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過表達(dá)和干擾表達(dá)miR-370對(duì)牛OLR1基因表達(dá)的影響

發(fā)布時(shí)間:2020-05-09 05:47
【摘要】:mi RNAs是一種內(nèi)源性的具有調(diào)控作用的非編碼RNA,其大小為20~25 nt,本身不具有開放閱讀框。miRNA與靶基因3’UTR通過堿基互補(bǔ)配對(duì)的方式,降解靶mRNA或者阻遏靶mRNA的翻譯,從而調(diào)控靶基因的表達(dá)。研究表明,miRNA參與生物體內(nèi)各種各樣的調(diào)節(jié)途徑,如發(fā)育、細(xì)胞增殖和凋亡以及脂肪代謝等。氧化低密度脂蛋白受體1(OLR1)基因與脂肪沉積過程密切相關(guān),已有的研究表明,OLR1基因影響奶牛的乳脂率及肉牛的肉品質(zhì)性狀,并且OLR1基因3’UTR存在bta-miR-370的靶序列互補(bǔ)區(qū),當(dāng)OLR1基因的3’UTR發(fā)生堿基突變時(shí),該miRNA的結(jié)合位點(diǎn)消失。為了進(jìn)一步驗(yàn)證該miRNA是否對(duì)牛OLR1基因具有直接的調(diào)控作用。本研究通過向牛脂肪細(xì)胞中轉(zhuǎn)染miRNA的類似物及阻抑物,分別對(duì)牛脂肪細(xì)胞中的miR-370進(jìn)行過表達(dá)和干擾表達(dá),24 h后提取細(xì)胞總RNA并反轉(zhuǎn)錄為cDNA,利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qRT-PCR)技術(shù),檢測(cè)OLR1基因的表達(dá)量,結(jié)果表明:轉(zhuǎn)染miR-370 mimics實(shí)驗(yàn)組OLR1基因的表達(dá)量比轉(zhuǎn)染mi R-370 mimics control的對(duì)照組顯著降低(p0.01);而且轉(zhuǎn)染miR-370 inhibitor實(shí)驗(yàn)組OLR1基因的表達(dá)量比轉(zhuǎn)染miR-370 inhibitor control對(duì)照組顯著升高(p0.01)。該研究結(jié)果提示miR-370對(duì)牛OLR1基因表達(dá)具有顯著的負(fù)向調(diào)控作用,為進(jìn)一步闡述OLR1基因?qū)π誀畹挠绊憴C(jī)理研究方面提供了理論依據(jù)。
【學(xué)位授予單位】:西北農(nóng)林科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:S823

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 李紅飛;過表達(dá)和干擾表達(dá)miR-370對(duì)牛OLR1基因表達(dá)的影響[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2015年

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本文編號(hào):2655684

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