發(fā)布時間：2018-04-18 03:39

  本文選題：奶牛 + 大腸桿菌　； 參考：《內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學》2015年碩士論文

【摘要】：大腸桿菌(Escherichia coli,E. coli)是引起奶牛乳腺炎的一種重要病原菌,并可引起奶牛乳腺纖維化,患牛泌乳量降低,甚至乳腺失去泌乳功能而導致奶牛淘汰。奶牛乳腺成纖維細胞(BMFB)是乳腺組織中主要間質(zhì)細胞,研究大腸桿菌對體外培養(yǎng)奶牛乳腺成纖維細胞相關因子和受體表達及其信號轉(zhuǎn)導途徑的影響,對奶牛乳腺纖維化的防治具有重要意義。本研究采用奶牛乳腺炎源性熱滅活的E.coli (0 CFU/mL、105CFU/mL、106 CFU/mL和108CFU/mL)作用于體外培養(yǎng)的BMFB,于不同的時間點(6h、12 h、24 h和48 h)提取細胞的總mRNA和總蛋白,采用實時熒光定量PCR法(RT-PCR)和Western-blot方法檢測TLR2、TLR4的mRNA和蛋白表達水平；采用Western-blot方法檢測核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB和AP-1的蛋白表達水平；采用RT-PCR和Western-blot方法檢測促纖維化細胞因子TGF-β1、bFGF、PDGF-BB及其受體TβRI、FGFR2、 PDGFRβ的mRNA口蛋白表達。結(jié)果表明：(1)不同濃度的熱滅活E. coli菌液在不同的時間點均可以顯著促BMFBTGF-β1、bFGF、PDGF-BB及其受體TβRI、FGFR2、PDGFRβ的mRNA和蛋白的表達。BMFBTGF-β1、bFGF、PDGF-BB及其受體TPRI、FGFR2、PDGFRβ的mRNA的表達呈正時效關系,E. coli的作用早期mRNA表達量呈升高趨勢,隨著作用時間延長mRNA表達量升高趨勢逐漸減弱；各因子及其受體的蛋白表達均是隨著作用時間延長而升高,但是在作用后期升高趨勢降低,呈正時效關系。(2)不同濃度的熱滅活E. coli菌液作用于BMFB,在不同的時間點均可以顯著促進BMFB TLR2和TLR4 mRNA和蛋白的表達,且呈正時效性。TLR2 mRNA和蛋白表達水平顯著升高,并且TLR2 mRNA和蛋白的表達呈時效性和量效性,于48 h達到最高(P0.05)。TLR4 mRNA和蛋白表達水平顯著升高,并且TLR4 mRNA和蛋白的表達呈時效性和量效性,分別于24 h和12h達到最高后逐漸下降(P0.05)。(3) E.coli也顯著促進了BMFB p-NF-KB-p65和p-c-jun蛋白的表達,基本呈正時效關系。p-NF-KB-p65的表達與大腸桿菌作用濃度呈現(xiàn)正量效關系,表達量隨作用時間延長先升高后逐漸降低,于12h達到高峰后逐漸下降(p0.05)。AP-1的表達與大腸桿菌作用濃度呈現(xiàn)正量效關系,表達量隨作用時間延長先升高后逐漸降低,于24h達到高峰后逐漸下降(p0.05)。綜上所述,熱滅活的E. coli可以促進體外培養(yǎng)的BMFB的TGF-β1、bFGF、 PDGF-BB、TGFβRI、FGFR2和PDGFRβ mRNA和蛋白的表達,并且呈一定的時效與量效關系。熱滅活的E. coli可以促進體外培養(yǎng)的BMFB TLR2和TLR4 mRNA和蛋白的表達,并且呈現(xiàn)一定的時效關系。TLR2和TLR4均參與了E. coli對BMFB的作用。熱滅活的E. coli可以促進體外培養(yǎng)的BMFB p-NF-κB-p-65和p-c-jun蛋白的表達。E. coli對BMFB可通過激活NF-κB和AP-1信號轉(zhuǎn)導途徑產(chǎn)生并分泌促纖維化細胞因子。
[Abstract]:......
【學位授予單位】：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：S852.61

【參考文獻】

相關期刊論文 前10條

1 劉琳;轉(zhuǎn)錄激活蛋白-1與纖維化病變的關系[J];國外醫(yī)學.口腔醫(yī)學分冊;2004年S1期

2 洪微;細胞外基質(zhì)與成纖維細胞的相互作用及其在硬皮病中的意義[J];國外醫(yī)學.皮膚性病學分冊;1996年03期

3 曾錦章;細胞信號傳導與轉(zhuǎn)錄因子AP-1活性的調(diào)節(jié)[J];國外醫(yī)學.遺傳學分冊;1999年04期

4 董鳳芹;腎纖維化發(fā)病機制的研究進展[J];國外醫(yī)學.泌尿系統(tǒng)分冊;2003年04期

5 丁旭娜;王鳳龍;丁玉林;楊磊;李瑜;尹景峰;趙占寬;;奶牛乳腺上皮細胞和成纖維細胞的體外培養(yǎng)與鑒定[J];黑龍江畜牧獸醫(yī);2012年05期

6 楊一新;李桂源;;LPS所介導的信號轉(zhuǎn)導通路研究進展[J];中南大學學報(醫(yī)學版);2006年01期

7 王小琴;;腎安提取液對3T3細胞增殖及α-肌動蛋白表達影響的實驗研究[J];中醫(yī)藥導報;2006年10期

8 伊海英;孫曉艷;付小兵;任明姬;張廣田;;堿性成纖維細胞生長因子的研究進展[J];解放軍醫(yī)學雜志;2008年06期

9 陳惠;楊耀防;;bFGF的生物作用分子機制研究進展[J];九江醫(yī)學;2009年01期

10 秦旭平,廖端芳,李元建;血管平滑肌細胞增殖及其調(diào)控[J];中國動脈硬化雜志;2001年05期

相關會議論文 前1條

1 楊紅明;李鳳玉;柴家科;于燕;京薩;曹衛(wèi)紅;許明火;盛志勇;;內(nèi)毒素對正常人皮膚成纖維細胞增殖及TGF-β1、IFN-γ分泌的誘導作用[A];第八屆全國燒傷外科學年會論文匯編[C];2007年

相關博士學位論文 前1條

1 黃群華;血小板源生長因子及其受體在低氧性肺血管平滑肌細胞增殖中的調(diào)節(jié)作用及其分子機制探討[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;1999年

相關碩士學位論文 前9條

1 馬鵬;埃希氏大腸桿菌脂多糖與其細胞外膜特性關系的研究[D];江南大學;2011年

2 李春穴;內(nèi)毒素刺激對大鼠肺泡巨噬細胞內(nèi)NF-κB和AP-1活性的影響及其對TNF-α表達的調(diào)控作用[D];第三軍醫(yī)大學;2002年

3 張杰;高氧致早產(chǎn)鼠慢性肺疾病中血小板源性生長因子及受體變化的研究[D];中國醫(yī)科大學;2004年

4 石煥;TGF-β_1及其受體在胰腺纖維化大鼠中表達的研究[D];山東大學;2005年

5 郭瓊;TGFβ1及其Ⅰ、Ⅱ型受體在大鼠全胚及心、肝、肺、腎發(fā)育過程中的表達[D];四川大學;2007年

6 王宇涵;鱉甲煎丸與羅格列酮對由TGF-β1刺激的大鼠肝星狀細胞活化和TGF-β/Smad信號轉(zhuǎn)導通路的影響[D];河北醫(yī)科大學;2012年

7 田璐;LPS對小鼠乳腺組織中功能受體TLR4表達的影響[D];南京農(nóng)業(yè)大學;2009年

8 李瑜;TGF-β_1和bFGF對奶牛乳腺細胞增殖和凋亡的影響[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學;2012年

9 黃力;UUO幼鼠腎間質(zhì)纖維化中周細胞轉(zhuǎn)分化趨勢[D];山西醫(yī)科大學;2014年

，

本文編號：1766666