【摘要】：近年來,細菌耐藥性已成為全球熱議的話題,尤以金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)耐藥菌株的出現(xiàn),引起了全世界研究者的關注,它的出現(xiàn)使得人和動物的臨床治療愈來愈難,且造成了巨大的經濟損失。目前,預防和治療金黃色葡萄球菌感染較為有效的藥物仍是抗生素,然而由于抗生素大量不合理的使用出現(xiàn)了愈來愈多的耐藥菌及耐藥基因,給臨床的治療帶來了巨大的困擾和挑戰(zhàn)。為了解我國部分地區(qū)乳源金黃色葡萄球菌的流行病學特點及其耐藥現(xiàn)狀和耐藥基因攜帶情況,本研究對分離自廣東省和甘肅省某規(guī)�；膛瞿虡拥�81株金黃色葡萄球菌進行了藥敏試驗、耐藥基因鑒定及分子特征研究。結果如下:金黃色葡萄球菌分離鑒定。對分離自廣東省和甘肅省某規(guī)�；膛雠R床乳房炎奶樣中的細菌進行增菌純化培養(yǎng)后,利用細菌16S rRNA通用引物并結合金黃色葡萄球菌特異性基因-耐熱核酸酶基因nuc及VITEK-2-COMPACT15全自動微生物鑒定系統(tǒng)對分離菌進行種屬鑒定,共分離鑒定出81株金黃色葡萄球菌,其中廣東省57株,甘肅省24株。對81株金黃色葡萄球菌進行了藥物的藥敏試驗及耐藥基因分析。通過測定MIC和藥敏紙片試驗發(fā)現(xiàn)81株金黃色葡萄球菌對14種抗生素的耐藥率由高到低依次是:氟苯尼考(80.2%)、青霉素(66.7%)、環(huán)丙沙星(33.3%)、紅霉素(32.1%)、卡那霉素(25.9%)、氨芐西林(25.9%)、克林霉素24.7%、頭孢噻呋(6.2%)、苯唑西林(4.9%)、慶大霉素(2.5%)、頭孢唑林(2.5%)、萬古霉素(0)、四環(huán)素(0)、利奈唑胺(0)。其中對3種藥物具有耐藥性的菌株共有16株、對4種藥物具有耐藥性的菌株共有5株、對5種藥物具有耐藥性的菌株共有7株、對6種藥物具有耐藥性的菌株共有6株、對7種藥物具有耐藥性的菌株共有1株、對8種藥物具有耐藥性的菌株共有1株、對9種藥物具有耐藥性的菌株共有2株、對10種藥物具有耐藥性的菌株共有2株。菌株對抗菌藥物呈多重耐藥現(xiàn)象。14種耐藥基因檢測結果顯示共有MRSA20株(24.7%),MSSA61株(75.3%);檢出率由高到低依次是:aac(6)/aph(2")(100%)、femA(100%)、ermB(100%)、vanB(100%)、tetM(100%)、flo R(80.2%)、ermC(77.8%)、fexA(50.6%)、mecA(24.7%)、tetA(0)、tetC(0)、nor(0)、vanA(0)、vanC(0),所有菌株均攜帶了至少5種以上的耐藥基因。對81株金黃色葡萄球菌進行了分子特征研究。對所有菌株采用spa及MLST方法進行分型,共發(fā)現(xiàn)14種ST型20種spa型;對20株MRSA進行SCCmec分型,分為5種SCCmec型,其中有4株MRSA菌株被鑒定為ST9-SCCmecIVb-t899型為相對優(yōu)勢型別,有9株MRSA菌株分別被鑒定為ST398-SCCmec I-t034、ST398-SCCmec IVc-t034、ST398-SCCmecV-t034、ST1-SCCmecI-t114、ST2632-SCCmecIII-t091、ST398-SCCmec III-t8617、ST398-SCCmecIII-t034、ST692-SCCmecIII-t2247、ST188-SCCmec III-t189型,另有7株SCCmecIII型MRSA未獲得MLST及spa分型。結合上述MLST及spa分型結果發(fā)現(xiàn)MRSA的優(yōu)勢型別為ST9-t899,MSSA的優(yōu)勢型別為ST398-t034,廣東省主要優(yōu)勢型別為ST9-t899,甘肅省主要優(yōu)勢型別為ST398-t034。且本研究中共檢出PVL基因陽性菌株1株,攜帶率為1.2%,為MSSA,MLST及spa分型為ST1289-t16824,分離自甘肅地區(qū)。
【學位授予單位】：中國農業(yè)科學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：S852.61
【圖文】：

中國農業(yè)科學院碩士學位論文 第二章 金黃色葡萄球菌的分離鑒定表 2.7 金黃色葡萄球菌分離率Table 2.7 The rate of Staphylococcus aureus地區(qū)鑒定方法奶樣數(shù) 分離率(%)16srRNA nuc Vitek-2廣東省 57 57 57 300 19.1甘肅省 24 24 24 170 14.1

圖 2.1 部分葡萄球菌 16SrRNA 的 PCR 擴增Fig.2.1 The amplification of 16S rRNA in Staphylococcus by PCR

【參考文獻】

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本文編號：2726266