【摘要】：circRNA(circular RNA,circRNA)一類特殊的內(nèi)源性非編碼RNA(non-coding RNA,ncRNA)分子,是近幾年RNA領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)。本研究主要通過催乳素處理的奶牛乳腺上皮細(xì)胞的高通量測序結(jié)果分析,初步篩選出存在差異表達(dá)的circRNA,并在奶牛乳腺上皮細(xì)胞中驗(yàn)證其環(huán)形結(jié)構(gòu)。初步篩選后,選擇circHIPK3作為研究對象,探究circHIPK3對乳腺上皮細(xì)胞增殖分化的影響。STAT5 inhibitor實(shí)驗(yàn)探究circHIPK3與催乳素誘導(dǎo)的STAT5通路的關(guān)系,并進(jìn)一步探究STAT5inhibitor處理對circHIPK3表達(dá)量和對乳腺上皮細(xì)胞增殖的影響。最后,探究可變剪接影響因子SRPK1、SRPK2、ADAR、ILF3相關(guān)基因?qū)ircHIPK3形成的影響。本研究主要取得的結(jié)果如下:(1)成功構(gòu)建了催乳素處理下奶牛乳腺上皮細(xì)胞的circRNA文庫,其中findcirc鑒定出的circRNA總共有16364條。通過分析發(fā)現(xiàn)兩個(gè)不同狀態(tài)下顯著上調(diào)的circRNA的數(shù)量為6760,存在顯著下調(diào)的circRNA的數(shù)量為5991,說明催乳素對circRNA的表達(dá)有影響。(2)成功驗(yàn)證了10個(gè)奶牛乳腺上皮細(xì)胞中存在的circRNA,說明circRNA在奶牛乳腺上皮細(xì)胞中是大量存在的。(3)circHIPK3在奶牛與C57BL/6J小鼠不同組織(心、肝、脾、肺、腎、胃、腸和乳腺)中均有表達(dá),說明了circHIPK3具有一定的保守性。(4)揭示了circHIPK3促進(jìn)HC11的增殖,抑制4T1細(xì)胞的增殖,對HC11的分化沒有影響。(5)circHIPK3的表達(dá)量受到催乳素及其誘導(dǎo)的STAT5信號通路的影響,催乳素會(huì)顯著提高circHIPK3的表達(dá)量,而STAT5 inhibitor處理將顯著抑制circHIPK3的表達(dá)量。STAT5 inhibitor處理也會(huì)抑制乳腺上皮細(xì)胞的增殖。(6)催乳素通過STAT5信號通路改變可變剪接影響因子SRPK1、SRPK2、ADAR、ILF3等基因的表達(dá)量從而間接影響circHIPK3的形成。
【學(xué)位授予單位】：江蘇師范大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：S823

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

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2 李培飛;陳聲燦;邵永富;蔣孝明;肖丙秀;郭俊明;;環(huán)狀RNA的生物學(xué)功能及其在疾病發(fā)生中的作用[J];生物物理學(xué)報(bào);2014年01期

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本文編號：2613907