【摘要】：豬流感(Swine influenza,SI)是由豬流感病毒(Swine influenza virus,SIV)引起的人畜共患傳染病,其臨床綜合征主要是呼吸道癥狀。引起豬流感的病原為豬流感病毒,屬于正黏病毒科,甲型流感病毒屬成員。豬流感病毒可按照病毒粒子表面對紅細胞有凝集性的血凝素和能將吸附在細胞表面的病毒粒子解脫下來的神經(jīng)氨酸酶糖蛋白進行分類,共有16個H亞型和9個N亞型。根據(jù)HA和NA的不同,又可以將其分為很多血清亞型,目前主要存在的是H1N1、H1N2、H3N2三種豬流感亞型。豬、禽和人流感病毒通過HA蛋白上的凝集素位點都可以跟豬上皮細胞上的含唾液酸的糖蛋白受體結合。流感病毒基因在豬的身上發(fā)生重新的組合而產(chǎn)生新的病毒株,進而流感病毒易于感染人類細胞,這種后果是很嚴重的,對人生命健康造成嚴重危害,對于該病的預防和治療也帶來很大挑戰(zhàn),因此具有重要的公共衛(wèi)生學意義。亞洲、歐洲、歐洲等的許多國家和地區(qū)都發(fā)生過該病,對養(yǎng)豬行業(yè)造成了巨大的損失。因此開展豬流感病毒的調查研究,進而了解豬流感病毒在我國的基因進化和致病性非常重要。為探究SIV在山東省豬群中流行情況及毒株的基本特性,本實驗室在2016年從山東省部分地區(qū)采集鼻拭子樣品接種10日齡SPF雞胚進行病毒的分離,經(jīng)過血凝試驗,RT-PCR擴增NP或M基因,陽性即確定為豬流感病毒,接著用分型引物進行病毒亞型的鑒定,判定為H3N2亞型,命名為A/Swine/Shandong/JN1/2016(H3N2)。運用RT-PCR擴增豬流感基因的8個片段,進行全基因組測序及序列分析,發(fā)現(xiàn)PA,NS和M基因來自于2009年H1N1大流行的流感病毒(pdm/09 H1N1)分支PB2,HA和NA來自于北美三重排流感病毒,NP基因來自歐洲類禽型流感病毒,PB1來自類人型流感病毒。為深層次了解病毒的特性,我們選用BALB/c小鼠為試驗動物,以10~6EID_(50)/只感染劑量滴鼻感染6周齡雌性BALB/c小鼠,觀察小鼠的活動,死亡的情況,記錄小鼠的體重變化,采集小鼠臟器進行病毒滴度測定,觀察小鼠內臟的組織病理學變化,對該毒株特性進行分析。結果顯示,小鼠活動性下降,采食量減少,體重下降。臟器的滴定結果,在肺臟和鼻甲中能夠檢測到病毒復制,而在腎臟、脾臟和腦中均未檢測到病毒。肺臟中的病毒含量為2.25log_(10)EID50/mL,鼻甲中的病毒含量為1.75log_(10)EID50/mL。為了解山東省豬群中SIV的感染情況,采用HI抗體檢測方法,對764份血清進行檢測。這對闡明豬流感病毒特性提供了進一步的理論和實驗方面的參考依據(jù)。
【學位授予單位】：山東農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：S852.651
【圖文】：

圖 9 感染后小鼠的體重變化Fig.9 Body weight changes after infection in mice3.14 小鼠臟器中病毒含量的滴定結果用 106EID50/50 μl 劑量H3N2亞型豬流感病毒經(jīng)過鼻腔感染小鼠后于第3天采集鼠臟器進行病毒滴定，滴定結果顯示，小鼠感染病毒 3 天后，病毒僅在肺臟和鼻甲骨中分離到含量較低的病毒，在腦、脾和腎臟中均未檢測到病毒復制。在肺臟中，病毒制滴度在 2.25log10EID50/ml。在鼻甲骨，病毒復制滴度 1.75log10EID50/ml。

圖 9 感染后小鼠的體重變化Fig.9 Body weight changes after infection in mice3.14 小鼠臟器中病毒含量的滴定結果用 106EID50/50 μl 劑量H3N2亞型豬流感病毒經(jīng)過鼻腔感染小鼠后于第3天采鼠臟器進行病毒滴定，滴定結果顯示，小鼠感染病毒 3 天后，病毒僅在肺臟和鼻甲中分離到含量較低的病毒，在腦、脾和腎臟中均未檢測到病毒復制。在肺臟中，病制滴度在 2.25log10EID50/ml。在鼻甲骨，病毒復制滴度 1.75log10EID50/ml。

【參考文獻】

相關期刊論文 前7條

1 陳錦成;張丹琳;陳敏鴻;張顯浩;賀東生;;部分豬場H1和H3亞型豬流感的血清學調查[J];中國畜牧獸醫(yī);2012年09期

2 唐續(xù);楊煥良;鄢明華;李秀麗;陳艷;孟沙沙;尹航;辛曉光;步志高;喬傳玲;陳化蘭;;一株人源H1N1亞型豬流感病毒的進化分析與生物學特性研究[J];中國預防獸醫(yī)學報;2012年04期

3 李曉楠;;豬流感的研究進展[J];畜牧與飼料科學;2012年03期

4 董浩;李林;胡桂學;;豬流感病毒的分子生物學研究進展[J];黑龍江畜牧獸醫(yī);2011年13期

5 趙樸;鄭玉姝;賈貝貝;劉麗艷;劉興友;李海燕;;豬流感病毒河南株的分離鑒定和生物學特性[J];華北農(nóng)學報;2010年04期

6 陸承平;;最新動物病毒分類簡介[J];中國病毒學;2005年06期

7 李海燕,于康震,楊煥良,辛曉光,陳君彥,趙樸,畢英佐,陳化蘭;中國豬源H5N1和H9N2亞型流感病毒的分離鑒定[J];中國預防獸醫(yī)學報;2004年01期

相關碩士學位論文 前1條

1 呂林;山東省仔豬腹瀉相關病毒感染狀況調查及流行性腹瀉病毒S基因的遺傳進化分析[D];山東農(nóng)業(yè)大學;2016年

本文編號：2726018