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無癥狀感染利什曼原蟲快速分子檢測方法的建立與應用

發(fā)布時間:2019-09-24 16:06
【摘要】:目的建立適合快速檢測利什曼原蟲無癥狀感染者的分子生物學方法。方法選擇利什曼原蟲k DNA小環(huán)保守區(qū)的2對快速診斷特異性引物RV1-RV2、K13A-K13B,以杜氏利什曼原蟲山東分離株前鞭毛體抽提的k DNA為模板進行PCR擴增,并通過對擴增條帶測序比對來鑒定方法的可靠性。運用該法對四川省黑水縣105例無癥狀家犬和新疆喀什地區(qū)部分鄉(xiāng)鎮(zhèn)75例無癥狀易感人群的靜脈血樣進行檢測,并同時對上述地區(qū)確診的部分病犬及病人(均為7例)進行檢測,以驗證該方法的可行性及準確性。結果 RV1-RV2、K13A-K13B兩對引物擴增出與預期片段大小一致的條帶,序列比對結果顯示擴增產物在利什曼原蟲種內保守性高;該方法對105例無癥狀家犬及75例無癥狀居民靜脈血樣的陽性檢出率分別為37.14%(39/105)和82.67%(62/75),且對同地區(qū)確診病犬及病人血樣本檢測的陽性率均為100%(7/7)。結論該方法適于目前我國黑熱病流行區(qū)利什曼原蟲無癥狀感染者的檢測,且靈敏快速準確,具有較好的推廣應用價值。
【作者單位】: 山東省醫(yī)學科學院、山東省寄生蟲病防治研究所;
【基金】:科技部重大科技專項基金(2008IPB202) 山東省醫(yī)學科學院青年基金項目
【分類號】:R531.6

【參考文獻】

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10 曾祥Z,

本文編號:2540940


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