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東北黑熊源糞腸球菌EfaA基因的克隆表達(dá)及生物信息學(xué)分析

發(fā)布時(shí)間:2018-03-16 09:28

  本文選題:東北黑熊 切入點(diǎn):糞腸球菌心內(nèi)膜炎抗原(EfaA) 出處:《中國(guó)畜牧獸醫(yī)》2017年08期  論文類型:期刊論文


【摘要】:為檢測(cè)熊源糞腸球菌心內(nèi)膜炎抗原(EfaA)基因,用于快速檢測(cè)東北黑熊糞腸球菌感染病例,本試驗(yàn)根據(jù)GenBank登錄的糞腸球菌EfaA基因序列(登錄號(hào):U03756.1)合成了1對(duì)PCR引物,通過PCR法擴(kuò)增合成長(zhǎng)度為689bp的目的片段。將PCR產(chǎn)物克隆于pMD19-T載體,之后將其轉(zhuǎn)入大腸桿菌DH5α感受態(tài)細(xì)胞篩選陽性克隆。提取擴(kuò)增后的重組質(zhì)粒pMD19-T-EfaA并進(jìn)行PCR、酶切鑒定、序列測(cè)定及蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)。結(jié)果顯示,本試驗(yàn)成功克隆出熊源糞腸球菌EfaA基因,與GenBank登錄的ATCC 29212菌株同源性為100.0%。本試驗(yàn)成功構(gòu)建了重組克隆載體pMD19-T-EfaA,并對(duì)測(cè)序結(jié)果進(jìn)行了蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的預(yù)測(cè),為進(jìn)一步建立黑熊糞腸球菌病的診斷方法提供了理論依據(jù),同時(shí)也為黑熊疾病的防制奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:涓烘嫻嬬唺婧愮勃鑲犵悆鑿屽績(jī)鍐呰啘鐐庢姉鍘,

本文編號(hào):1619316

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