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新疆梅毒螺旋體大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)抗生素耐藥基因突變位點(diǎn)檢測(cè)研究

發(fā)布時(shí)間:2020-04-28 05:41
【摘要】:目的:通過(guò)檢測(cè)新疆地區(qū)梅毒螺旋體菌株(Treponema pallidum Tp)對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)藥物的耐藥基因突變位點(diǎn),探討本地區(qū)梅毒患者對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)藥物的耐藥情況,為大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)藥物治療梅毒提供依據(jù)。方法:收集2016年3月至2017年10月在新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院就診的204例經(jīng)臨床及實(shí)驗(yàn)室確診的梅毒患者的全血標(biāo)本,血清學(xué)指標(biāo)滿(mǎn)足RPR陽(yáng)性,滴度大于1:8以上同時(shí)TPHA陽(yáng)性。對(duì)所有收集的標(biāo)本進(jìn)行TP基因組DNA的提取,采用PCR擴(kuò)增技術(shù)擴(kuò)增TP特異性基因PolA,陽(yáng)性標(biāo)本用PCR巢式擴(kuò)增23SrRNA耐藥基因,擴(kuò)增產(chǎn)物MboII、BsaI限制性?xún)?nèi)切酶進(jìn)行酶切證實(shí)是否存在耐藥突變位點(diǎn)。結(jié)果:本次實(shí)驗(yàn)中收集的204例全血標(biāo)本中共有27例標(biāo)本擴(kuò)增出了 TP特異性基因PolA,擴(kuò)增率為13.24%,其中漢族13例,維吾爾族7例,哈薩克族6例,其它少數(shù)民族1例,27例陽(yáng)性樣本均為23SrRNA基因陽(yáng)性,耐藥基因檢出率100%,經(jīng)酶切后發(fā)現(xiàn)24例標(biāo)本存在A2058G耐藥突變位點(diǎn),3例存在A2059G耐藥突變位點(diǎn)。結(jié)論:新疆地區(qū)TP菌株對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)藥物存在普遍耐藥現(xiàn)象,大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)藥物不建議作為梅毒的替代治療。
【圖文】:

基因擴(kuò)增,標(biāo)本,菌株,電泳


3.邋2邋PCR電泳結(jié)果逡逑3.2.1邋PolA基因擴(kuò)增結(jié)果逡逑如圖1所示,常規(guī)PCR擴(kuò)增TP菌株的PolA基因,在約377bp處可見(jiàn)目的條逡逑^邋m逡逑一逡逑注:①為lOObpDNA邋Marker,②③④為陽(yáng)性標(biāo)本逡逑圖1臨床標(biāo)本的PolA基因擴(kuò)增結(jié)果逡逑Figl邋Amplification邋of邋PolA邋gene逡逑16逡逑

條帶,長(zhǎng)度,樣本,碩士學(xué)位論文


新疆醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文逡逑3.邋2.邋2巢式擴(kuò)增TP邋23SrRNA基因逡逑如圖2所示,通過(guò)巢式PCR擴(kuò)增,分別擴(kuò)增出長(zhǎng)度分別約為491bp及629bP逡逑左右的目的條帶,其中擴(kuò)增出491bp的樣本約24例,,擴(kuò)增出629bp左右的樣本3逡逑例(如圖2邋A及圖2邋B)。逡逑500bp邐>逡逑W 逡逑崎Q*圈逡逑注:①為DN'A邋Marker.②③④為臨床陽(yáng)性標(biāo)本,圖A為擴(kuò)增出長(zhǎng)度約為491bp左右條帶,圖B逡逑為擴(kuò)增出長(zhǎng)度約為629bp左右條帶逡逑圖2巢式擴(kuò)增TP邋23SrRNA結(jié)果逡逑Fig2邋Results邋of邋Nested邋PCR邋Amplification邋of邋TP邋23SrRNA逡逑17逡逑
【學(xué)位授予單位】:新疆醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類(lèi)號(hào)】:R759.1

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):2643130

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