二甲雙胍對犬乳腺腫瘤細胞周期及其相關蛋白的影響
本文關鍵詞: 二甲雙胍 犬乳腺腫瘤 細胞周期 cyclin D p 出處:《畜牧與獸醫(yī)》2017年04期 論文類型:期刊論文
【摘要】:為研究二甲雙胍對犬乳腺腫瘤細胞增殖和細胞周期的影響,以犬乳腺腫瘤CHMm和CHMp為模型,采用終濃度為0、5、10、20、40mmol/L二甲雙胍對其進行干預,應用CCK-8法檢測細胞增殖活性,流式細胞儀檢測細胞周期分布比例,再通過Western blot檢測細胞周期相關蛋白cyclin D1和p27的表達情況。二甲雙胍作用48 h后,與對照組比較,CHMm細胞試驗各組的成活率顯著降低(P0.05),而CHMp細胞除了5 mmol/L組(P0.05),其他試驗各組的成活率也顯著低于對照組(P0.05),并且均呈現(xiàn)一定的濃度依賴性。流式細胞儀分析細胞分布比例發(fā)現(xiàn),CHMm的G0/G1期細胞比例從(38.7±5.89)%增加到(70.36±5.78)%,CHMp的G0/G1期細胞比例也從(37.03±4.23)%增加到(54.92±4.67)%。隨著二甲雙胍作用濃度的增加,CHMm和CHMp細胞內(nèi)cyclin D1表達量呈現(xiàn)減少的趨勢,而p27表達量呈現(xiàn)上升的趨勢。研究結果表明,二甲雙胍可以抑制犬乳腺腫瘤細胞體外增殖能力,誘導細胞發(fā)生G0/G1期阻滯,并下調(diào)cyclin D1和上調(diào)p27細胞周期相關蛋白表達量,從而為犬乳腺腫瘤治療提供一定的理論基礎。
[Abstract]:In order to study the effect of metformin on the proliferation and cell cycle of canine mammary tumor cells, CHMm and CHMp were used as models, and the final concentration of 0 5 ~ (10) 10 ~ (20) 渭 mol / L metformin was used to investigate the effect of metformin on the proliferation of canine breast tumor cells. The cell proliferation activity was detected by CCK-8 assay. Flow cytometry was used to detect the cell cycle distribution and the expression of cell cycle related proteins cyclin D1 and p27 was detected by Western blot. Metformin was treated with metformin for 48 h. Compared with the control group, the survival rate of CHMp cells in each group was significantly lower than that in the control group. The survival rate of CHMp cells was significantly lower than that of the control group in a concentration dependent manner, except for the 5 mmol/L group. Flow cytometry showed that the survival rate of the other groups was significantly lower than that of the control group. The percentage of G _ 0 / G _ 1 phase cells increased from 38.7 鹵5.89% to 70.36 鹵5.78% from 37.03 鹵4.23% to 54.92 鹵4.67%. The expression of cyclin D1 decreased with the increase of metformin concentration. The results showed that metformin could inhibit the proliferation of canine breast tumor cells, induce G _ 0 / G _ 1 arrest, down-regulate cyclin D1 and up-regulate the expression of p27 cell cycle related proteins. It provides a theoretical basis for the treatment of canine breast tumor.
【作者單位】: 東北農(nóng)業(yè)大學動物醫(yī)學學院;
【基金】:國家自然基金(31372492和31672617) 國家重點研究項目(2016YFD0501008)
【分類號】:S858.292
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