本文選題：胰島素 + 胰高血糖素��； 參考：《中國獸醫(yī)學(xué)報》2017年02期

【摘要】：為確定胰島素(insulin,INS)和胰高血糖素(glucagon,GLN)對奶牛肝細(xì)胞脂合成作用的影響,本試驗體外培養(yǎng)犢牛原代肝細(xì)胞,分別用不同濃度的INS和GLN處理肝細(xì)胞:對照組(0nmol/L)、濃度梯度組(1,10,100,1 000nmol/L)。培養(yǎng)1h后分別用免疫印跡(Western blot,WB)方法、熒光定量PCR(qRT-PCR)方法以及細(xì)胞免疫熒光(immunofluorescence,IF)方法檢測INS和GLN處理體外培養(yǎng)肝細(xì)胞對關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白-1c(SREBP-1c)mRNA表達(dá)水平,SREBP-1c核質(zhì)分布以及下游靶基因脂代謝關(guān)鍵酶乙酰輔酶A羧化酶(ACC)和脂肪酸合成酶(FAS)mRNA表達(dá)水平的影響。結(jié)果顯示:INS處理使SREBP-1c的表達(dá)水平和轉(zhuǎn)錄活性顯著升高,入核量顯著增加,其下游的脂合成關(guān)鍵酶ACC和FAS的基因表達(dá)水平也顯著升高。而與之相反,GLN處理使SREBP-1c的表達(dá)水平和轉(zhuǎn)錄活性顯著降低,入核量顯著減少,其下游的脂合成關(guān)鍵酶ACC和FAS的基因表達(dá)水平也顯著降低。以上結(jié)果說明,INS可通過增強SREBP-1c的活性從而促進肝細(xì)胞脂合成,增加肝脂沉積;而GLN則通過抑制SREBP-1c的活性從而降低肝細(xì)胞脂合成。
[Abstract]:In order to determine the effect of insulin insulinine (ins) and glucagonine glucagonine (GLN) on lipid synthesis of bovine hepatocytes, primary hepatocytes of calves were cultured in vitro and treated with different concentrations of INS and GLN: control group (0 nmol / L), concentration gradient group (1101001 000 nmol / L).After 1 hour culture, Western blotblotWB method was used, respectively.Fluorescence quantitative PCR qRT-PCR and immunofluorescence fluorescence assay to detect the expression of SREBP-1c mRNA in cultured hepatocytes treated with INS and GLN in vitro, the distribution of SREBP-1c nucleoplasm and the lipid metabolism of downstream target genes in hepatocytes treated with GLN and INS were determined.Effects of acetyl coA carboxylase (ACCs) and fatty acid synthase (FASN) on mRNA expression.The results showed that the expression level and transcription activity of SREBP-1c were significantly increased, the amount of nucleation was increased significantly, and the gene expression levels of ACC and FAS, the key enzymes of lipid synthesis in the downstream, were significantly increased by the treatment of 1: ins.On the contrary, GLN treatment significantly decreased the expression level and transcriptional activity of SREBP-1c, decreased the amount of nucleation, and the gene expression level of ACC and FAS, the key enzymes of lipid synthesis.These results suggest that ins can promote lipid synthesis and increase lipid deposition in hepatocytes by enhancing the activity of SREBP-1c, while GLN can decrease lipid synthesis in hepatocytes by inhibiting the activity of SREBP-1c.
【作者單位】： 吉林大學(xué)動物醫(yī)學(xué)學(xué)院;
【基金】：國家自然科學(xué)基金面上資助項目(31272621)
【分類號】：S858.23

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