本文關(guān)鍵詞：豬融合抗菌肽基因雙質(zhì)粒共轉(zhuǎn)化重組畢赤酵母菌的構(gòu)建

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【摘要】：為構(gòu)建高效表達(dá)的豬融合抗菌肽蛋白的重組酵母菌發(fā)酵表達(dá)體系,規(guī)�；a(chǎn)制備新型免疫分子防控動(dòng)物傳染病,本試驗(yàn)從實(shí)驗(yàn)室先前構(gòu)建的p GAPZαA-P質(zhì)粒中克隆出已構(gòu)建好的豬融合抗菌肽CAMPs基因片段。通過(guò)I nfusion技術(shù),將C AMPs片段分別克隆入p PIC9K和p PICZαA真核表達(dá)質(zhì)粒中,并通過(guò)P CR以及測(cè)序驗(yàn)證,成功構(gòu)建了p PIC9K-CAMPs和p PICZαA-CAMPs重組質(zhì)粒。通過(guò)電轉(zhuǎn)化將線性化p PIC9K-CAMPs轉(zhuǎn)入畢赤酵母G S115基因組中,并篩選高拷貝菌株G S-PK-CAMPs。再將線性化p PICZαA-CAMPs轉(zhuǎn)入重組酵母G S-PK-CAMPs中,篩選出高拷貝菌株G S-PKZ-CAMPs。對(duì)重組酵母GS-PKZ-CAMPs進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)后作轉(zhuǎn)錄表達(dá)研究,檢測(cè)抗菌肽是否表達(dá)。最終結(jié)果顯示,成功獲得了G S-PKZ-CAMPs可誘導(dǎo)表達(dá)菌株,這給豬融合抗菌肽蛋白的大規(guī)模發(fā)酵制備和應(yīng)用于動(dòng)物傳染病的防治奠定了可靠的初步基礎(chǔ)。
【作者單位】： 四川大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院生物資源與生態(tài)環(huán)境教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物疫病防控與食品安全四川省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【分類號(hào)】：Q78;S859.797
【正文快照】： 抗菌肽作為宿主防御肽,是機(jī)體天然的免疫保護(hù)屏障,不但具有良好的抗菌活性,還具有很強(qiáng)的穩(wěn)定性與安全性[1],因具有獨(dú)特的抗菌機(jī)制,微生物對(duì)其產(chǎn)生耐藥性的概率極低[2]。國(guó)內(nèi)外的研究結(jié)果表明,抗菌肽不但能夠顯著提高動(dòng)物的抗病能力,有的還能促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)[3]。因此,抗菌肽作為

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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3 尚德靜;白冰;李曉帆;付欣;鄭俊杰;;中國(guó)林蛙(Rana chensinensis)皮膚抗菌肽基因和功能多樣性研究[A];“基因、進(jìn)化與生理功能多樣性”海內(nèi)外學(xué)術(shù)研討會(huì)暨中國(guó)生理學(xué)會(huì)第七屆比較生理學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要[C];2009年

4 黃自然;黃亞?wèn)|;溫劉發(fā);鄭青;廖富頻;胡建雄;黃國(guó)慶;姜麗華;黃永彤;李運(yùn)南;梁淑娃;彭中建;董加喜;夏楓耿;陳松彬;;抗菌肽生物工程及其應(yīng)用[A];全國(guó)桑樹(shù)種質(zhì)資源及育種和蠶桑綜合利用學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2005年

5 廖富，

本文編號(hào)：1305566