【摘要】：為了對(duì)水貂阿留申病毒(ADV)進(jìn)行快速、準(zhǔn)確地鑒定,試驗(yàn)根據(jù)基因庫中ADV的NS1基因核苷酸序列,設(shè)計(jì)合成了一對(duì)特異性引物,經(jīng)過反應(yīng)條件的優(yōu)化,建立了水貂阿留申病的PCR檢測(cè)方法,對(duì)陽性病料進(jìn)行特異性核酸擴(kuò)增及產(chǎn)物測(cè)序,并對(duì)水貂腸炎細(xì)小病毒(MEV)、犬瘟熱病毒(CDV)等病原核酸進(jìn)行擴(kuò)增檢測(cè)該方法的特異性;用10倍系列稀釋的ADV進(jìn)行擴(kuò)增檢測(cè)敏感性;用該方法檢測(cè)臨床樣品并與對(duì)流免疫電泳法進(jìn)行了比較。結(jié)果表明:ADV陽性樣品有明顯目的條帶(365 bp)出現(xiàn),MEV、CDV均無特異條帶出現(xiàn),最低能檢測(cè)到的病毒核酸量為2.53 ng/μL;臨床樣品檢測(cè)表明PCR檢出率為90%,對(duì)流免疫電泳法檢出率為83%。
[Abstract]:In order to identify the (ADV) of mink Aleutian virus quickly and accurately, a pair of specific primers were designed and synthesized according to the nucleotide sequence of NS1 gene of ADV in gene bank, and the reaction conditions were optimized. A PCR method for detection of Aleutian disease in mink was established. The specific nucleic acid amplification and product sequencing were carried out on the positive venereal materials. The specificity of the method was detected by amplification of the pathogenic nucleic acids such as mink enteritis parvovirus (MEV), canine distemper virus (CDV). A 10-fold series diluted ADV was used to detect the sensitivity, and the method was used to detect the clinical samples and compared with the convection immunoelectrophoresis method. The results showed that there were obvious target bands (365 bp) and no specific bands, the lowest detectable amount of virus nucleic acid was 2.53 ng/ 渭 L, the detection rate of PCR and convection immunoelectrophoresis was 90 ng/ 渭 L and 83%, respectively.
【作者單位】： 青島農(nóng)業(yè)大學(xué);
【基金】：青島農(nóng)業(yè)大學(xué)應(yīng)用型人才培養(yǎng)特色名校建設(shè)工程大學(xué)生科技創(chuàng)新基金項(xiàng)目 山東省高等學(xué)校優(yōu)勢(shì)學(xué)科人才團(tuán)隊(duì)
【分類號(hào)】：S858.92

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本文編號(hào)：2241602