【摘要】：抑制素(Inhibin,INH)是一種主要由雄性動(dòng)物睪丸支持細(xì)胞和雌性動(dòng)物卵巢顆粒細(xì)胞分泌的糖蛋白激素。抑制素主要生物學(xué)功能是特異性作用于垂體,抑制卵泡刺激素(Follicle-stimulating hormone,FSH)的合成和分泌,且呈劑量依賴關(guān)系。此外,抑制素還可以通過(guò)旁分泌或自分泌途徑直接作用于性腺而影響其功能。抑制素免疫是指通過(guò)特異性抗體減弱動(dòng)物體內(nèi)內(nèi)源性抑制素對(duì)FSH分泌的抑制作用,從而使動(dòng)物體內(nèi)FSH水平上升,達(dá)到增強(qiáng)動(dòng)物繁殖力的效果。本研究利用抑制素主動(dòng)免疫崇明白山羊,分別探究抑制素免疫對(duì)其體內(nèi)相關(guān)激素水平、母羊超數(shù)排卵及公羊睪丸發(fā)育的影響。本文共分為以下兩部分:1、抑制素主動(dòng)免疫結(jié)合常規(guī)超排處理(CIDR-FSH-PGF2α-LH),探究其對(duì)崇明白山羊超數(shù)排卵效果的影響在第1 d、21 d利用重組抑制素蛋白對(duì)崇明白山羊(n=10)共進(jìn)行2次免疫,并設(shè)置對(duì)照組(n=10)。在21 d埋植CIDR,32 d開(kāi)始采用FSH三日遞減法進(jìn)行超排處理。發(fā)情后配種,48 h后手術(shù)沖胚。試驗(yàn)期間測(cè)量血清FSH、黃體生成素(Luteotropic hormone,LH)、抗繆勒管激素(Anti-Mullerian hormone,AMH)、孕酮(Progesterone,P)和雌二醇(Estradiol,E2)激素水平;沖胚時(shí)觀察單側(cè)卵巢的排卵點(diǎn)個(gè)數(shù)和沖胚數(shù)。結(jié)果表明:試驗(yàn)組單側(cè)卵巢的排卵點(diǎn)個(gè)數(shù)(11.69±1.40個(gè))及沖胚數(shù)(9.88±1.64個(gè))均顯著高于對(duì)照組(8.20±1.44個(gè);6.92±1.62個(gè))(P0.01);試驗(yàn)組血清FSH、AMH激素水平顯著高于對(duì)照組(P0.05);試驗(yàn)組和對(duì)照組血清LH、P、E2激素水平并沒(méi)有顯著差異(P0.05)。2、通過(guò)抑制素主動(dòng)免疫崇明白山羊斷奶公羔羊,探究其對(duì)公羔羊生殖發(fā)育的影響在第0 d、21 d、42 d、63 d利用重組抑制素蛋白對(duì)崇明白山羊斷奶公羔羊(n=6)共進(jìn)行4次免疫,并設(shè)置對(duì)照組(n=6)。試驗(yàn)期間測(cè)量體重(Body weight,BW)、陰囊周長(zhǎng)(Scrotum circumference,SC)、血清FSH、LH、睪酮(Testosterone,T)激素水平,并第84 d閹割后制作睪丸組織石蠟切片、檢測(cè)睪丸組織生殖相關(guān)基因的表達(dá)情況。結(jié)果顯示:試驗(yàn)期間免疫組和對(duì)照組BW、SC并沒(méi)有顯著差異(P0.05);閹割時(shí),免疫組和對(duì)照組體重(21.87±2.19 kg vs 23.58±5.13 kg)、陰囊周長(zhǎng)(20.95±0.74 cm vs 21.57±1.65 cm)、睪丸重量(Testes weight,TW)(56.88±4.96 g vs 62.99±4.17 g)沒(méi)有顯著差異(P0.05);石蠟組織切片觀察發(fā)現(xiàn)睪丸組織在組織學(xué)上也無(wú)顯著差異;免疫組血清FSH、T激素水平在二免7 d后顯著高于對(duì)照組(P0.05),其余時(shí)間上無(wú)顯著差異(P0.05);免疫組和對(duì)照組血清LH激素水平并無(wú)顯著差異(P0.05);抑制素免疫極顯著提高Dmrtc2表達(dá)水平(P0.01),顯著提高SOX30表達(dá)水平(P0.05),顯著降低AR表達(dá)水平(P0.05),對(duì)FSHR、LHR、GPx4、DDX4表達(dá)水平?jīng)]有顯著影響(P0.05)。結(jié)論:抑制素免疫能顯著提高崇明白山羊超排后FSH和AMH激素水平,從而顯著提高超排效果;抑制素免疫對(duì)崇明白山羊公羔羊生殖發(fā)育并沒(méi)有顯著促進(jìn)作用。
【圖文】：

- 50 μL 50 μL adiol 激素檢測(cè)釋血清樣品及每孔加入的試劑外，其余步驟與 1.2.7.4 相同計(jì)及分析S20.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，數(shù)據(jù)以“均值±標(biāo)準(zhǔn)差”的形差分析法，P<0.05 或 P<0.01 表示差異顯著或極顯著。分析抗體水平檢測(cè)間動(dòng)物抑制素抗體水平如圖 1-1 所示。在第二次免疫后，試。超排期間，試驗(yàn)組抑制素抗體水平顯著高于對(duì)照組（P<間。

驗(yàn)組 (●)及對(duì)照組 (○)試驗(yàn)羊血清 FSH(a)與 LH(b)的變化（均值 1-2. Serum follicle-stimulating hormone (FSH) (a) and luteinizing hconcentrations (mean±SD) in immunized group (●) and control group示差異顯著（P<0.05），**表示差異極顯著（P<0.01）， 為 PGF免疫對(duì)崇明白山羊超數(shù)排卵中血清 AMH 的影響3 所示，抑制素主動(dòng)免疫崇明白山羊?qū)ζ?AMH 分泌有促開(kāi)始階段，試驗(yàn)組動(dòng)物 AMH 水平顯著高于對(duì)照組（P<0驗(yàn)組 AMH 水平均高于對(duì)照組，，但并無(wú)顯著差異（P>0.05
【學(xué)位授予單位】：上海海洋大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類(lèi)號(hào)】：S827

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2614954