本文關(guān)鍵詞：水貂主要細(xì)菌性肺炎的流行病學(xué)調(diào)查

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【摘要】：近年來(lái),隨著經(jīng)濟(jì)的發(fā)展,山東省的毛皮動(dòng)物養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展非常迅速。目前山東省已成為我國(guó)毛皮動(dòng)物養(yǎng)殖第一大省,現(xiàn)在毛皮動(dòng)物飼養(yǎng)量約占全國(guó)的二分之一左右。但是隨著我省毛皮動(dòng)物養(yǎng)殖業(yè)集約化程度的逐漸提高,毛皮動(dòng)物的發(fā)病率也持續(xù)上升已成為制約我國(guó)毛皮動(dòng)物產(chǎn)業(yè)發(fā)展的重要因素,給毛皮動(dòng)物養(yǎng)殖業(yè)造成了很大的經(jīng)濟(jì)損失。水貂出血性肺炎是嚴(yán)重妨礙水貂養(yǎng)殖業(yè)的重要疫病之一,疫情日趨嚴(yán)重。研究表明,犬瘟熱病毒(Canine distemper virus,CDV)、流行性感冒(Influenza)、綠膿桿菌(Pseudomonas aeruginosa,P.aeruginosa)、水貂克雷伯氏菌(1Klebsiella peneumoniae1)、葡萄球菌(Staphylococcus)、大腸桿菌(Escherichia Coli)是引起水貂出血性肺炎的常見(jiàn)病原。本研究采用常規(guī)細(xì)菌分離鑒定技術(shù),對(duì)109份患出血性肺炎的水貂的肺組織進(jìn)行了細(xì)菌的分離鑒定。其中未能純培養(yǎng)的有10株,可純培養(yǎng)的有99株,純培養(yǎng)的99株細(xì)菌在普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上表現(xiàn)各種不同的生長(zhǎng)形態(tài)。提取細(xì)菌基因組DNA后,懫用PCR方法利用細(xì)菌16SrRNA序列通用的引物16S-1492R和16S-27F進(jìn)行擴(kuò)增后測(cè)序獲得菌株16SrRNA基因序列。用NCBI-BLAST軟件,將測(cè)序序列在Gen Bank數(shù)據(jù)庫(kù)中進(jìn)行同源性檢索分析,初步確定細(xì)菌的種屬,再根據(jù)細(xì)菌在生化反應(yīng)中表現(xiàn)的特性確定細(xì)菌種屬。經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)鑒定的結(jié)果表明,99株細(xì)菌中,其中31株克雷伯氏菌,該菌的檢出率為28.4%(31/109);13株綠膿桿菌,該菌的檢出率為11.9%(13/109);34株大腸桿菌,該菌的檢出率為31.2%(34/109);8株葡萄球菌,該菌的檢出率為7.3%(8/109);2株變形桿菌,3株糞腸球菌,2株奇異變形桿菌,2株芽孢桿菌,1株枸櫞酸桿菌,1株弗氏檸檬酸桿菌,1株蠟樣芽孢桿菌,1株橙黃微小桿菌。16SrRNA序列同源性分析結(jié)果表明,13株綠膿桿菌分離菌間的核苷酸序列同源性為84.2%-100%,其中,除SD P.a-9與其他12株間的同源性較低,在84.2%-87.3%之間,其他12株間的同源性相對(duì)較高。遺傳演化分析結(jié)果顯示SD P.A-9與其他12株同源性較低,處于第一分支。SD P.a-4和SD P.a-12親緣關(guān)系較近,SD P.a-1和參考株DM5、s7ps5與同一小分支上親緣關(guān)系較近。分離的31株克雷伯氏菌分離菌間的核苷酸序列同源性為75.2%-100%,SD Kp 8與其他30株同源性較低,為75.2%-76.6%。其余30株同源性均較高。遺傳演化分析結(jié)果顯示SD Kp 8與其余30株親緣關(guān)系較遠(yuǎn),處于第一分支。分離的34株大腸桿菌分離菌間的核苷酸序列同源性為96.3%-100%,同源性很高。遺傳演化分析結(jié)果顯示在進(jìn)化關(guān)系上SD Eco-4與其他33株親緣關(guān)系較遠(yuǎn),處于第一分支,其他33株處于第二分支,親緣關(guān)系均較近。分離的8株葡萄球菌分離菌間的核苷酸序列同源性為97.3%-100%,SD Sau-5與SD Sau-6間的同源性較高,處于一個(gè)小分支。但sau5、sau6與其他六株的同源性較低。SD sau1、SD sau2、SD sau3、SD sau4、SD sau7、sau8六株之間的同源性較高,均在98%以上。遺傳演化分析結(jié)果顯示在進(jìn)化關(guān)系上SD sau5與SD sau6親緣關(guān)系較近,處于第一分支。SD sau2和SD sau3親緣關(guān)系較近,和SD sau4親緣關(guān)系較近,SD sau7與SD sau8親緣關(guān)系較近。SD sau1、SD sau2、SD sau3、SD sau4、SD sau7、sau8六株處于進(jìn)化樹(shù)的第二分支。通過(guò)對(duì)檢測(cè)菌株克雷伯氏菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn),發(fā)現(xiàn)該細(xì)菌對(duì)氟苯尼考,阿米卡星,頭孢他啶,氧氟沙星等藥敏感;通過(guò)對(duì)檢測(cè)菌株綠膿桿菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn),發(fā)現(xiàn)該菌對(duì)頭孢哌酮,鏈霉素,阿米卡星,頭孢他啶,氧氟沙星等藥敏感;通過(guò)對(duì)檢測(cè)菌株大腸桿菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn),發(fā)現(xiàn)該細(xì)菌對(duì)頭孢曲松,頭孢噻肟,頭孢他啶,阿米卡星,氟苯尼考等藥敏感;通過(guò)對(duì)檢測(cè)菌株葡萄球菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn),發(fā)現(xiàn)該細(xì)菌對(duì)阿莫西林,頭孢噻肟,頭孢哌酮,氨芐西林,氟苯尼考等藥敏感。對(duì)病料進(jìn)行解剖,發(fā)現(xiàn)主要以肺臟出血為主。對(duì)送檢病料進(jìn)行分子生物學(xué)檢測(cè),對(duì)水貂肺炎主要病原菌分析,表明克雷伯氏菌、綠膿桿菌、大腸桿菌和葡萄球菌的感染率比較高,大多數(shù)對(duì)阿米卡星、頭孢類的藥物敏感,可根據(jù)病情進(jìn)行對(duì)癥治療。本試驗(yàn)初步了解山東省各地區(qū)水貂出血性肺炎的病原菌的感染率,了解水貂出血性肺炎主要細(xì)菌病的病原及耐藥性,為進(jìn)一步防治水貂出血性肺炎提供依據(jù)。
【學(xué)位授予單位】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：S858.92

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本文編號(hào)：1281408