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副豬嗜血桿菌nanH和lsgB基因缺失株的免疫保護(hù)力和毒力研究

發(fā)布時間:2020-05-03 20:02
【摘要】:副豬嗜血桿菌(Haemophilus parasuis)是一種定植于豬上呼吸道的革蘭氏陰性條件致病菌,豬在免疫力低下或者應(yīng)激狀態(tài)下時,該菌可引起格拉瑟氏病(Gl?sser’s disease)。盡管副豬嗜血桿菌毒力因子及致病機(jī)理仍不清楚,但病原菌表面唾液酸化是其逃避和抵抗宿主免疫系統(tǒng)重要的機(jī)制,而且已有體外實(shí)驗(yàn)表明副豬嗜血桿菌的唾液酸酶和唾液酸轉(zhuǎn)移酶與細(xì)菌毒力密切相關(guān),所以本論文對副豬嗜血桿菌唾液酸基因缺失株JS0135△nanH和唾液酸轉(zhuǎn)移酶基因缺失株SH0165△lsgB對仔豬的免疫保護(hù)效果和致病能力進(jìn)行了研究,所取的主要研究結(jié)果如下。1.JS0135△nanH和SH0165△lsgB對仔豬的免疫保護(hù)將JS0135△nanH和SH0165△lsgB通過肌肉途徑和腹腔途徑免疫仔豬,商業(yè)滅活疫苗免疫和PBS免疫作為陽性對照和陰性對照,然后用強(qiáng)毒株SH0165攻毒。實(shí)驗(yàn)中檢測仔豬血清中副豬嗜血桿菌抗體水平上升的速度,發(fā)現(xiàn)JS0135△nanH免疫組仔豬抗體水平上升速度快于SH0165△lsgB免疫組仔豬,SH0165△lsgB免疫組仔豬快于商業(yè)滅活疫苗免疫組仔豬;JS0135△nanH免疫組通過腹腔途徑免疫的仔豬顯著快于通過肌肉途徑免疫的仔豬,SH0165△lsgB免疫組仔豬兩種免疫途徑?jīng)]有明顯差異。仔豬攻毒后綜合評價不同免疫組的免疫保護(hù)效果,JS0135△nanH優(yōu)于SH0165△lsgB,SH0165△lsgB優(yōu)于商業(yè)滅活苗。2.野生株和缺失株感染細(xì)胞刺激細(xì)胞炎性因子將JS0135和JS0135△nanH,SH0165和SH0165△lsgB分別感染3D4/2細(xì)胞,4h后檢測細(xì)胞炎性因子的mRNA表達(dá)水平,發(fā)現(xiàn)IL-1α、IL-8和TNF-α差異性表達(dá)。然后在2h、4h和8h時,檢測IL-1α、IL-8和TNF-α的表達(dá)情況,結(jié)果顯示缺失株較野生株刺激細(xì)胞產(chǎn)生更高的細(xì)胞炎性因子(P≤0.01)。3.野生株和缺失株對仔豬攻毒將JS0135和JS0135△nanH,SH0165和SH0165△lsgB分別對仔豬進(jìn)行攻毒,通過記錄仔豬臨床癥狀、大體病理變化和組織器官分菌,結(jié)果表明SH0165△lsgB相對野生株SH0165對仔豬致病力明顯下降,JS0135△nanH相對野生株JS0135對仔豬致病力沒有明顯改變;JS0135△nanH在存活下來的仔豬體內(nèi)全部被清除。
【圖文】:

示意圖,體溫測量,示意圖


3.2.1.5 仔豬免疫攻毒前后體溫測量圖 3-1 仔豬免疫保護(hù)實(shí)驗(yàn)示意圖Fig. 3-1 Schematic diagram of piglets immune protection experiment

示意圖,仔豬,體溫,時間點(diǎn)


.6 仔豬免疫攻毒后臨床癥狀及評分標(biāo)準(zhǔn)圖 3-2 仔豬測量體溫時間點(diǎn)示意圖Fig. 3-2 Schematic diagram of piglts measuring rectal temperature time
【學(xué)位授予單位】:華中農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號】:S852.61

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