康和大腸桿菌感染肉雞組織中的表達差異
            2.3.1 P-gp在健康和感染肉雞肝臟中的定位
            2.3.2 P-gp在健康和感染肉雞腎臟中的定位
            2.3.3 P-gp在健康和感染肉雞空腸中的定位
            2.3.4 P-gp在健康和感染肉雞回腸中的定位
            2.3.5 P-gp在健康和大腸桿菌感染肉雞組織中的半定量分析
        2.4 大腸桿菌感染對口服恩諾沙星藥代動力學的影響
            2.4.1 恩諾沙星在健康和大腸桿菌感染肉雞的藥時曲線
            2.4.2 恩諾沙星在健康和大腸桿菌感染肉雞的藥動學參數(shù)
            2.4.3 感染肉雞恩諾沙星與維拉帕米聯(lián)合用藥的藥時曲線
            2.4.4 P-gp抑制劑維拉帕米對感染肉雞體內恩諾沙星藥動學參數(shù)的影響
    3 討論
    參考文獻
第四章 大腸桿菌對肉雞體內P-gp表達的調控機制初探
    1 材料與方法
        1.1 試劑
        1.2 試驗儀器
        1.3 菌株
        1.4 試驗動物及處理
        1.5 方法
    2 結果
α、CXR和NF-κB1基因的擴增曲線和熔解曲線">        2.1 IL-6、IL-1β、TNF_α、CXR和NF-κB1基因的擴增曲線和熔解曲線
        2.2 主要促炎因子在健康和大腸桿菌感染肉雞不同組織中的表達差異
            2.2.1 IL-6 mRNA在健康和感染肉雞不同組織中的相對表達量
            2.2.2 IL-1β mRNA在健康和感染肉雞不同組織中的相對表達量
            2.2.3 TNFα mRNA在健康和感染肉雞不同組織中的相對表達量
        2.3 核受體CXR在健康和感染肉雞不同組織中的表達差異
        2.4 核轉錄因子NF-κB1在健康和感染肉雞不同組織中的表達差異
    3 討論
    參考文獻
全文總結
致謝
攻讀碩士期間發(fā)表的論文


【參考文獻】：
期刊論文
[1]異源物代謝核受體PXR與腫瘤多藥耐藥相關性的研究進展[J]. 倪彥彬,章國良.  生理科學進展. 2011(01)



本文編號：3038480