大鼠腦中催產(chǎn)素受體cDNA的克隆和在大腸桿菌與CHO細胞內(nèi)的表達
發(fā)布時間:2025-01-18 16:37
<正> 目的:克隆腦中OTR cDNA編碼區(qū)全長,探討腦內(nèi)OTR的結(jié)構(gòu)、功能和及OT-OTR的作用機制。方法:①采用RT-PCR方法從大鼠外周和中樞神經(jīng)組織中同時克隆OTR的cDNA編碼區(qū)全長,獲得OTRcDNA;②利用pET-28-α載體構(gòu)建OTR全長與His tag融合蛋白原核表達載體:pET-28-α-OTR;利用PGEX-4T-3載體構(gòu)建了OTR不同結(jié)構(gòu)域與GST(GlutathioneS-Transferase,谷胱甘肽-S轉(zhuǎn)移酶)的融合蛋白表達載體,并在大腸桿菌表達株BL21內(nèi)進行了這些重組質(zhì)粒的誘導表達研究;③利用細胞培養(yǎng)和真核轉(zhuǎn)染技術(shù),建立穩(wěn)定表
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本文編號:4028859
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