【摘要】：禽腺病毒(Fowl adenovirus,FAdV)是一種全世界范圍內(nèi)流行的家禽和野禽常見的傳染病病原。Ⅰ亞群禽腺病毒分為A、B、C、D、E 5個(gè)種,12個(gè)血清型,其中FAdV-8b主要引起包涵體肝炎(IBH),FAdV-4主要引起心包積水-肝炎綜合征(HHS)。自2010年以來,雞Ⅰ群禽腺病毒引起的IBH病例在我國白羽肉雞中呈增長(zhǎng)態(tài)勢(shì),2014年我國雞只感染HHS的病例僅有零星發(fā)生,2015年已在全國全面爆發(fā),給養(yǎng)雞業(yè)造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。為深入揭示FAdV的致病機(jī)理及其病理學(xué)特點(diǎn),進(jìn)而制定出切實(shí)有效的防控IBH和HHS的方案及措施,開展了本項(xiàng)研究。1、為了調(diào)查魯豫京等10省市FAdVI的流行情況,對(duì)2015～2017年在山東、河南和北京等10省市收集的455份疑似FAdVI陽性樣品進(jìn)行了檢測(cè)。檢測(cè)結(jié)果表明:2015～2016年感染率逐步上升,2017年感染率有所下降;發(fā)病率比較高的省市是山東、江蘇、河南和北京;商品蛋雞感染率比較高,其次是黃羽肉雞和白羽肉雞;檢測(cè)結(jié)果還表明雞Ⅰ群禽腺病毒病的發(fā)生具有明顯的季節(jié)性,在每年6～8月份是該病的高發(fā)期,10～11月份是另一個(gè)感染高發(fā)期。測(cè)序結(jié)果表明:流行的主要血清型為FAdV-8b 和 FAdV-4。2、為了進(jìn)一步研究膠東地區(qū)流行毒株的病毒生物學(xué)特點(diǎn)及血清學(xué)特性,2013年從本地區(qū)某肉雞養(yǎng)殖場(chǎng)疑似包涵體肝炎的肝組織病料中分離鑒定出FXWH-8b毒株,2015年從本地區(qū)某肉種雞養(yǎng)殖場(chǎng)疑似心包積水-肝炎綜合征的肝組織病料中分離鑒定出FXWH-4毒株。然后對(duì)兩個(gè)分離株采用理化特性檢驗(yàn)試驗(yàn)和瓊脂糖凝膠擴(kuò)散試驗(yàn)(AGP)進(jìn)行了檢測(cè),理化特性檢測(cè)結(jié)果表明:分離毒株分別經(jīng)BUDR、氫氧化鈉(pH=10)和60℃ 1h處理后,接種雞胚,孵育24h,雞胚表現(xiàn)正常,經(jīng)PCR檢測(cè)陰性;而經(jīng)乙醚、氯仿和鹽酸(pH=3)處理后的分離毒株,接種雞胚,孵育24h,不影響病毒在雞胚中的增殖,雞胚出現(xiàn)明顯的病變,經(jīng)PCR檢測(cè)陽性。AGP試驗(yàn)結(jié)果表明:FXWH-8b株與FAdV-8b標(biāo)準(zhǔn)株AV215(FAV-8)的陽性血清呈陽性反應(yīng);FXWH-4株與FAdV-4標(biāo)準(zhǔn)株AV211(FAV-4)的陽性血清呈陽性反應(yīng)。FXWH-8b株與FXWH-4株沒有血清學(xué)交叉反應(yīng)。3、為了深入揭示FAdV的致病機(jī)理及其病理學(xué)特點(diǎn),采用上述本研究中分離的2個(gè)毒株,通過腿部肌肉注射方式接種15d的SPF雞,結(jié)果表明:FXWH-8b株和FXWH-4株均能在24h內(nèi)引起試驗(yàn)雞發(fā)病,表現(xiàn)明顯的臨床癥狀和剖檢變化;H.E染色可見兩個(gè)分離株均可引起腦、胸腺、氣管、心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟、腺胃、胰臟、十二指腸、空腸、盲腸和法氏囊等器官出現(xiàn)明顯的病理變化,均未發(fā)現(xiàn)核內(nèi)包涵體。PCR結(jié)果表明FXWH-8b株攻毒后72h,FXWH-4株攻毒后48h,在病雞肝臟、肺臟、腎臟、腺胃、空腸和盲腸組織中均檢測(cè)出了該病毒的核酸,而且兩個(gè)毒株在攻毒后均可較快地在多個(gè)組織器官中定植。免疫組化結(jié)果顯示:FXWH-8b株在肝臟組織存在強(qiáng)陽性信號(hào),FXWH-4株在肝臟、腎臟、十二指腸和空腸組織存在陽性信號(hào)。4、為了解決目前我國沒有預(yù)防FAdV感染的商品化疫苗的問題,本研究首先對(duì)2個(gè)分離的毒株各自制成的細(xì)胞培養(yǎng)滅活疫苗進(jìn)行了同源性抗體檢測(cè)和交叉攻毒保護(hù)試驗(yàn),結(jié)果表明:兩個(gè)分離病毒株的疫苗均能較好地產(chǎn)生抗體,并對(duì)自身毒的攻毒感染均有較好的保護(hù)效果,但沒有交叉保護(hù)作用。而后,用FAdV-4毒株對(duì)3個(gè)公司FAdVI的細(xì)胞培養(yǎng)二價(jià)滅活疫苗進(jìn)行了攻毒保護(hù)試驗(yàn),結(jié)果顯示:3家公司的疫苗均能對(duì)FAdV-4病毒的感染有較好的保護(hù)作用。然后又對(duì)4種疫苗(FAdV-8b發(fā)病雞肝組織滅活疫苗、FAdV-8b雞胚組織滅活疫苗、FAdV-8b和FAdV-4發(fā)病雞肝組織二價(jià)滅活疫苗和FAdV-8b和FAdV-4細(xì)胞培養(yǎng)二價(jià)滅活疫苗)進(jìn)行了 5組32批次小型田間試驗(yàn),結(jié)果表明:FAdV-8b發(fā)病雞肝組織滅活疫苗對(duì)FAdV-8b毒株的感染有較好的保護(hù)作用,但對(duì)FAdV-4毒株的感染沒有保護(hù)作用;FAdV-8b雞胚組織疫苗對(duì)FAdV-8b和FAdV-4兩個(gè)毒株的感染均無保護(hù)作用;FAdV-8b和FAdV-4發(fā)病雞肝組織二價(jià)滅活疫苗和FAdV-8b和FAdV-4細(xì)胞培養(yǎng)的二價(jià)滅活疫苗均對(duì)目前膠東地區(qū)的流行毒株的感染有較好的保護(hù)作用。根據(jù)雞Ⅰ群禽腺病毒的發(fā)病日齡結(jié)合疫苗的保護(hù)效果制定了用FAdV-8b和FAdV-4發(fā)病雞肝組織二價(jià)滅活疫苗或FAdV-8b和FAdV-4細(xì)胞培養(yǎng)二價(jià)滅活疫苗,按照3次(6W頸部皮下、18W和22W胸肌)注射,每次0.5mL/羽的免疫程序,以防控此病。通過比較黃芪多糖+VC+氟苯尼考與單獨(dú)使用干擾素對(duì)該病的治療效果,發(fā)現(xiàn)黃芪多糖+VC+氟苯尼考組合能緩解Ⅰ群禽腺病毒病的感染癥狀,而單獨(dú)使用干擾素沒有治療效果。最后在通過優(yōu)化生物安全體系建設(shè)的基礎(chǔ)上,將動(dòng)物福利體系應(yīng)用于種肉雞生產(chǎn)管理之中,能夠有效降低雞Ⅰ群禽腺病毒病的發(fā)生。上述研究結(jié)果表明,2015～2017年在魯豫京等10個(gè)省市發(fā)生的雞Ⅰ群禽腺病毒病的主要流行血清型是FAdV-8b和FAdV-4;從膠東地區(qū)養(yǎng)雞場(chǎng)分離的FXWH-8b毒株和FXWH-4毒株,也屬于這兩種血清型;2個(gè)分離毒株對(duì)SPF雞均有較強(qiáng)的致病力,可侵害雞的多個(gè)組織器官;本研究構(gòu)建的細(xì)胞培養(yǎng)二價(jià)滅活疫苗和發(fā)病雞肝組織二價(jià)滅活疫苗對(duì)膠東地區(qū)雞群流行的Ⅰ群禽腺病毒病具有良好的保護(hù)效果;黃芪多糖配伍維生素C和氟苯尼考對(duì)Ⅰ群禽腺病毒病有一定的治療效果;關(guān)于雞Ⅰ群禽腺病毒病的防控問題,作者建議并經(jīng)實(shí)踐證明在養(yǎng)雞生產(chǎn)管理中切實(shí)落實(shí)生物安全防控措施,并適當(dāng)貫徹應(yīng)用動(dòng)物福利的理論可以有效地防控此病的發(fā)生。
【圖文】：

認(rèn)為是最大和最復(fù)雜的無囊膜ＤＮＡ病毒。每個(gè)病毒粒子都是由衣殼、核酸芯髓（Ｃｏｒｅ），逡逑暴露在衣殼外的纖突及其相關(guān)蛋白組成。其中衣殼是由六鄰體、五鄰體、纖突三種蛋逡逑白以及少量蛋白通過非共價(jià)鍵結(jié)合形成的正二十面體結(jié)構(gòu)，如圖１－１所示，ＦＡｄＶ的逡逑病毒衣殼共有２５２個(gè)殼粒，其中有２４０個(gè)殼粒分布于每個(gè)面上，構(gòu)成了邋６個(gè)六鄰體逡逑（Ｈｅｘｏｎ），剩下的１２個(gè)殼粒分布于頂角構(gòu)成五鄰體（Ｐｅｎｔｏｎ）。五鄰體可以伸出１－１逡逑（ＩＩ群、ＩＩＩ群腺病毒）或２邋（Ｉ群腺病毒）根長(zhǎng)度在９？７７．５ｎｍ的纖突（Ｆｉｂｅｒ）邋［５２＿５４］。逡逑纖突將五鄰體作為基底，從衣殼的表面開始向外延伸，，中間為桿區(qū)，頂端為頭節(jié)區(qū)。逡逑頭節(jié)區(qū)與五鄰體可以與病毒侵入的細(xì)胞的表面受體特異性結(jié)合，促進(jìn)病毒進(jìn)一步地對(duì)逡逑細(xì)胞進(jìn)行感染［５５，５６］。六鄰體由２４０個(gè)二十面體構(gòu)成。ＦＡｄＶ病毒包含了邋１４條多肽，逡逑多肽２是六鄰體，多肽３是五鄰體周邊蛋白，多肽４是纖維蛋白６２Ｋ，多肽５是核心逡逑蛋白，多肽６是六鄰體相關(guān)蛋白，多肽７是核心蛋白，多肽８是五鄰體相關(guān)蛋白，多逡逑肽９是９個(gè)六鄰體所構(gòu)成的特異性蛋白。在感染細(xì)胞核內(nèi)的病毒粒子常常是晶格狀排逡逑列。該病毒ＤＮＡ的末端蛋白為ＴＰ

只胰腺萎縮；肺淤血水腫壞死；腎臟出血、腫大，較多呈現(xiàn)花斑腎；有的雞只腺胃乳逡逑頭出血；肌胃角質(zhì)膜下出血；脾臟出血水腫；腸道出血，腸黏膜脫落。蛋雞肝臟破裂，逡逑腹腔內(nèi)有血水。見圖２－１。逡逑瞻逡逑圖２－１包涵體肝炎引起的肝臟、腎臟腫大和出血逡逑Ｆｉｇ２－１邋Ｓｗｅｌｌｉｎｇ邋ａｎｄ邋ｈｙｄｒｏｐｅｒｉｃａｒｄｉｕｍ邋ｏｆ邋ｌｉｖｅｒ邋ａｎｄ邋ｋｉｄｎｅｙ邋ｃａｕｓｅｄ邋ｂｙ邋Ｉｎｃｌｕｓｉｏｎ邋ｂｏｄｙ邋ｈｅｐａｔｉｔｉｓ逡逑２．２．２．２心包積水－肝炎綜合征逡逑胸肌和腿肌出血；皮下及腹腔脂肪黃染；肝臟都呈現(xiàn)不同程度的褪色至淡褐色和逡逑黃色，腫大質(zhì)脆，出現(xiàn)充血腫脹，伴有局灶性壞死點(diǎn)和出血點(diǎn)；心臟出現(xiàn)不同程度的逡逑局灶性壞死，心包腔中有淡黃色水樣或膠凍樣的積液，且心臟松弛柔軟；肺淤血水腫逡逑壞死？，胰腺呈點(diǎn)狀壞死，部分雞只胰腺萎縮邊緣出血？，腎臟腫大、出血；法氏囊皺褶逡逑處有出血點(diǎn)并見有黏液滲出；脾臟出血腫大；腸道出血、腸黏膜脫落。見圖２－２。逡逑２３逡逑
【學(xué)位授予單位】：中國農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：S858.31

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2693183