發(fā)布時間：2020-07-05 10:29

【摘要】：在反芻動物飼料中添加多不飽和脂肪酸可以提高其產(chǎn)品的共軛亞油酸、二十二碳六烯酸等多不飽和脂肪酸,進而提高人體健康。灘羊是寧夏地區(qū)傳統(tǒng)主養(yǎng)綿羊品種,提高灘羊肉品質(zhì)的營養(yǎng)價值有著重要的意義。本研究以大豆油、亞麻油、裂壺藻粉為原料,分五個試驗,研究了其對灘羊斷奶羔羊生長性能、胴體品質(zhì)、瘤胃發(fā)酵指標(biāo)、血液生化指標(biāo)及體組織中共軛亞油酸(CLA)含量的影響,通過檢測體組織脂肪酸相關(guān)酶基因mRNA豐度和瘤胃液微生物數(shù)量的變化,揭示不同來源不飽和脂肪酸對灘羊體脂共軛亞油酸調(diào)控作用及合成機理的影響,為灘羊肉品質(zhì)調(diào)控提供技術(shù)手段和理論依據(jù)。試驗一灘羊日糧大豆油、亞麻油、裂壺藻粉適宜添加比例的研究在精粗比為50:50的日糧中分別添加0%、1%、2%、3%的大豆油、亞麻油、裂壺藻粉,采用體外發(fā)酵技術(shù),培養(yǎng)0、3、6、12、24h,檢測每個時間點的產(chǎn)氣量、pH、NDF、NH3-N、BCP、VFA各項指標(biāo),利用這幾項指標(biāo)計算不同組合的單項組合效應(yīng)指數(shù)(SFAEI)和多項組合效應(yīng)指數(shù)(MFAEI),篩選出大豆油、亞麻油、裂壺藻粉適宜的添加比例。MFAEI評定結(jié)果顯示,添加2%的大豆油、亞麻油、裂壺藻粉的值最高,其次是3%組,最后是1%組。結(jié)果表明,這三種不飽和脂肪酸原料對瘤胃發(fā)酵指標(biāo)效果比較一致,2%是大豆油、亞麻油、裂壺藻粉最適宜的添加比例。試驗二飼喂不飽和脂肪酸對灘羊的生長性能和肉品質(zhì)的影響選擇3月齡左右、體重相近的灘羊公羔40只,隨機分為4組,每組10只,單欄飼養(yǎng),分別設(shè)為對照組、大豆油組、亞麻油組、裂壺藻粉組。大豆油、亞麻油、裂壺藻粉的添加量均為日糧干物質(zhì)的2%,日糧精粗比為50:50,預(yù)飼期15 d,正飼期60 d。結(jié)果發(fā)現(xiàn),飼喂2%的大豆油、亞麻油、裂壺藻粉日糧的各組灘羊日增重均能達到150g以上,三個處理組的干物質(zhì)采食量、胴體重、凈肉重、尾脂重、骨肉比、屠宰率、GR值、眼肌面積、系水力、熟肉率、pH45min、大理石紋、滴水損失45min、滴水損失24 h、肉色a、肉色b值、肉色L值與對照組沒有差異(P0.05),表明添加的不飽和脂肪酸比例較適宜,對灘羊的生長性能和肉品質(zhì)沒有不良影響。試驗三飼喂不飽和脂肪酸對灘羊體組織脂肪酸的影響采集各組灘羊的瘤胃液、血漿、背最長肌、皮下脂肪,檢測采集樣品的脂肪酸含量,結(jié)果發(fā)現(xiàn),大豆油組、裂壺藻粉組背最長肌中的c9,t11 CLA含量顯著提高(P0.05),亞麻油組背最長肌中的c9,t11 CLA含量有一定提高(P0.05),三個處理組背最長肌的C18:1 t-11(TVA)含量極顯著提高(P0.01),裂壺藻粉組背最長肌中的DHA顯著升高(P0.01);大豆油組、亞麻油組和裂壺藻粉組皮下脂肪中的c9,t11 CLA顯著提高(P0.05),皮下脂肪TVA極顯著提高(P0.01),各組皮下脂肪的t10,c12CLA差異不顯著(P=0.078),裂壺藻粉組皮下脂肪的DHA顯著提升(P0.01)。結(jié)果表明,飼喂2%大豆油、亞麻油和裂壺藻粉,均能提高羔羊肌肉組織、脂肪組織的TVA和c9,t11 CLA含量;亞麻油、裂壺藻粉能提高肌肉組織、脂肪組織的DHA含量。大豆油組、亞麻油組和裂壺藻粉組血漿中的c9,t11 CLA、t10,c12CLA、TVA含量顯著升高(P0.01),亞麻油組、大豆油組C18:0顯著升高(P0.01),而裂壺藻粉組C18:0顯著降低(P0.01),表明二十二碳六烯酸的瘤胃生物氫化與亞油酸、亞麻酸并不相同。大豆油組、亞麻油組和裂壺藻粉組瘤胃液中的c9,t11 CLA、t10,c12CLA、TVA含量均顯著上升(P0.01),表明瘤胃液中存在著生成c9,t11CLA、t10,c12CLA的微生物,是體內(nèi)c9,t11 CLA生成的重要途徑。四個試驗組瘤胃液、血漿、皮下脂肪、背最長肌的TVA和c9,t11 CLA含量都呈現(xiàn)相同趨勢,裂壺藻粉組大豆油組亞麻油組對照組,表明裂壺藻粉的CLA合成效果最好,大豆油次之,亞麻油最低。本研究發(fā)現(xiàn)三個處理組的瘤胃液的TVA、c9,t11 CLA均和皮下脂肪的c9,t11 CLA有著較強的相關(guān)性,皮下脂肪和背最長肌中的TVA和c9,t11 CLA之間有著較強的相關(guān)性。表明,灘羊體內(nèi)c9,t11 CLA含量可能是有兩部分來源,一是瘤胃生物氫化不飽和脂肪酸產(chǎn)生c9,t11 CLA被機體吸收,二是吸收進入體內(nèi)的TVA通過組織內(nèi)源酶生成c9,t11 CLA,在脂肪、肌肉組織沉積。試驗四飼喂不飽和脂肪酸對灘羊體內(nèi)CLA代謝通路的影響采集各組灘羊血清、背最長肌、皮下脂肪、肝臟組織,檢測血清多項生化指標(biāo)及體組織FAS、LPL、SCD、ACC的mRNA表達豐度,研究不飽和脂肪酸對機體代謝影響及體內(nèi)CLA的合成機理。結(jié)果發(fā)現(xiàn),飼喂大豆油、亞麻油、裂壺藻粉,血清胰島素含量顯著降低(P0.05),瘦素顯著提升(P0.05),表明不飽和脂肪酸在體內(nèi)的代謝與胰島素、瘦素有著密切的聯(lián)系。飼喂亞油酸、亞麻酸能提高血清中NEFA、TG、LDL、HDL(P0.05),飼喂裂壺藻粉NEFA、TG、LDL、HDL略有下降(P0.05),表明二十二碳六烯酸與亞油酸、亞麻酸體內(nèi)代謝有著較大的差異,裂壺藻粉較大豆油、亞麻油對機體健康更為有利。飼喂大豆油、亞麻油、裂壺藻粉,對SOD、CAT、GSH-Px影響不大(P0.05),但均會引起羔羊血清MDA明顯升高(P0.05),表明添加亞油酸、亞麻酸、二十二碳六烯酸對灘羊體內(nèi)抗氧化酶活性影響不大,但對體組織有一定程度的脂質(zhì)過氧化損傷。大豆油組、亞麻油組、裂壺藻粉組的肝臟組織SCD顯著下降(P0.05),FAS、ACC、LPL差異不大(P0.05),肌肉組織、皮下脂肪的LPL、SCD、ACC、FAS與對照組差異不大(P0.05),表明飼喂不飽和脂肪酸灘羊體組織的c9,t11 CLA生成與肝臟組織的SCD表達有關(guān)。試驗五飼喂不飽和脂肪酸對灘羊瘤胃發(fā)酵參數(shù)及相關(guān)氫化微生物的影響宰前分別采取各組灘羊瘤胃液,檢測瘤胃液細(xì)菌、pH、VFA、NH3-N等指標(biāo),研究不飽和脂肪酸對灘羊瘤胃代謝的影響及CLA的合成機理。結(jié)果發(fā)現(xiàn),大豆油組、亞麻油組、裂壺藻粉組的瘤胃液pH和對照組差異不顯著(P0.05),瘤胃NH3-N濃度均略低于對照組(P0.05),各組總VFA較對照組明顯下降,大豆油組、裂壺藻粉組與對照組相比顯著下降(P0.05),亞麻油組略有下降(P0.05);而乙酸、丙酸、丁酸的分子比例并沒有下降,大豆油組、亞麻油、裂壺藻粉組的乙酸/丙酸變化不大(P0.05),表明添加2%大豆油、亞麻油、裂壺藻粉對羔羊瘤胃內(nèi)環(huán)境影響較小。大豆油組和亞麻油組的瘤胃Butyrivibrio(丁酸弧菌屬)、Butyrivibrio fibrisolvens(溶纖維丁酸弧菌)、Pseudobutyrovibrio(假丁酸弧菌屬)數(shù)量高于對照組,表明瘤胃Butyrivibrio、Butyrivibrio fibrisolvens、Pseudobutyrivfbrio等多種微生物參與了亞油酸、亞麻酸的c9,t11 CLA合成,瘤胃生物加氫是羔羊體內(nèi)c9,t11 CLA合成的重要途徑。裂壺藻粉組Butyrivibrio、Butyrivibrio fibrisolvens、Pseudobutyrivibrio與對照組差異不大,表明參與灘羊瘤胃二十二碳六烯酸生物氫化的微生物與亞油酸、亞麻酸有較大區(qū)別,可能存在二十二碳六烯酸生物氫化特定的微生物。綜上所述,日糧中分別添加2%大豆油、亞麻油、裂壺藻粉,對灘羊羔羊生長性能、屠宰性能和肉品質(zhì)無不良影響,對瘤胃主要發(fā)酵指標(biāo)影響不大,能增加血液氧化反應(yīng),血液生化指標(biāo)變化較大。添加2%大豆油、亞麻油、裂壺藻粉可以明顯提升背最長肌、皮下脂肪、血漿、瘤胃液中的TVA、c9,t11 CLA含量,裂壺藻粉的提升效果最好,其次是大豆油,亞麻油最差。另外,裂壺藻粉、亞麻油均能顯著提高皮下脂肪和背最長肌的DHA,提高羊肉n-6多不飽和脂肪酸的營養(yǎng)價值。大豆油組、亞麻油組、裂壺藻粉組的肝臟組織SCD顯著下降,表明羔羊組織CLA合成與肝臟內(nèi)源Δ9去飽和酶表達有關(guān)。瘤胃內(nèi)Butyrivibrio(丁酸弧菌屬)、Butyrivibrio fibrisolvens(溶纖維丁酸弧菌)、Pseudobbtyrivibrio(假丁酸弧菌屬)等多種微生物參與了c9,t11 CLA的合成,但參與二十二碳六烯酸生物氫化的微生物可能與亞油酸、亞麻酸不同。
【學(xué)位授予單位】：寧夏大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：S826.5
【圖文】：

５．６邐９２逡逑豬肉邐０．６邐８２逡逑雞肉邐０．９邐８４逡逑火雞肉邐２．５邐７６逡逑三文魚邐０．３邐ｎ．ｄ逡逑湖紅點鮭魚邐０．５邐ｎ．ｄ逡逑蟲下邐０．６邐ｎ．邋ｄ逡逑紅花油邐０．７邐４４逡逑葵籽油邐0．邋４邐３８逡逑菜籽油邐0．邋５邐４４逡逑邐玉米油邐０２邐３９邐逡逑注：引自Ｃｈｉｎ等（１９９２）。逡逑１．５．２反芻動物ＣＬＡ合成途徑逡逑反芻動物體脂或乳脂ＣＬＡ合成途徑主要有二種，第一是亞油酸、亞麻酸等多不飽和脂肪酸逡逑（ＰＵＦＡ）在反芻動物瘤胃內(nèi)被微生物直接異構(gòu)化為ｃ９，ｔｌｌ邋ＣＬＡ和ｔｌ０，ｃｌ２邋ＣＬＡ，然后通過瘤胃逡逑壁吸收轉(zhuǎn)化為乳脂或體脂（Ｅｎｓｅｒ等，１９９９）；第二是日糧中的多不飽和脂肪酸被瘤胃微生物生物逡逑氫化（ＢＨ），轉(zhuǎn)變?yōu)橛仓岬倪^程，生成了ＴＶＡ邋（ｔｉｌ邋Ｃ１８：ｌ）、ｔｌＯ油酸等異構(gòu)體，ＴＶＡ被吸逡逑收進入體內(nèi)，在肝臟、乳腺組織、脂肪組織等機體組織中被Ａ９去飽和酶脫氫生成ＣＬＡ邋（Ｇｒｉｉｎａｒｉ逡逑等，１９９９；邋Ｋｈａｎａ丨等，２００４）。逡逑邐邋邐邋０逡逑

４．２．５組織中ＴＶＡ與ｃ９，ｔｌ邋１邋ＣＬＡ含量相關(guān)性分析邐－一－逡逑對不同組織的ｃ９，ｔｉｌ邋ＣＬＡ和ＴＶＡ相互間進行了回歸分析，見圖４。對皮下脂肪、背最長肌逡逑的ＴＶＡ和ｃ９，邋ｔｉｌ邋ＣＬＡ含量之間作了回歸分析，回歸模型為Ｙ＝０．邋０５５２Ｘ＋１２．邋３２３邋，逡逑Ｙ＝０．０６２９Ｘ＋０．邋２８０３，決定系數(shù)分別為邋Ｒ２＝０．邋７４１７邋（Ｐ＜０．０１），邋Ｒ２＝０．邋７４８６邋（Ｐ＜０．０１），表明皮下脂肪、逡逑背最長肌的ＴＶＡ和ｃ９，邋ｔｉｌ邋ＣＬＡ之間有著較強的相關(guān)性。逡逑對血漿ＴＶＡ、ｃ９，ｔｌｌ邋ＣＬＡ與皮下脂肪ｃ９，ｔｌｌ邋ＣＬＡ含量之間作了回歸分析，回歸模型為逡逑Ｙ＝６８．８５１Ｘ＋３．邋４９６５，邋ＹＭ８５．９６Ｘ＋２．邋４２６９，決定系數(shù)分別為邋Ｒ２＝０．邋６８９２邋（Ｐ＜０．０１），邋Ｒ２＝０．邋７４７８逡逑（Ｐ＜０．０１），表明血漿的ＴＶＡ、ｃ９，ｔｌｌ邋ＣＬＡ均和皮下脂肪的ｃ９，ｔｌｌ邋ＣＬＡ相關(guān)性較強。逡逑對瘤胃液ＴＶＡ、ｃ９，邋ｔｉｌ邋ＣＬＡ與皮下脂肪ｃ９，邋ｔｉｌ邋ＣＬＡ含量之間作了回歸分析，回歸模型為逡逑Ｙ＝８．２６０９Ｘ＋１０．７５７

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