本文關(guān)鍵詞： 豬基因組DNA 堿裂解法 酚-氯仿法 PCR擴(kuò)增　出處：《華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)》2017年04期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：以大白豬背最長肌、脾臟、耳組織為材料,用堿裂解法和酚-氯仿法分別提取豬基因組DNA,用紫外分光光度計(jì)、瓊脂糖凝膠電泳、PCR擴(kuò)增檢測DNA的產(chǎn)量和質(zhì)量,結(jié)果發(fā)現(xiàn)2種方法提取的DNA產(chǎn)量沒有明顯差異。通過豬MC4R、TEF-1基因特異引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增均能得到目的條帶。堿裂解法提取的DNA原液稀釋5倍、10倍后作為模板均獲得了較為穩(wěn)定的擴(kuò)增產(chǎn)物。該結(jié)果表明,簡單、快速、無毒的堿裂解法適用于動(dòng)物定性PCR檢測時(shí)DNA的提取。
[Abstract]:The porcine genomic DNA was extracted from the longissimus dorsi muscle, spleen and ear tissue by alkaline lysis method and phenol-chloroform method, respectively. The genomic DNA was extracted by UV spectrophotometer and agarose gel electrophoresis. The yield and quality of DNA were detected by PCR amplification. The results showed that there was no significant difference in the yield of DNA extracted by the two methods. The target bands could be obtained by PCR amplification with TEF-1 gene specific primers. DNA extracted by alkaline lysis was diluted by 5 times. After 10 times as template, stable amplification products were obtained. The results showed that the simple, rapid and non-toxic alkaline lysis method was suitable for the extraction of DNA in animal qualitative PCR detection.
【作者單位】： 河南牧業(yè)經(jīng)濟(jì)學(xué)院動(dòng)物科技學(xué)院;華中農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)業(yè)動(dòng)物遺傳育種與繁殖教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;生豬健康養(yǎng)殖協(xié)同創(chuàng)新中心;華中農(nóng)業(yè)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心;
【基金】：湖北省科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(2014ABA033;2014ABA025)
【分類號】：Q78;S828
【正文快照】： 提取動(dòng)物基因組DNA的方法有多種,其中經(jīng)典的方法有酚抽提法、甲酰胺裂解法、異丙醇沉淀法、鹽酸胍裂解玻璃棒纏繞法及酚-氯仿法等[1],這些方法都能獲得高質(zhì)量DNA;但是提取過程繁瑣,技術(shù)、設(shè)備要求高、耗時(shí)長,且有的試劑具有一定的毒性。在經(jīng)典的DNA提取方法上經(jīng)過改進(jìn)、優(yōu)化出

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本文編號：1447074