【摘要】：豬精子因其結(jié)構(gòu)的特殊性,對(duì)冷凍過程中的氧化應(yīng)激反應(yīng)異常敏感。能夠在豬精子冷凍-解凍過程中穩(wěn)定發(fā)揮作用,保護(hù)豬精子免受氧化損傷的高效抗氧化劑仍在尋找過程中。精胺、香菇多糖、芹菜素和阿魏酸都是天然、高效的抗氧化劑,且都尚未在精子冷凍領(lǐng)域得到過研究與應(yīng)用。本試驗(yàn)的主要目的就是檢測(cè)精胺、香菇多糖、芹菜素和阿魏酸在冷凍-解凍過程中是否對(duì)豬精子具有保護(hù)作用。來自5頭長(zhǎng)白種公豬的精液樣品被用于本試驗(yàn)研究,將每次采得的5頭公豬的精液進(jìn)行混合并分成若干個(gè)組,向每組中單獨(dú)或配伍添加不同濃度的精胺、香菇多糖、芹菜素和阿魏酸,然后分別檢測(cè)冷凍-解凍后豬精子的活力、活率、質(zhì)膜完整性、線粒體活性、頂體完整性、超氧化物歧化酶(SOD)活力、過氧化氫酶(CAT)活力和丙二醛(MDA)濃度,最后將解凍后精子質(zhì)量較高的實(shí)驗(yàn)組精子與體外培養(yǎng)成熟的卵母細(xì)胞進(jìn)行體外受精試驗(yàn)。獲得如下結(jié)果:1.在豬冷凍稀釋液中添加一定濃度的精胺,可以顯著提高解凍后精子的活力、活率、質(zhì)膜完整性、線粒體活性、頂體完整性和內(nèi)源抗氧化酶活力(SOD和CAT),并顯著降低MDA濃度(P0.05),當(dāng)精胺濃度為3mM時(shí),提升效果最明顯,但精胺對(duì)解凍后精子活力的提升效果維持時(shí)間較短。2.在豬冷凍稀釋液中添加一定濃度的香菇多糖,對(duì)解凍后精子的活力、活率、質(zhì)膜完整性和頂體完整性提升效果較明顯(P0.05),最適的添加濃度為0.6-0.9mg/mL。香菇多糖缺乏針對(duì)精子細(xì)胞內(nèi)部的抗氧化作用,無法顯著提高解凍后精子的線粒體活性和抗氧化酶(SOD和CAT)活力。3.在豬冷凍稀釋液中分別添加一定濃度的芹菜素和阿魏酸,都可以顯著提高解凍后精子的活力、活率、質(zhì)膜完整性、線粒體活性、頂體完整性和抗氧化酶(SOD和CAT)活力,并顯著降低細(xì)胞內(nèi)MDA濃度(P0.05),芹菜素的最適添加濃度為0.2mM,阿魏酸的最適添加濃度為0.25mM。4.芹菜素和阿魏酸在冷凍過程中對(duì)豬精子具有協(xié)同的保護(hù)作用,配伍添加后可以進(jìn)一步提升解凍后豬精子的各項(xiàng)質(zhì)量參數(shù)(P0.05),最適添加濃度為0.1mM芹菜素加0.15mM阿魏酸,且在此濃度下,解凍后精子活力和活率在2h內(nèi)不會(huì)顯著下降(P0.05)。5.香菇多糖、芹菜素和阿魏酸在各自的最適濃度下都可以幫助提高冷凍-解凍后豬精子的受精能力,進(jìn)而提升體外受精試驗(yàn)后受精卵的卵裂率。在冷凍稀釋液中配伍添加0.6mg/mL的香菇多糖、0.1mM的芹菜素和0.15mM的阿魏酸,以解凍后的精子進(jìn)行體外受精試驗(yàn),受精卵的卵裂率可被進(jìn)一步提高(P0.05)。
【圖文】：

精胺結(jié)構(gòu)式Fig.2-1.Structuralformulaofspermine

圖 4-1 芹菜素結(jié)構(gòu)式Fig. 4-1. Structural formula of apigenin氧基-4-羥基肉桂酸，是一種天然的酚酸類物草藥中的有效活性成分。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明阿魏酸
【學(xué)位授予單位】：西北農(nóng)林科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：S828

【參考文獻(xiàn)】

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1 呂國(guó)英;范雷法;張作法;潘慧娟;;香菇多糖研究進(jìn)展[J];浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào);2009年02期

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本文編號(hào)：2667268