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羊源大腸桿菌的分離鑒定及耐藥性與致病性分析

發(fā)布時(shí)間:2020-06-23 07:27
【摘要】:動(dòng)物大腸桿菌病是獸醫(yī)臨床最常見的細(xì)菌病,其危害性較顯著,不僅對(duì)畜牧養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)帶來嚴(yán)重影響,而且對(duì)人類公共衛(wèi)生安全帶來了一定威脅。目前,國內(nèi)對(duì)禽源及豬源性大腸桿菌病的研究報(bào)告層出不窮,并且對(duì)該病的防治產(chǎn)生了一定的指導(dǎo)意義。但是,近幾年,國內(nèi)養(yǎng)羊業(yè)發(fā)展迅速,養(yǎng)殖體量已占據(jù)世界首位,羊大腸桿菌病直接嚴(yán)重影響了羔羊成活率,而且在成年羊身上常常引發(fā)混合感染,伴有很強(qiáng)致病性。此外,臨床上長期過量或不合理的使用抗生素,導(dǎo)致了耐藥性菌株的大量出現(xiàn),給此種疾病的防治帶來一定程度的困難。對(duì)此農(nóng)業(yè)部貫徹落實(shí)《遏制細(xì)菌耐藥性國家行動(dòng)計(jì)劃(2016-2020年)》,在全國范圍類開展對(duì)動(dòng)物源細(xì)菌耐藥性的監(jiān)測工作,所以對(duì)羊源大腸桿菌的耐藥性和致病性進(jìn)行長期監(jiān)測分析不僅對(duì)羊源大腸桿菌病的防治有一定的指導(dǎo)意義,而且填補(bǔ)了國家動(dòng)物源細(xì)菌耐藥性中羊源細(xì)菌耐藥性監(jiān)測方面的空白。在長期監(jiān)測過程中,根據(jù)病原細(xì)菌對(duì)各種抗菌藥物耐藥性變化的具體狀況,為農(nóng)業(yè)部制定獸用抗菌藥物的管理對(duì)策與科學(xué)使用原則、方法提供了可靠性依據(jù),確保了動(dòng)物源性食品和公共衛(wèi)生的安全。為了探究羊源大腸桿菌耐藥性和致病性的嚴(yán)重程度,本實(shí)驗(yàn)對(duì)從寧夏回族自治區(qū)和青海高原牧區(qū)所采集的羊源樣品,進(jìn)行了分離鑒定,采用微量肉湯稀釋法測定6類獸醫(yī)臨床常用抗菌藥物的最小抑菌濃度(MIC),包括磺胺類、四環(huán)素類、β-內(nèi)酰胺類、喹諾酮類、黏菌素及喹VA啉類。并從分子學(xué)角度對(duì)其耐藥基因和毒力基因的攜帶情況進(jìn)行檢測,分析耐藥性、致病性與菌株本身所攜帶相關(guān)基因的關(guān)系,給羊源大腸桿菌病的耐藥性和分子流行病學(xué)監(jiān)測提供了可靠依據(jù),對(duì)獸醫(yī)臨床用藥有一定指導(dǎo)意義,實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:1.從寧夏回族自治區(qū)和青海高原牧區(qū)無菌采集羊源樣品共145份,其中包括肺臟68份、小腸及肛門拭子77份,共分離出大腸桿菌131株,寧夏回族自治區(qū)分離率為91.0%、青海高原牧區(qū)分離率為88.9%。2.對(duì)131株羊源大腸桿菌進(jìn)行藥物敏感性試驗(yàn),與豬源、禽源大腸桿菌相比,羊源大腸桿菌整體耐藥率較低為25.9%。對(duì)四環(huán)素、磺胺異VA唑、復(fù)方新諾明三種藥物耐藥性較強(qiáng),對(duì)第三代頭孢菌素最為敏感,敏感率達(dá)97%;多重耐藥(耐3種及3種以上藥物)現(xiàn)象較輕,多重耐藥率為12.2%。74%的試驗(yàn)菌株對(duì)9種藥物全部敏感。所以建議獸醫(yī)臨床上在進(jìn)行大腸桿菌病防治時(shí)對(duì)抗生素藥物也進(jìn)行分級(jí)使用或配合中藥草使用,三代頭孢菌素可作為最后治療藥物,一方面遏制抗菌藥物資源枯竭,另一方面可減輕用藥成本。3.青海源大腸桿菌耐藥性明顯低于寧夏源大腸桿菌,其耐藥率僅有2.5%,而寧夏為36.2%,原因可能與青海養(yǎng)羊業(yè)的飼養(yǎng)條件及放牧散養(yǎng)的養(yǎng)殖模式有關(guān);肺源大腸桿菌對(duì)9種受試藥物的耐藥性均高于腸源大腸桿菌,產(chǎn)生原因有待進(jìn)一步研究。4.耐藥基因檢測結(jié)果顯示tetC和sul2這兩種基因是導(dǎo)致羊源大腸桿菌對(duì)磺胺類和四環(huán)素藥物的主要原因。5.毒力基因檢測結(jié)果顯示羊源耐藥性大腸桿菌的致病因素主要與菌毛黏附素和鐵攝取轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)的相關(guān)毒力因子有關(guān),以fyuA+fimC毒力基因組合占主導(dǎo)地位;觀察比較同一菌株所攜帶耐藥基因和毒力基因情況,可以看出致病性較強(qiáng)的毒株,耐藥性也相對(duì)較高。
【學(xué)位授予單位】:西北農(nóng)林科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號(hào)】:S852.61

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本文編號(hào):2727002

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